微柱凝胶法交叉配血不合原因分析

微柱凝胶法交叉配血不合原因分析

朱奕张爱根李妙珊

朱奕张爱根李妙珊（深圳市第二人民医院输血科广东深圳518000）

【摘要】目的分析微柱凝胶法交叉配血不合的原因和处理方法。方法用微柱凝胶法对本院输血患者进行交叉配血。结果4826例配血检出阳性31例占0.64%，其中假阳性27例占阳性例数87.1%，真阳性4例占阳性例数12.9%。结论微柱凝胶法配血灵敏度高，但易引起假阳性，交叉配血前要注意标本充分抗凝及离心。一些恶性肿瘤及血液性疾病也可能出现同型交叉配型不合，应根据不同病因去除影响交叉配血不合的因素，以确保输血安全。

【关键词】微柱凝胶法交叉配血不合安全输血

【中图分类号】R457.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）07-0064-02

微柱凝胶法由于标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简单，结果可较长时间保存，在临床交叉配血及输血前检验中得到越来越广泛的运用[1]。笔者采用微柱凝胶法对4826例患者进行交叉配血，对交叉配血不合的原因进行分析并提出相关处理措施，现报告如下。

1资料与方法

1.1研究对象2012年7月至2012年12月我院输血患者共计4826例。

1.2试剂及仪器微柱凝胶卡及专用配套离心机和孵育机由北京斑柏斯公司提供，生产厂家：西班牙DiagnosticGrifols,S.A.

1.3方法微柱凝胶法交叉配血试验、直接间接抗人球蛋白试验以及不规则抗体筛查试验均严格按照试剂说明书操作。1-2%的红细胞悬液50ul加血清25ul，专用孵育箱37℃孵育15min，离心10min观察结果。红细胞位于凝胶上层或散在于凝胶中部的为阳性，红细胞沉于凝胶底部的为阴性。

2结果

4826例交叉配血试验中出现31例配血不合，占0.97%。对所有阳性结果加做直间抗试验和不规则抗体筛查试验及自身对照试验进行确证。仅4例检出不规则抗体阳性，其中抗E抗体3例，抗C抗体1例，均为十次以上输血病人。其他27例均证实为假阳性反应，占阳性例数65.85%。其中5例标本抗凝不完全，7例离心不充分，其余6例为自身免疫性溶血性贫血患者，9例为多发性骨髓瘤患者，见表1。

表131例交叉配血不合结果

3讨论

微柱凝胶法配血用血量少，灵敏度高，便于自动化，标准化，但在实际操作中，会因为一些因素出现假阳性。从本文统计数据看出自身免疫性溶血性贫血患者以及多发性骨髓瘤疾病患者在微柱凝胶法交叉配血中易发生交叉配血不合现象，作者就微柱凝胶法交叉配血不合原因分析及处理措施总结如下。

操作因素①标本抗凝不充分，血浆中的纤维蛋白干扰或红细胞呈小凝块，在配血中即使没有抗原抗体反应，离心时却可以阻止红细胞透过凝胶层而出现假阳性。对这种现象采用EDTA真空采血管时要及时充分混匀。②标本离心不充分，大量的白细胞或血小板聚集形成凝块粘附在凝胶上阻止红细胞通过而呈假阳性。因此离心时2000r/min应离心5min。吸取红细胞时应在整个压积红细胞的中间部位吸取，避免吸入上层白细胞、血小板和下层凝块。③某些病理情况下冷凝集素效价会明显升高，造成假凝集，因此孵育时间要充分，并要控制室温。可用37℃盐水洗涤红细胞后，经吸收放散试验，用放散掉自身抗体的自身红细胞及吸收后的血清做交叉配血试验。

疾病因素①自身免疫性溶血性贫血患者的血清中含有高效的病理性自身抗体，可与各型红细胞及自身红细胞发生凝集，造成主次侧均发生凝集[2]。对于由冷凝集素引起的交叉配血不合可用37℃盐水洗涤红细胞后,经吸收放散试验,用放散掉自身抗体的自身红细胞及吸收后的血清做交叉配血试验。完全抗体(IgM)引起的交叉配血不合,自身红细胞凝集多由IgM引起的,为了消除其影响,采用巯基试剂处理血浆或红细胞,巯基试剂可以裂解完全抗体分子间的二硫键,从而消除血型检测和交叉配血的影响[3]。有温抗体的患者在交叉配血不合时可选择多人份ABO血型相同的血液做配血试验,选择凝集最弱的供血者血液输注。如果ABO血型一时难以确定,患者的病情又十分危急,需要紧急输血抢救患者的生命,此时可立即与O型洗涤红细胞输注。②多发性骨髓瘤及巨球蛋白血症患者由于血清中产生大量M蛋白包裹红细胞,使红细胞间的Zeta电位下降,易于聚集呈缗钱样改变,产生假凝集[4]。在交叉配血时可采取如下措施:用多数供血者做配血试验,选择凝集最弱的作为供血者;交叉配血在37℃下进行;配血标本不可多次反复使用,而应该每配一次血,均重新采集配血标本。而对于血清中仅有少量自身抗体的患者,由于其强度不足以掩盖明显的同种抗体,因此无需进行自身吸收试验,可以直接交叉配血[5]。

血型不规则抗体是指除ABO血型系统的抗体以外的所有抗体[6]，绝大多数为免疫球蛋白IgG类抗体。不规则抗体在正常人群中由于检出率低，往往被医生忽视，但对于反复输血患者阳性检出率明显升高[7]。近年研究表明不规则抗体是引发迟发性免疫反应和溶血性输血反应的主要原因[8]。本文总结发现4例检出不规则抗体的患者反复输血均为10次以上。对4例阳性标本进行抗体筛选,我们发现4例标本中一例出现抗c抗体，其他三例出现了抗E抗体。RH血型抗原的出现频率为D>c>E>C>e,在人群中,E抗原阳性占47.88%,阴性者占52.12%,因此,RhE不合的输血机会较多,RhE表面的抗原免疫原性虽然远不如RhD,但任何输血量均可刺激产生抗体,引起交叉配血的不合。由于目前根据临床输血技术规范,只进行D抗原的检测,忽略了抗C、抗E，故将E，c抗原列入常规检测中,也可有效减少交叉配血不合发生率。

参考文献

[1]王权.微柱凝胶免疫检测技术在临床交叉配血中的应用[J].中国误诊学杂志，2010,10（10）：2358-2359

[2]朱剑荧,兰炯采,胡利亚,等.自身免疫性溶血性贫血患者的血型检定研究[J].中国实验血液学杂志,2004,12(4):525-527

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[6]胡丽华.临床输血检验[M].2版.北京：中国医药出版社，2010:20-21

[7]朱奕,薛俭成.微柱凝胶法检测不规则抗体在输血中的应用[J].现代医药卫生,2006,22(17):2596-2597

[8]赵朝晖.1547例输血前患者进行不规则抗体检测分析[J].检验医学与临床,2009,6(22):1947-1948