不同贮存条件对大黄炭中大黄素含量的影响

不同贮存条件对大黄炭中大黄素含量的影响

张杰

张杰

（天津生物工程职业技术学院天津300462）

【摘要】通过HPLC法比较不同温度、湿度下大黄炭中大黄素的含量。采用Shim-_packVP-ODS(150mm×4.6mm,5hm)色谱柱；流动相甲醇—水(70:30)磷酸调至pH=3；柱温：24℃；流速：1.0ml/min；检测波长：437nm；结果：在25℃,湿度在55%~65%条件下贮存对大黄炭中大黄素含量影响不大，在35℃条件下贮存对大黄素含量影响较大。大黄素线性范围0.0066～0.132mg,r=0.9999.

【关键词】大黄素HPLC大黄炭

【中图分类号】R954【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）25-0385-01

前言

大黄为蓼科植物掌叶大黄（RheumofficinaleBaill.）的干燥根基根茎。2010版药典一部规定大黄炭为取净大黄块炒至表面焦黑色、内部焦褐色。大黄炭凉血化淤止血，用于血热有淤出血症。大黄中起主要活性成分为大蒽醌衍生物如大黄素、大黄酚等。本文考察了大黄炭不同温湿度条件下大黄素的含量。

实验部分

一、仪器与材料：

岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪，SPD-1OA紫外分析仪，CTO-10AS柱温箱，DG-12A脱气机。WS-302型调温调湿试验箱。KQ-25DE型数控超声波清洗器。大黄素标准品（中国药品生物制品有限公司生产，批号为110756-20101）。大黄炭（天津中药饮片长生产，批号为120023）。甲醇为色谱醇，其它制剂均为分析醇，水为二次蒸馏水。

二、方法与结果：

（一）色谱条件Shim-packVP-ODS(150mm×4.6mm,5㎜)色谱柱；流动相为甲醇-水(70:30,磷酸调至pH=3)；柱温：24℃；流速：1.0/min；检测波长：437nm；进样量20µL,在此条件下，样品中大黄素分别与相邻成分达到基线分离，大黄素的保留时间为22.723min

（二）对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品6.6mg，用甲醇定容至50ml量瓶中即得大黄酸对照品储备液体，以备后用。

（三）供试品溶液的制备

取大黄炭药材各2g，粉碎过24目筛。分别在常温及温度为25℃、30℃、35℃；湿度为55%、60%、65%；时间为4h、8h、12h，条件下做加速试验，见表1。然后分别至于50ml容量瓶中，加入20ml氯仿，于38℃超声波提取30min，静置24h过滤，挥干氯仿，加适量甲醇转溶于50ml容量瓶中。用移液管从50ml溶液中取1ml转移至10ml容量瓶加适量甲醇定容，备用。

表1实验条件

55%60%65%

25℃4、8、12h4、8、12h4、8、12h

30℃4、8、12h4、8、12h4、8、12h

35℃4、8、12h4、8、12h4、8、12h

（四）线性关系考察

精密吸取大黄素溶液0.5ml、1ml、2ml、4ml、6ml、8ml、10ml加甲醇定容与10ml量瓶中，按上述色谱条件测定峰面积积分值对进样量进行线性回归，得回归方程Y=249000.313X-15345426.37，R=0.9999，表明大黄素在0.0066`~0.132mg范围内呈现良好的线性关系。

（五）精密度实验

精密吸取大黄素同一对照品溶液，重复进行5次，测定大黄素峰面积的平均值为3163519.013，其RSD为1.84%。

（六）供试品的含量的测定

取各个供试品按“2．3”项下制备供试品溶液，“2．1”项下色谱条件下测定，结果见表2。

大黄素标准品曲线常温下大黄碳中大黄素含量25℃、55%、4h大黄碳中大黄素含量

图1大黄素标准品及大黄碳中大黄素含量曲线

表2各种温湿度条件下大黄炭中大黄素的含量（n=5）

温度、湿度、时间平均含量（mg/g）RSD(﹪)

常温61.62301.53

25℃、55%、4、8、12h61.62281.96

25℃、60%、4、8、12h61.62281.87

25℃、65%、4、8、12h61.62241.98

30℃、55%、4、8、12h60.38421.89

30℃、60%、4、8、12h60.21381.67

30℃、65%、4、8、12h60.01231.98

35℃、55%、4、8、12h58.3232.01

35℃、60%、4、8、12h56.4361.78

35℃、65%、4、8、12h52.0111.86

结论

从测定结果可以知道以Shim—packVP-ODS(150mm×4.6mm,5㎜)色谱柱；流动项为甲醇-水（70：30，磷酸调至pH值=3）；柱温：24℃；流速；1.0ml/min为实验条件可使大黄素达到基线分离。从色谱分析图上可见，相同色谱条件下，样品峰与标准品峰对照，峰形一致，tR相同。可以认为HPLC法用于样品大黄素含量的测定是一种简便、有效的方法，同时HPLC法测定不同温湿度条件下大黄炭中大黄素的含量可为大黄炭的贮存方法提供科学的依据。通过测定可知在25℃,湿度在55%~65%条件下贮存对大黄炭中大黄素含量影响不大，在35℃条件下贮存对大黄素含量影响较大。

参考文献

[1]郑志华HPLC法测定大黄提取物种5种蒽醌的含量，广东药学院学报，2004，20（16）

[2]李先瑞等，大黄炭饮片质量标准研究，中国中医药信息杂志2006，13（6）

[3]国家药典委员会编，中华人民共和国的药典，2010版第一部，北京，化工出版社