循环酶法同型半胱氨酸试剂的应用评价

循环酶法同型半胱氨酸试剂的应用评价

王尚金

王尚金（贵州省岑巩县人民医院检验科贵州岑巩557801）

【摘要】目的为验证循环酶法同型半胱氨酸测定试剂（Hcy）在迈瑞BS400生化分析仪上的测定结果能否满足需要，特开展本评价试验。方法通过对Hcy的精密度、线性范围、准确度、干扰试验指标进行系统评估。结果天内精密度（用不精密度CV%值表示）小于3%，天间精密度CV%小于5%；在0.0～50μmol/L范围内，线性偏差小于10%，相关系数r为0.9997；质控偏差在10%范围内。当甘油三酯（TG）浓度≤10mmol/L，血红蛋白（Hb）浓度≤3g/L，维生素C（Vc）浓度≤2540μmol/L，胆红素（BIL）浓度≤342μmol/L时对本法无显著性干扰。结论该试剂完全符合临床应用要求，且操作简单，能适用于迈瑞BS400全自动生化分析仪。

【关键词】同型半胱氨酸生化分析仪应用评价

【中图分类号】R446【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2013）03-0291-01

循环酶法同型半胱氨酸测定试剂原理是采用小分子捕获技术的S-腺苷同型半胱氨酸水解酶。同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，循环放大，同时产生腺苷。腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使NADH转化为NAD+，NADH在340nm波长处吸光度的变化与Hcy的含量成正比。通过与同样处理的Hcy校准品比较，即可计算出样品中Hcy的含量。本文应用美国国家实验室标准委员会（NCCLS）的部分EP系列文件对该试剂的精密度、准确度、线性范围、抗干扰性进行评价，评价结果报告如下：

1材料和方法

1.1仪器与试剂

1.1.1仪器

迈瑞BS400全自动生化分析仪。

1.1.2试剂

浙江伊利康公司提供的循环酶法同型半胱氨酸、配套2个不同浓度的校准品，Randox公司生产的两个水平的质控品；所需干扰物质由浙江伊利康公司提供。

1.2方法

均按试剂盒生产厂商提供测定参数、测定方法进行。

2实验结果

2.1精密度[2]取低、高两个不同浓度的混合血清，连续测20次，计算天内精密度，结果见表1。以后各自分装成20支小管冷冻保存，每天取出1支测1次，共测20天，计算天间精密度，结果见表2。

表1天内精密度测定结果（单位：μmol/L，n=20）

x-SDCV%

低值12.760.28532.24

高值20.850.54272.60

表2天间精密度测定结果（单位：μmol/L，n=20）

x-SDCV%

低值12.310.60964.95

高值21.240.783.67

2.2准确度

测定两个水平浓度的定值质控物，每个浓度测定3次，计算相对偏差分别为5.60%、1.73%，符合试剂厂家设定的要求。

2.3线性范围测定[3]

取一份Hcy浓度接近50μmol/L高值标本的和一份浓度为接近0μmol/L的低值标本（用生理盐水代替），按照10/0、9/1、8/2、7/3、6/4、5/5、4/6、3/7、2/8、1/9、0/10的比例稀释，每个稀释浓度重复测定3次，求得均值为Y，以理论值为X，经线性回归分析，结果回归方程为：Y=1.0242X+0.2803，r2=0.9994，线性相对偏差均小于10%，说明试剂在0.0～50μmol/L范围内线性良好。

2.4干扰试验

取一份新鲜的混合血清，测定其Hcy浓度为26μmol/L，将其分成12份，在其中按比例分别加入不同浓度的抗坏血酸（维生素C）、血红蛋白、胆红素和脂肪乳糜（VLDL）组份；另取空白3份分别加入生理盐水作为空白对照管，再分别测定各管的Hcy浓度，结果见表3。

表3

3结论

上述实验表明，循环酶法同型半胱氨酸测定试剂精密度高，天内精密度CV%小于3%，天间精密度CV%小于5%；在0.0～50μmol/L范围内，线性偏差小于10%，相关系数r为0.9997；质控偏差在10%范围内。当甘油三酯（TG）浓度≤10mmol/L，血红蛋白（Hb）浓度≤3g/L，维生素C（Vc）浓度≤2540μmol/L，胆红素（BIL）浓度≤342μmol/L时对本法无显著性干扰。该试剂各项性能指标都能达到临床诊断试剂的要求[4]，且使用方便，可以在迈瑞BS400全自动生化分析仪上作为常规方法使用。

参考文献

[1]TanakaA，SuemaruK。ArakiH．Anewapproachforfunctionanditspracticalapplication[J]．JPharmacolSci，2007，105(1)：1-5．

[2]杨昌国等．精密度评价和方法比较中NCCLS评价方案的应用[J]．临床检验杂志，1999；17(1)：47.

[3]杨昌国等．线性评价和干扰实验中NCCLS评价方案的应用[J]．临床检验杂志，1999；17(3)：184.

[4]李顺君．临床生化实验室试剂性能评价指标探讨[J]．现代检验医学杂志，2005，20(1)：4647．