探讨不同浓度的富硒螺旋藻提取物对卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响

探讨不同浓度的富硒螺旋藻提取物对卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响

段秀红1孙建宇2王晓红2

段秀红1孙建宇2王晓红2

（1河北省张家口市中医院妇科河北张家口075000）

（2河北省张家口市第二医院普外科河北张家口075000）

【摘要】目的：探讨不同浓度的富硒螺旋藻提取物对卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响。方法：从富硒螺旋藻（Se-SP）中提取Se-PSP总糖及各组分，然后对组分实施分离纯化处理，观察质量分数最高的组分在不同浓度的情况下对卵巢癌患者SKOV-3细胞生长的影响。结果：Se-PSP总糖中4种多糖组分的质量分数中，Se-PSP2是其主要成分；随着质量浓度的逐渐增加，抑制率逐渐上升，P＜0.05。结论：Se-PSP的主要成分就是Se-PSP2，其对于卵巢癌患者的SKOV-3细胞生长有一定的抑制效果，对肿瘤疾病的治疗有一定的帮助。

【关键词】富硒螺旋藻；卵巢癌；SKOV-3；Se-PSP2

【中图分类号】R737.31【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2016）10-0084-02

富硒螺旋藻中的提取物螺旋藻硒多糖含有螺旋藻多糖和硒两种主要成分。硒能对肿瘤生长产生抑制作用，并且能达到清除体内自由基、调节免疫的功效[1]。而螺旋藻多糖同样能增强免疫机能，降血糖、降血脂、抗病毒等，其药理作用较为独特[2]。本次研究主要针对不同浓度的富硒螺旋藻提取物对卵巢癌SKOV-3细胞生长的影响进行分析，旨在探究富硒螺旋藻提取物本身的抗肿瘤临床价值，现将研究报道如下。

1.材料与方法

1.1细胞株与试剂

富硒螺旋藻经干燥磨粉后常温保存，干粉中硒含量为25.0μg/g；SKOV-3卵巢癌细胞株从肿瘤实验室获取。

1.2Se-PSP分离纯化

将Se-PSP总糖放置于60℃和pH11水浴条件下经由超声波处理1h可得，然后采用XK-16层析柱装填DEAE-纤维素开展层析处理，并进行紫外仪监测处理，采用自动收集器对不同峰洗脱液进行收集，进一步浓缩后再实施透析。将Se-PSP总糖及NaCL与各多糖组分透析纯化之后，对Se-PSP各组分进行收集，并对其质量进行测量。对Se-PSP总糖中不同组分含量进行测定。

1.3不同组分溶液配制

对Se-PSP总糖进行分离后，获得Se-PSP1、Se-PSP2、Se-PSP3、Se-PSP4不同的组分，然后将各组分配制成不同的培养液。同时，稀释Se-PSP2至不同倍数，分别配制成不同浓度的Se-PSP2培养液。

1.4统计学方法

采用SPSS17.0对各项数据进行分析处理，计数资料以“%”表示，行χ2检验，计量资料以（x-±s）表示，行t检验，P＜0.05表明对比差异有统计学意义。

2.结果

2.1Se-PSP分离纯化情况

经由超声波提取并进行分离纯化之后，获得4种不同分子质量的多糖组分，按照顺序排列为Se-PSP1、Se-PSP2、Se-PSP3、Se-PSP4。经检测后，发现Se-PSP总糖中4种多糖组分的质量分数依次为4.76%、70.15%、9.83%、3.22%。其中，Se-PSP2是其主要成分，经测得Se-PSP2的蛋白含量为（0.44±0.03）%，糖含量为（98.51±3.91）%。

2.2不同组分对SKOV-3细胞生长的抑制情况

当质量浓度达到10.0μg/mL时，Se-PSP总糖及4种组分对卵巢癌SKOV-3细胞的生长均会产生一定的抑制效果，对细胞的抑制率分别达到（33.26±5.25）%、（22.29±8.41）%、（44.87±4.91）%、（45.39±4.76）%、（46.18±4.27）%。

2.3Se-PSP2不同质量浓度对SKOV-3细胞生长的抑制情况

依据0.001的质量浓度为基数，101～106为变化参数，得到7个不同质量浓度的Se-PSP2，分别通过0.001、0.001×101、0.001×102、0.001×103、0.001×104、0.001×105、0.001×106μg/m的Se-PSP2对卵巢癌SKOV-3细胞进行作用，时间为3d。结果发现，随着质量浓度的逐渐增加，抑制率逐渐上升，抑制效果呈现出剂量依赖性变化，P＜0.05。见表1。

3.讨论

本组研究发现，当质量浓度达到10.0μg/mL时，此时的4种不同组分的Se-PSP相对分子质量也就越小，其对于卵巢癌SKOV-3细胞增殖的抑制效应也就越好[3]。究其原因，可能是由于当Se-PSP相对分子质量小时，其更加容易透过生物膜，从而进入到核膜或胞质之中发挥抑制作用，更加容易发挥对肿瘤细胞的干扰作用。

有研究发现，PSP抗肿瘤机制主要是其能进一步强化机体免疫机能，其能通过促进NK细胞、B淋巴细胞以及T淋巴细胞增殖，从而刺激机体分泌出IFN-γ、TNF-α及IL-1，提升机体体液及细胞机能，进一步发挥抗肿瘤的价值[4]。

Se-PSP2经过分离纯化后，可获得较高的纯度，对于肿瘤细胞增殖均能发挥良好的抑制效果，这可能使其被研发成为恶性肿瘤治疗的新药物[5]。通过研发分析发现，当Se-PSP2的有效浓度超过10.0μg/mL时抑制效果良好，并且发现随着Se-PSP2质量浓度的逐渐增加，抑制率逐渐上升，抑制效果呈现出剂量依赖性变化。

总而言之，Se-PSP的主要成分就是Se-PSP2，其对于卵巢癌患者的SKOV-3细胞生长有一定的抑制效果，对肿瘤疾病的治疗有一定的帮助。

【参考文献】

[1]王竹君,张学武.螺旋藻水解肽的制备及其抗肿瘤活性研究[J].现代食品科技,2015,11:25-32.

[2]张文,吴清平,吴军林.螺旋藻营养保健价值及开发应用进展[J].食品与发酵科技,2013,03:89-92.

[3]徐小娟,张勇,唐超,葛蔚,刘永举,王清吉.复合螺旋藻多糖对人乳腺癌MB-231细胞株体外抗肿瘤作用研究[J].辽宁中医药大学学报,2012,10:70-72.

[4]李瑞,侯改凤,占今舜,黄兴国.螺旋藻的生物学功能及其在动物生产中的应用[J].中国饲料,2012,21:22-25.

[5]赵小霞,邱丽君,宣成睿,孙鹏,周杨,周玥,杨丽敏.螺旋藻藻蓝蛋白亚基的提取和免疫活性研究[J].中国中西医结合外科杂志,2016,02:156-160.