245例狂犬病毒IgG抗体ELISA检测结果判断的讨论

245例狂犬病毒IgG抗体ELISA检测结果判断的讨论

但吉元刘丹

但吉元刘丹（湖北省赤壁市疾病预防控制中心湖北赤壁437300）

【中图分类号】R737.9【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）23-0196-01

【摘要】目的了解狂犬疫苗免疫效果与在实际工作中检测报告的误差（误判率）。方法收集采用ELISA法检测的不同批次245例狂犬病毒IgG抗体的OD值，计算出每次阳性对照样本的OD值（以下称为临界值）正负10%的人数。结果245例狂犬检测人员中有50人次结果判阴性，其余195人次为阳性。其中阴性结果中在临界值下限10%的人数有15人次，此种结果占总检测人数的6.1%为负误差；阳性结果中OD值在临界值10%上限的人数有13人次，此为阳性结果中正误差人数占总检测人数的5.3%。结论报告结果中有5.3%的阳性结果有机率小于或等于临界值(0.5IU/ml中和抗体)，此部分人员应当补接种狂犬疫苗，当引起重视。

【关键词】狂犬病毒IgG抗体ELISA检测

1方法及试剂设备

人狂犬病毒IgG抗体测定试剂盒（ELISA法）；生产厂家：宁波开润生物药业有限公司；主要仪器设备：酶标仪，生产厂家安图实验设备有限公司；5-20UL移液器。操作严格按试剂盒说明书进行。

2结果

2.1基本资料见表。

245例检测者中OD值在临界值10%上下限的人员信息表

2.2245例检测者中有50例检测结果为阴性，占总检测人数的20.4%。

2.350阴性结果中有15例样本OD值在10%的临界值下限范围内，占阴性结果的30%。

2.4195例阳性结果中有13例OD值在10%的临界值上限范围内,占阳性结果的6.7%，占总检测人数的5.3%。

2.5方法误差的人数有28人在10%的临界值上下限范围内,占总检测人数的11.4%

3讨论

3.1当前狂犬疫苗免疫效果多采用ELISA法检测评价,所需样本量少,操作简便易于普及，可是所检测的抗体为总抗体水平,即样本OD值等于临界值时,实际上起作用的中和抗体小于0.5IU/ml按试剂说明书可知OD值高的抗体水平就高，但不能证明中和抗体的水平也高，只能说是总抗体水平高，应该告知被检测者。

3.2根据方法说明书告知本方法精密度为不超过15%，本人现取10%的精密度统计临界值10%上下限OD值有28人次。根据检测方法其OD值,低于临界OD值酶标仪自动记录为阴性结果；高于阳性OD值的为阳性。现245例检测结果中有15例阴性的OD值在临界OD值下10%的范围，内此15人有机率为阳性,但实际上中和抗体没有达到免疫效果；有13人虽为阳性结果但在方法的误差范围内，即总抗体含量小于或等于临界值，而与临界值OD值相等的样本，因为是总抗体所以其中和抗体就会小于0.5IU/ml应补种疫苗。

3.3因为每一种ELISA法检测抗体的试剂盒，都有一个标准曲线检测范围，而在实际检测中样本中所含的抗体水平不同，有些抗体水平高的样本要进行稀释才能在标准曲线测定范围内，另本方法标准没有加稀释液，样本与标准阴阳对照并不是严格条件上的一致，为了我们检测结果判定准确必要时可做预试验。

3.4同一操作人员同一批次用同一试剂进行多个样本检测，可以得到比较理想的测定结果也就消除了系统误差，在报告结果时应注明每次测定的临界值，并考虑正误差的情况对此类被检人群另加注明,避免中和抗体水平没有达到免疫效果。