宫颈癌的筛查方法研究综述

宫颈癌的筛查方法研究综述

王秀梅1牛建雄2

王秀梅1牛建雄2（1.甘肃省白银市妇幼保健院；2.甘肃省中医院白银分院730900）

【摘要】宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，是一种可以被预防性的疾病。宫颈癌如能早期发现，是可以被治愈的，近几十年宫颈细胞学筛查和病原学检测方法的普遍应用，使宫颈癌和癌前病变得以早期发现和治疗，宫颈癌的发病率和死亡率已有明显下降。

【关键词】宫颈癌；筛查方法；细胞学；分子生物学【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-7165（2015）06-0192-02

宫颈癌是最常见的妇科肿瘤之一，发病率在女性恶性肿瘤中居第二位，仅次于乳腺癌。根据WHO报道，世界每年发生宫颈癌患者约44万人，其中我国每年新发生的宫颈癌患者13.5万人，占世界新发生人数的28.7%。目前宫颈癌的发病率和死亡率有增长的趋势，从而引起广大研究着的关注。从宫颈癌癌前病变到宫颈癌大约是10年的时间，这个漫长的癌变过程中，从病因，人乳头瘤病毒感染宫颈上皮细胞到癌前病变的各个阶段如果能及时诊断，从而达到宫颈癌的早发现早治疗，减少宫颈癌的发病率和死亡率，因此，推广宫颈癌的筛查以及不断的完善技术，对宫颈癌的防治非常的重要。

1Pap涂片半个世纪以来Pap涂片作为一种基本的筛查方法被广泛应用，Pap涂片法具有操作简便，对病人无痛苦，经济等有点，可适用于大规模的普查，这一方法的使用是宫颈癌发生率降低70%。在常规的涂片测试中，这种传统手工方法制作的涂片只收集了最多20%的细胞，而80%以上的细胞残留在采样器上并随采样器一起被丢弃。另外，40%以上的涂片会因血液、粘液和炎症组织的影响而变得混浊不清，以及固定不及时所引起的人为假象。这些缺点是造成了大多数常规巴氏测试结果不准确的原因。在20世纪80年代假阴性报告引起了震惊，从此人便希望建立一种新的筛查宫颈癌的方法。

2液基薄层细胞形态学检查TCT和AutoCytoprep(细胞学全自动阅片系统）两种液基细胞学分别于1996年和1998年获美国食品与药品管理局（FoodAndDrugAdministration,FDA)认证，被批准用于替代传统巴氏涂片作为宫颈癌的筛查方法，与巴氏涂片相比较，液基细胞学改变了常规涂片的操作方法，标本取出以后立即装入有特殊细胞保养液的容器中，几乎保留了取材___________器上的所有细胞，避免了常规涂片过程中所引起的细胞干燥造成的假象，保存液中细胞经系统化程序处理，粘液，血液，炎症细胞与上皮细胞分离，标本的满意度提高了58%，除了能够诊断细胞病变外还能对微生物学方面做出诊断，如滴虫，念珠菌，阴道嗜血杆菌。中国中科院肿瘤医院/肿瘤研究所在陕西省襄垣县大规模宫颈癌筛查，采用TCT方法，其灵敏度和特异度分别为87%和94%，另一项近9000人的筛查中，应用AutoCytoprep方法，其灵敏度和特异度分别为88.3%和81.2%[1]液基细胞学设备昂贵，费用高，在经济条件差的广大地区无疑受到极大的局限。

3细胞DNA定量分析技术在细胞恶变过程中，遗传物质(DNA)含量早于细胞形态发生改变，这种细胞的出现是提示早期恶性病变的重要标志。肿瘤病理学研究显示，细胞癌变时，其细胞核内的DNA结构和含量都会发生异常变化，DNA含量增多，出现DNA倍体异常细胞[2]，对所有涂片进行feulgen染色，可通过细胞DNA定量分析系统检测以便发现早期癌前病变细胞和癌细胞。该系统已达到欧洲定量细胞病理学会所制定的有关DNA定量分析图像系统的各项标准[3]。

一般情况下，DNA倍体分析系统对每张片子上的8000个细胞核进行扫描测定，经扫描后的每个细胞核均有128个特征值，其中包括形态特征，吸光特征，具体结构特征，根据不同细胞成分所具有的不同特征参数来完成自动细胞分类和计数过程，如正常上皮细胞，增生或者癌变细胞，淋巴细胞，白细胞及未参与诊断的垃圾细胞，标准对照细胞为同张玻片上的100个正常的上皮细胞，所测出的平均光密度（intergratedopticaldensity,IOD)为2C的参考值，.出现5C（DNA指数大于2.5）非整倍体细胞，为病变细胞。采用DNA定量分析对1016名妇女做了病理活检。以病理诊断结果为标准,计算出细胞DNA定量分析方法在筛查CIN3以上宫颈病变的敏感性为82%,特异性为71%,而常规细胞学方法则分别为52%和92%[3]。DNA定量分析方法容易受到feulgen染色的影响，如染色的温度，时间，水质的酸碱度，漂洗，的每个环节，其优点是避免了细胞医生的主观性造成的误诊，同时敏感性高,能明显提高宫颈癌普查的阳性检出率。

4HPV-DNA的检测4.1HPV的感染与宫颈病变有着非常密切的联系德国海德堡癌症研究中心1976年首次提出HPV感染与宫颈癌关系密切，1984年又从宫颈癌患者肿瘤组织中，克隆出HPV16型和18型别病毒，目前鉴定出的人乳头瘤病毒达100余种，依据HPV型别与宫颈癌发生危险分为：低危型如HPV6.11..40.42.43.44.54.61.70.72.81.CP6180常引起外生殖器湿疣等良性病变；高危型如HPV16.18.31.33.35.39.45.51.52.56.58.59.68.73.82，与宫颈癌及CIN的发生有关。1999年由IARC组织在22个国家进行了针对引起浸润性宫颈癌的HPV类型的调查，组织学确认为ICC的1035个病例中有99.7%发现HPV-DNA阳性，其中HPV的类型主要为HPV16（53%）和HPV18（15%）。

4.2宫颈癌的检测原理是建立在导流杂交法上的低密度基因芯片技术利用DNA双链碱基互补的原理，将PCR产物加入到固定有不同HPV亚型探针的低密度基因芯片上，进行导_______流杂交，最终获得特异性的杂交结果。利用碱基互补原则通过目的的DNA与探针的结合来判断目的的DNA的序列信息，一次检测就可以精确知道病人感染21种HPV病毒的具体亚型。宫颈癌检查项目中应用HPV-DNA检测，一方面大大提高了宫颈癌的检出率，减少医疗纠纷的发生，同时也使医院的学术地位又会有很大的提高，不足之处是由于对PCR实验室的布局要求严格，实验中容易形成污染，假阳性率增高。

5结语

综上所述，宫颈癌的筛查从病原学检测到宫颈细胞学采用单独诊断，每一种方法在都某一方面存在不足，所以在临床应用中充分了解每种方法的的优势与缺点，采用联合诊断的方法也是提高灵敏度与特异性可采用的理想的方法，所以要根据本地的特点与临床病人的个人的不同需求做到每个方法的合理应用减少卫生资源的浪费，近些年来，随着宫颈癌的上升和年轻化的趋势，实行定期的妇女普查有着重大的意义。

参考文献[1]PanQ,BelinsonJL,etal,Athirrlayer,liguictbasedpaplestformassscreeninginanareaofchinawithahighincidenceofcervicalcarcinoma,Acrosssectionalcomparativestudy[J],ActaCytol,2003,47(1):45-50.[2]孙小蓉,汪键，Alfred,DNA倍体系统用于宫颈癌及上皮内瘤变的诊断及检测[J]中华病理学杂志2005.4(7):435-437.[3]孙小蓉,李玉兰,车东媛,晏想成,凌慧芳,凃洪章,汪键.用细胞DNA定量分析方法进行宫颈癌普查的临床研究[J],诊断病理学杂志2005.5(1):35-38.