探讨革兰氏染色法对阴道分泌物常规检查的补充作用

探讨革兰氏染色法对阴道分泌物常规检查的补充作用

王若涛郭良

王若涛郭良（福建医科大学附属闽东医院检验科355000）

【摘要】目的探讨革兰氏染色检测妇科炎性反应阴道分泌物片中的临床意义。方法阴道分泌物涂片621例,阴道分泌物常规检查：观察上皮细胞、白细胞、杆菌、球菌、念珠菌及滴虫活体形态;判定清洁度。阴道分泌物革兰氏染色检查:革兰氏染色后观察是否有念珠菌、滴虫、线索细胞、革兰氏阴性双球菌,以“-”“+”表示。结果阴道分泌物常规检查，621份阴道分泌物标本中，清洁度高者(Ⅲ°/Ⅳ°)为326例，念珠菌81例，滴虫75例。阴道分泌物涂片革兰染色检查,621份阴道分泌物涂片中检出病原体分布情况,念珠菌122例,线索细胞79例,滴虫64例，革兰阴性双球菌42例。结论阴道分泌物涂片革兰染色检查可大大提高阴道炎病原体的检出率，有必要建议临床医生把阴道分泌物涂片革兰染色检查做为阴道炎检查的常规项目。

【关键词】革兰染色检查阴道分泌物常规检查补充作用

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）20-0203-02

阴道分泌物常规检查是临床妇科常见的检测项目之一，主要通过高倍镜观察阴道分泌物的生理盐水湿片，根据上皮细胞、白细胞、杆菌、球菌、念珠菌及滴虫来判断阴道清洁度。通常临床医生只在怀疑有淋菌感染时才行阴道分泌物涂片革兰氏染色检查。本文通过分析2011.4-2013.4两年间共例同时行的病例结果，探讨革兰氏染色法对阴道分泌物常规检查的补充作用。

1资料与方法

1.1一般资料

2011.4-2013.4两年间我院妇产科门诊患者621例，年龄16-65岁。按妇科常规检查，用无菌棉签于阴道后壁下1/3处停留15s，旋转一周，再停留15s，使棉签充分吸收分泌物。每位患者在相同部位收集两份阴道分泌物，分别行阴道分泌物常规检查和阴道分泌物涂片革兰氏染色检查。

1.2方法

1.2.1阴道分泌物常规检查:将标本置入0.5ml的生理盐水中混匀,在高倍镜下观察上皮细胞、白细胞、杆菌、球菌、念珠菌及滴虫活体形态;用“Ⅰ°、Ⅱ°、Ⅲ°、Ⅳ°”表示清洁度。

1.2.2阴道分泌物革兰氏染色检查:在玻片上制成厚薄适宜的涂片,晾干后染色。先用高倍镜浏览全片,再用油镜观察多个视野,观察是否有念珠菌、滴虫、线索细胞、革兰氏阴性双球菌,以"-""+"表示结果。

2结果

2.1阴道分泌物常规检查，621份阴道分泌物标本中，清洁度高者(Ⅲ°/Ⅳ°)为326例，念珠菌81例，滴虫75例。

2.2阴道分泌物涂片革兰染色检查,可检出滴虫、念珠菌、线索细胞、革兰阴性双球菌等多种病原体。621份阴道分泌物涂片中检出病原体分布情况,念珠菌122例,线索细胞79例,滴虫64例，革兰阴性双球菌42例。详见表1

表1两种方法检测621例阴道分泌物标本病原体分布

3讨论

通常生理盐水湿片镜检不容易观察到念珠菌孢子,假菌丝与其他丝状物不易区别，而且由于门诊标本量大、检验人员经验不足等原因，易造成念珠菌的漏检。而经革兰染色后,可见折光性强的革兰阳性孢子或假菌丝与出芽细胞相连接成链状及分枝状，一目了然，不容易漏检。两种方法念珠菌检出率分别为13.0%（81/621）和19.6%（122/621），二者有显著性差异（P<0.05）。

生理盐水法与染色法检查滴虫互有优缺点，前者观察滴虫活体,在25～37℃时,虫体运动活跃,易于辨认;但气温较低时,特别在冬季,会使原虫的活动性降低,应注意保温并尽快送检。革兰染色法染色较好的滴虫虫体呈粉红色、大小悬殊、多形性、常比白细胞大2倍,其主要特征是长圆形的细胞核,且常偏心,细胞质疏松而有空泡,偶可见4根鞭毛。两种方法滴虫检出率分别为12.1%（75/621）和10.3%（64/321），二者无显著性差异（P>0.05）。革兰染色法滴虫检出率略低，如果能用油镜仔细观察虫体结构,检出率会更高一些。

线索细胞是诊断细菌性阴道炎（BV）的重要指标[1]。线索细胞革兰染色的主要特征:阴道鳞状上皮细胞黏附了大量染色不定短小杆菌而形成大的细胞团。镜下可见鳞状上皮细胞边缘成锯齿状。生理盐水法不易区分阴道分泌物内的菌群，导致对线索细胞判定存在困难。革兰染色法从1956年起被用于BV的实验室确证,其敏感性为62%～100%,阳性准确率为76%～100%,重复性较好[2]。相对于一些对阴道分泌物进行H2O2浓度、唾液酸苷酶、白细胞酯酶进行联合测定来筛查细菌性阴道炎的三联检测试剂，革兰染色法具有干扰因素少、简便快捷、成本低廉等优点。

革兰染色法是以找到急性期患者阴道涂片中革兰阴性肾形双球菌来作为淋病疑似病例。病情较长者,淋病奈瑟菌数量一般较少、形态不典型,也可位于细胞外。涂片法可能漏诊,特别是存在较多杂菌阴道分泌物涂片，必要时可进行培养,但培养时间通常较长,不利于门诊医生快速诊断。

综上所述，阴道分泌物涂片革兰染色检查可大大提高阴道炎病原体的检出率，尤其对念珠菌的检出率与阴道分泌物常规检查相比有显著提高。同时可通过检测线索细胞对于BV做出确诊，检测革兰阴性双球菌快速筛查淋菌性阴道炎，相比之下，阴道分泌物常规检查（盐水法）除了简单判定阴道分泌物清洁度外，很难对众多导致阴道炎的病原体做出明确诊断。为了指导临床医生诊疗，很有必要建议临床医生把阴道分泌物涂片革兰染色检查做为阴道炎检查的常规项目。

参考文献

[1]杨晓平,姜丽华,杨蕙.细菌性阴道病的加德纳菌检测及其临床意义[J].实用医药杂志,2008,25(4):442-443.

[2]马玉楠.细菌性阴道病极其诊断[J].中华检验医学杂志,2000,23(5):303-304.

[3]曹友德.细菌性阴道病联合检测技术的临床应用评价[J].海南医学,2011,22(2):4-6.