日立7100全自动生化分析仪试剂携带污染分析及处理对策

日立7100全自动生化分析仪试剂携带污染分析及处理对策

莫国新

莫国新（广东省韶关市中医院检验科512026）

【摘要】目的探讨日立7100全自动生化分析仪检测标本时试剂携带污染情况及其处理对策。方法采用正常健康体检者混合血清对24个检测项目逐一配对检测，观察污染情况，并采取相应的措施处理污染。结果携带污染检测中，污染项目共35项次，经纯水清洗后23项消除，再次经酸性及碱性清洗后9项消除，有效地消除了携带污染，经三种清洗方法清洗后总有效率为94.3％，仅剩余2项需特殊清洗通道清洗。结论日立7100全自动生化分析仪的试剂携带污染可以通过实验检测，分析相互之间的干扰关系，采用适当的清洗处理措施，可有效的降低试剂携带污染。

【关键词】全自动生化分析仪试剂携带污染处理对策

【中图分类号】R197.39【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）15-0132-02

Analysisofpollutioncausedbyreagentcarry-overandcountermeasuresinHitachi7100automaticbiochemicalanalyzer.

【Abstract】ObjectiveToinvestigatepollutioncausedbyreagentcarry-overandeffectivetreatmentmeasuresinHitachi7100automaticbiochemicalanalyzer.Methods24itemswerepairedtodetectthepollutioncausedbyreagentcarry-over.Thecorrespondingtreatmentmeasuresweretakentoavoidthepollutioncausedbyreagentcarry-over.ResultsInthecarry-overtests,atotalof35testswereseriouslypolluted.Therewerestill11testsafterbeenwashedbywater.Aftercleanedbyacidorbasefluidtherewerestill2tests,only2testsneedspecialwaytocleanthepollutioncausedbyreagentcarry-over.Thetotaleffectiverateofthreekindsofwashingwaysis94.3％.ConclusionThepollutioncausedbycarry-overcanbereducedeffectivelybyadoptingappropriatetreatmentmeasuresinHitachi7100automaticbiochemicalanalyzer.

【Keywords】automaticbiochemistryanalyzerreagentcarryoverpollutiontreatmentmeasures

随着检验医学的发展，越来越多的自动化仪器及测定试剂盒在临床检验中使用，全自动生化分析仪具有多项目、多样本的处理能力，具有高效率、低强度、重复性好、避免人为干扰等良好性能，为更好的服务临床提供的有力的帮助。然全自动生化分析仪因其工作模式特性，一个项目对紧随其后的一个甚至几个项目的测定会带来一定程度的试剂污染，这些问题受到已业界广乏关注[1]。且当生化仪长期使用，其清洗能力下降，比色杯老化，黏附物增加，生化仪内污垢的积聚，测试顺序安排不当等及常规清洗不能有效消除交叉污染时，就会增加携带污染的可能，这种现象随日剧增，后果引起测定结果偏高或偏低，使检测结果的可靠性受到一定程度的影响。这种情况的发生的主要原因，往往多数是试剂间的交叉污染造成的[2]。为了提高检验报告的质量，更好地为临床服务，我们通过对日立7100全自动生化分析仪上的24个项目进行实验检测分析，寻找交叉污染的可能因素，采取相应措施，避免和减少污染的发生，现汇报如下。

1材料与方法

1.1仪器与材料仪器7100全自动生化分析仪，实验分析项目共24项，分别为Ca、Mg、P、丙氨酸氨基转移酶(ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、胆碱酯酶(CHE)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH）、α-羟基丁酸脱氢酶(α-HBDH）、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血糖(GLU)、总胆汁酸(TBA)、淀粉酶(AMY)、前清蛋白(PA）、总胆红素(TBIL）、结合胆红素(DBIL）。诊断试剂LDL-C由日本第一化学药品株式会社提供，TBA由澳斯邦公司提供，余均由日本协和及日本一化提供。采取20个健康体检者正常血清，制备混血清约60毫升，充分混合后置4℃恒温冰箱，以备使用。

1.2检测方法分别为：化学比色法(Ca、Mg）、紫外法(P)、酶动力法(ALT、AST、GGT、ALP、CHE、LDH、α-HBDH、BUN、TBA）、酶法(Cr、UA、TG、TCHO、LDL-C)，葡萄糖氧化酶法(GLU)、糖苷底物法(AMY)、免疫比浊法(PA、CK、CK-MB）、钒酸盐氧化法(TBIL、DBIL)。以上均按试剂盒说明书设定分析参数。

1.3对照值的确定以正常健康体检者正常血清混合血清为标本，分别检测Ca、Mg、P、ALT、AST、GGT、ALP、CHE、CK、CK-MB、LDH、α-HBDH、BUN、Cr、UA、TG、TCHO、LDL-C、GLU、TBA、AMY、PA、TBIL、DBIL以上各项指标各10次，每测一个项目后将仪器冲洗，以每个项目的后5次测定值计算均值作为该项目的参比值。

1.4携带污染初试对常规检测项目24项进行交叉污染测试，用正常混合血清，对25个项目逐一配对(施污染项目为A，受污染项目为B)进行测试，逐一配对进行测试，观察相互间污染情况。计算(实测结果／五次平均值－100％)，相差±5％以上者为疑似污染，应进一步确认。

1.5携带污染的确认方法将上述初试污染项目组合列出.用正常混合血清在测试污染项目后，测定受污染项目3次（A1,A2,A3），计算(以受污染项目的第1次测定值A1／第3次测定值A3－100％)，相差±5％以上确定为污染，进入清洗步骤。

1.6清洗后效果观察分别用仪器内部纯水，碱性或酸性清洗液清洗后，分别重新测试，依次仍用正常混合血清在测试污染项目后，测定受污染项目3次（A1,A2,A3），检验清洗效果，计算(以受污染项目的第1次测定值A1／第3次测定值A3－100％)，相差±5％以上确定为清洗无效。

2结果

2.1携带污染确认实验结果在24个检验项目逐一配对检测的实验中，确定的污染项目组合共35项。其污染的范围和程度，均可对实验结果产生了比较严重的影响。见表1。

表1携带污染确认实验结果(％)

注：空白处为表示偏差小于5%。

2.3碱性/酸性清洗液清洗效果将上述水清洗无效的项目经酸或碱清洗后9项消除了携带污染，但仍有受污染项目Mg及P两检验指标清洗无效，对3种清洗方式均无效，需采用其特殊清洗通道消除污染。经三种清洗方法清洗后总有效率为94.3％（33/35）。

3讨论

随着科学技术的不断发展，医学生化检验工作基本进入自代化的进程，全自动生化分析仪器为我们的检验工作工作提供了方便、快捷及重复性好等好处，然全自动生化分析仪也非十全十美，也带来了一定的弊端：检验项目的交叉污染，污染源基本有试剂污染、样品污染及机器内部各部件的污染。一个项目紧接一个项目的测定会带来一定程度的携带污染，上一个测定试剂中含有下一个测试所要测定的物质，则直接干扰下一检测的测定结果，试剂间携带污染已成为主要污染源，严重影响着检验的准确性[3]。提高测定结果的准确性为临床更好的服务，对广大检验工作者至关重要。我们实验结果表明，不同的检测项目，不同试剂之间都存在不同程度的携带污染，合理的利用全自动分析仪的清洗功能，可以避免大部分试剂之间的交叉污染，但仍有部分项目存在污染，在24个检验项目逐一配对检测的实验中，确定的污染项目组合共35项，其污染的范围和程度，均对实验结果产生了比较严重的影响，如不给予干预处理，会造成严重的后果。经纯水清洗后，23项检测项目基本消除了携带污染，11项仍存在着携带污染，说明大多数项目只要充分清洗就可以消除一部分携带污染，节约了特殊清洗通道，降低清洗程序，节约时间及经济成本。如经水清洗、酸或碱清洗后，仍清洗无效，则需采用其特殊清洗通道消除污染。总之，经三种清洗方法清洗后去污染总有效率为94.3％。本研究继续对试剂交叉污染进一步分析，存在交叉污染的本质因素为：对镁离子施污染的Amy、ALP、TCHO、CK、CK-MB及TG等6种试剂中，均含有大量镁离子，其中TG试剂中，镁离子作为辅酶其含量最高，因此在进行镁离子测定过程中就给予了必然的污染。对P施污染的TCHO、CK、CK-MB等3个试剂中同样含有大量的磷成份。因此在进行测试检测项目时，充分地了解各测试项目的反应原理、试剂成分、中间产物等，合理安排检测项目的顺序，可降低试剂携带污染对化学分析结果的影响程度[4]。然而这些影响对于单个样本来说或许通过设置项目的先后顺序予以解决，但在实际工作中每天都有成千上万的不同项目的测试标本，项目间的组合非常复杂，单凭项目设置基本无法解决交叉污染问题[5]。因此合理利用分析仪清洗程序，充分清洗则是解决这一问题的最好方法[6]。从我们的实验结果可以看出，受影响项目用纯净水洗涤一次后，就可以将受污染大大降低，污染率大大降低。而用清水洗涤不能排除交叉污染的，可以用碱性液或酸性液洗涤，交叉污染基本可以排除，可得到较理想结果。现如何合理的利用全自动分析仪的清洗功能，又不明显降低全自动分析仪的使用功效，最大程度减少项目间交叉污染是广大检验工作者所思考的问题[7]。目前关于试剂携带污染广大临床检验工作者也探索了很多种处理措施，如增加纯水、碱性洗液、酸性洗液冲洗量；调整检测顺序；固定试剂探针、比色杯的使用范围；换用相互污染小的试剂或方法及其他综合处理措施等[8]。

总之，全自动生化分析仪的试剂携带污染及污染来源可以通过实验进行检测分析，采用适当的处理措施，有效地降低试剂携带污染，提高检测结果的重复性和准确性。日立7100全自动生化分析仪，吸纳了尖端生化分析仪器最先进的设计，采用了以往各种成熟与稳定的技术，并注入了新的技术成果，为临床诊断提供快速、准确的全自动化检测手段，然交叉污染不可避免，在以后的临床使用中应加强质量控制，在实际工作中应结合理论与实际应用，积极摸索出一套符合本单位工作的方法，更好的服务临床，服务广大人民群众。

参考文献

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[8]汪志萍,谈宗明,李尤薇.全自动生化分析仪试剂携带污染的检测及处理措施[J].检验医学与临床,2012,9(15):1864-1865.