孙艾军
(大连市第六人民医院辽宁大连116031)
【摘要】目的:探讨乙型肝炎基因型与疾病病情的临床关系。方法:采用PCR微板核酸杂交ELISA技术检测299例慢性乙型肝炎患者HBV基因型,并分析其与HBVDNA定量和HBeAg阳性率的关系。结果:本组患者HBV基因分型结果以C型143例最多,B型119例次之,其他类型少见;肝衰竭患者HBVC基因型(53.3%)显著高于B基因型(34.7%,P<0.05);C型患者HBVDNA定量(7.0±1.1lgcopies/ml)和HBeAg阳性率(68.5%)均明显高于B型(6.1±1.0lgcopies/ml和45.4%,P<0.05)。结论:本组乙型肝炎病毒基因分型以C型和B型居多,在肝衰竭患者HBVC型感染者多于B型。
【关键词】乙型肝炎;HBV基因型;微板核酸杂交;聚合酶链反应
【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】B【文章编号】1003-5028(2015)7-0178-01
乙型肝炎病毒(HBV)存在多种不同的基因型,而这些基因型与病毒变异和慢性肝病患者的病情严重程度有着十分紧密的关联。近年来,已有较多关于HBV基因分型与肝脏病变严重程度方面的研究报道。目前基因分型检测多采用基因测序方法,但有耗时长、检测成本高和操作复杂等缺点,而聚合酶链式反应(PCR)微板核酸杂交酶联免疫法(ELISA)能迅速且简便地检测乙型肝炎病毒基因型。本研究采用PCR微板核酸杂交ELISA技术检测了乙型肝炎病毒感染者乙型肝炎病毒基因分型情况,现报道如下。
1资料与方法
1.1病例来源2012年6月~2013年7月我院门诊及住院治疗的299例慢性乙型肝炎患者,男212例,女87例,平均年龄为38.2±8.5岁。符合2010年修订的诊断标准,其中慢性肝炎轻度74例,中度78例,重度72例和肝衰竭75例。患者HBVDNA阳性。除外合并其他嗜肝病毒重叠感染、药物性肝炎、自身免疫性肝炎和酒精性肝病等患者。
1.2检测方法采用PCR微板核酸杂交ELISA技术检测HBVDNA基因分型(上海之江生物科技有限公司),通过在微孔中包被型通用序列探针与待测PCR产物予以杂交处理,然后再用酶标记各型探针来检测HBV的所属亚型;HBVDNA检测灵敏度为103copies/ml;采用CMIA法检测HBeAg滴度(美国Abbott公司),根据试剂盒提供的标准判断。
1.3统计学方法采用SPSS13.0软件进行统计分析,采用t检验和卡方检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1HBV基因分型情况在本组299例患者中,HBV基因分型情况见表1,其中肝衰竭患者HBVC基因型显著高于B基因型(P<0.05)。
2.2HBV基因分型与HBVDNA定量和HBeAg阳性率的关系HBVC型感染患者HBVDNA定量(7.0±1.1lgcopies/ml)和HBeAg阳性率(68.5%)均明显高于B型(6.1±1.0lgcopies/ml和45.4%,P<0.05)。
3讨论
不同基因型HBV可能具有不同的毒力,且与HBV的感染途径和疾病发生、发展等过程有一定的相关性。有较多研究结果显示,B基因型与较轻的病变有关,而C基因型则与较重的病变有关。本组肝衰竭患者HBVC型感染率明显多于B型。关于C基因型引起的肝脏病变多较重于B基因型的原因,一般认为可能与C基因型更易出现T1762变异及基本核心启动子(BCP)的变异等有关。
国外相关研究发现,C基因型患者HBVDNA水平和HBeAg阳性率均显著高于B型感染者,提示C型病毒株的致病性和复制性可能增强,进一步证实了感染C型病毒株后更易出现较严重的肝脏病变,C型HBVDNA复制较活跃,易形成持续病毒血症,不易发生抗原抗体的血清学转换。有文献提示C基因型患者肝功能各指标与B基因型患者差,提示C基因型患者呈现更为显著的肝脏炎症和损害现象。在慢性肝衰竭患者基因型分布明显以C型为主。由于C基因型HBVDNA长期高水平,可导致肝脏炎症和组织损伤较为严重,故肝炎肝硬化和肝细胞癌的发生率均比较B型者高。本研究结果显示,C型感染者BVDNA定量、HBeAg阳性率明显高于B型,说明C基因型感染者易引起较重肝损伤和不佳的临床预后,与目前大多数报道的结论相符。
采用PCR微板核酸杂交ELISA技术能快速对HBVDNA基因型进行检测,具有灵敏度高、重复性较好和易自动化等多种优点。
参考文献:
[1]中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病分会.慢性乙型肝炎防治指南(2010版)[J].中国医学前沿杂志(电子版),2011,3(1):66-82.
[2]张智,张珍,李楠等.185例广东人乙型肝炎病毒基因分型及耐药基因检测[J].广东医学,2008,29(1):97-98.
[3]ChuCJ,KeeffeEB,HanSH,etal.HepatitisBvirusgenotypesintheUnitedStatesresultsofanationwidestuady[J].Gastroenterology,2003,125(2):444-451.
[4]郭瑜,刘晓燕,胡惠梅等.山西省乙型肝炎病毒基因型的初步研究[J].中华实验和临床病毒学杂志,2006,20(4):361-363.
[5]ChanHL,HuiAY,WongML,etal.GenotypeChepatitisBvirusinfectionisassociatedwithanincreasedriskofhepatocellularcarcionma[J].Gut,2004,53(10):1494-1498.
[6]谭文婷,邓国宏,王宇明等.重庆地区乙肝病毒基因型分布及其临床意义[J].第三军医大学学报,2008,30(24):2321-2323.
[7]FangSK,ChenHB,FontanaRJ,etal.VirologicresponseandresistancetoadefovirinpatientswithchronichepatitisB[J].JHepatol,2006,44(2):283-290.