诱导型一氧化氮合酶在乳腺癌中的表达及临床意义

诱导型一氧化氮合酶在乳腺癌中的表达及临床意义

欧阳周1胡春宏

欧阳周1胡春宏2

（1中南大学湘雅医学院附属肿瘤医院湖南长沙410013；2中南大学湘雅二医院湖南长沙410011）

【摘要】目的检测iNOS在乳腺癌癌组织的表达，研究iNOS与乳腺癌临床病理特征的关系，探讨iNOS在乳腺癌的发生发展过程中的作用。方法取2007年2月至2007年11月在湖南省肿瘤医院诊治的60例乳腺癌改良根治术或根治术及23例乳腺癌旁正常乳腺组织石腊包埋标本，应用免疫组织化学SP法检测iNOS在乳腺癌组织、癌旁正常乳腺组织中的表达。结果iNOS在乳腺癌、癌旁正常乳腺中均有表达，阳性表达率分别为68.3％、26.1％，乳腺癌显著高于癌旁正常乳腺组织（P<0.05）。iNOS在乳腺癌中表达水平与年龄、月经状况、组织分化程度、HER2表达状况及5年总生存有关。结论iNOS的表达可作为评判乳腺癌恶性程度的重要指标和评乳腺癌预后的因素。

【关键词】乳腺癌诱导型一氧化氮合酶免疫组织化学

【中图分类号】R730.55【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）31-0097-02

近些年靶向治疗得到了突飞猛进的发展，为恶性肿瘤的治疗开辟了新的思路和方向。研究发现在乳腺癌及其他一些肿瘤中存在一种细胞信号传导路径NOS路径，可以将L-精氨酸转化为NO和L-瓜氨酸，与癌组织的形成、生长、血管生成、转移有紧密的联系。本研究检测了乳腺癌中iNOS的表达状况，报告如下。

一、材料与方法

1.研究对象

取2007年2月－11月在湖南省肿瘤医院行乳腺癌改良根治术或根治术且随访资料完整的60例手术切除标本，均经10%福尔马林常规固定，石腊包埋后存档，均经术后病理学证实，所有病例术前均未接受化、放疗，均无非甾体类抗炎药和糖皮激素长期用药史。另取乳腺癌旁正常乳腺组织23例手术切除标本作为对照组。

2.结果判定

iNOS染色阳性信号为胞质内出现棕黄色颗粒。综合染色强度和阳性细胞数量进行表达分级。

二、结果

iNOS在乳腺癌组织的表达主要位于细胞浆。iNOS在乳腺癌的阳性表达为68.3％，高于癌旁正常乳腺组织（26.1％）（P＝0.001）。见表1。iNOS在乳腺癌组织的表达特点：在年龄＜50岁组中的阳性表达率显著高于年龄50≥岁组；绝经前组显著高于绝经后组；组织学分级低分化组显著高于中高分化组；HER2阳性表达组明显高于阴性表达组；生存期小于5年组高于生存期高于5年组。各组中在各类病理分型、有无淋巴结转移、和不同ER、PR表达组中均未见明显差异；iNOS表达与转移淋巴结数量、肿块大小、肿块面积无明显相关。结果见表2。

表1iNOS在不同类型乳腺组织的表达情况

三、讨论

诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达活化需要细菌产物、炎症介质、异物刺激、或肿瘤发生等诱导。细胞内iNOS催化合成的NO迅速形成硝酸盐、亚硝酸盐、S-亚硝基巯基或过氧化亚硝酸盐参与多种病理生理过程，也包括恶性肿瘤的发生、发展、血管形成、转移。NO活性物能够通过多种分子机制引发遗传毒性、诱导癌组织的发生，例如NO能通过硝基化脱氨作用直接损伤DNA、通过过氧化亚硝酸盐引起DNA链断裂或DNA亚硝基化修饰，导致基因突变，活化致癌亚硝胺类致癌物质，抑制DNA修复酶的活性。NO也能抑制机体抗肿瘤机制，促进肿瘤血管生成，增加肿瘤新生血管血流，提高肿瘤侵袭和转移的能力。NO对于凋亡的调节具有两面性、细胞类型特异性和浓度依赖性的特点，既可促进凋亡也可抑制凋亡，在肿瘤组织中高表达的iNOS合成高浓度的NO会导致凋亡基因P53的突变，抑制野生型P53介导的促凋亡作用，导致肿瘤细胞恶性增殖[1]。

大量的研究显示在乳腺癌存在iNOS的过度表达。Loibl等在161例乳腺癌中发现98例（61％）有iNOS阳性表达[2]。国内赵茜等报告iNOS在91例乳腺癌中62例（68.0％）呈阳性表达，并与组织学分级、淋巴结转移、HER2表达有关[3]。在本研究中乳腺癌组织iNOS的阳性表达显著高于癌旁组织，iNOS在组织学低分化组阳性表达率显著高于中高分化组。Loibl等研究中高、中、低分化组的阳性表达分别是41％、66％、72％，并有显著差异（P=0.015）,Vakkala[4]、Thomsen[5]等的研究也支持iNOS的表达水平与乳腺癌的恶性程度呈正相关性，Vakkala等的研究中46.5%的原位癌和58.8%的浸润性癌iNOS表达呈阳性，两者之间有显著性差异（P=0.007），这些结果均说明iNOS的表达和肿瘤的分化程度有关，iNOS可作为评判乳腺癌恶性程度的重要指标。

Duenas等研究中发现23例乳腺癌中iNOS表达和腋窝淋巴结转移无任何联系，却在其中16例绝经前的年轻患者中却发现iNOS表达和腋窝淋巴结转移呈正相关性，提示iNOS过表达促进乳腺癌的转移并与月经状况有关[6]，本研究中也显示iNOS的阳性表达与年龄、月经状况有关，提示内分泌状况尤其是雌、孕激素水平可能参与了iNOS蛋白表达的调控。Rosselli等观察到在正常月经周期的妇女，在卵泡期循环中的NO水平增高，与17β－雌二醇水平增高有关[7]。Ramsay等对26例生育期妇女的研究中给予服用雌二醇7天后，也观察到NO水平的显著升高（P<0.001）[8]。这些研究解释雌激素引起NO释放增加的机制：①增加iNOS的必需辅助因子的水平，②经过受体操纵（receptor-operated）机制刺激iNOS的活性，增加iNOS的蛋白生成，③降低NO清除剂的水平。

本研究中iNOS的阳性表达与HER2的表达有关，国内也有其他作者发现了iNOS和HER2的表达之间有显著关系，目前还没有证据说明iNOS和HER2之间有直接的作用，也不能确定iNOS和HER2哪一方处于上游路径，或互为促进因素，这仍需进一步的研究。

本研究发现生存期小于5年组的iNOS的表达高于生存期大于5年组，提示iNOS与预后有关。

参考文献:

[1]DimmelerS,ZeiherAM.Nitricoxideandapoptosis:anotherparadigmforthedouble-edgedroleofnitricoxide.NitricOxide,1997,1:275–281.

[2]LoiblS,BuckA,StrankC,etal.Theroleofearlyexpressionofinduciblenitricoxidesynthaseinhumanbreastcancer.EurJCancer,2005,41(2):265-271.

[3]赵茜，黄世章，区穗芳.iNOS和c_erbB_2在乳腺癌中的表达及临床意义.中国热带医学，2006，6（1）：42-43.

[4]VakkalaM,KahlosK,LakariE,etal.Induciblenitricoxidesynthaseexpression,apoptosis,andangiogenesisininsituandinvasivebreastcancer.ClinCancerRes,2000,6:2408-2416.

[5]ThomsenLL,MilesDW,HapperfieldL,etal.Nitricoxidesynthaseactivityinhumanbreastcancer.BrJCancer,1995,72:41–44.

[6]DuenasGA,IsalesCM,SanguezaO,etalExpressionofinduciblenitricoxidesynthaseinbreastcancercorrelateswithmetastaticdisease.ModPathol1997,10:645–649.

[7]RosselliM,ImthurnB,KellerPJ,etal.Circulatingnitricoxidelevelsinpostmenopausalwomensubstitutedwith17β-estradiolandnorethisteroneacetate(Atwo-yearfollow-upstudy).Hypertension,1995,25:848-853.

[8]RamsayB,JonhsonMR,LeoneAM,etal.Theeffectofexogenousoestrogenonnitricoxideproductioninwomen:aplacebocontrolledcrossoverstudy.BrJObsterGynecol.1995,102:417-419.