应用PCR法和被动凝结法检测肺炎支原体及感染状况分析

应用PCR法和被动凝结法检测肺炎支原体及感染状况分析

韩建英杜芳芳

韩建英杜芳芳(山西省吕梁市人民医院分子生物实验室033000）

【摘要】目的：采用PCR法与被动凝结法检测肺炎支原体及感染情况。方法：选择某医院2012年1月～12月治疗疑似感染肺炎支原体的患者100例，然后进行PCR法与被动凝结法检测。结果：采用PCR法检测肺炎支原体的阳性率分别为86%，73%，46%，其中，PCR法和血清比较没有明显差异，无统计学意义；与培养法有明显差异，具有统计学意义；血清法与培养法相比有明显差异，有统计学意义。采用被动凝结法检测肺炎支原体，百分率为13%，其中，中轻度感染有54例，中度感染有20例，中度感染26例。结论：采用PCR法与被动凝结法检测肺炎支原体及感染情况可以及时判断出病情，使患者可以尽早得到治疗。

【关键词】PCR法被动凝结法肺炎支原体

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）04-0137-01

肺炎支原体主要是在细菌与病毒之间能够独立生存的一种微生物，没有细胞壁，使人体的呼吸系统受到损害，这是一种儿童容易发生的主要病变。近些年，肺炎支原体感染发病率逐年升高，很多年龄很小的幼儿都比较容易患上此病，在医学临床上的表现也是多样性的，它与其他病原微生物感染很难区分开来。因此，对于该病原体的检测就非常重要。本文主要采用PCR法以及被动凝结法对肺炎支原体感染进行了临床分析。

1资料和方法

1.1资料选择某医院2012年1月～12月治疗疑似感染肺炎支原体的患者100例。其中，男性60例，女性40例，具体病症为：（1）发烧，体温在39度左右；咳嗽，偶尔带有血丝。（2）胸部进行X—线检测，有云雾状、扇状性阴影。（3）血常规检查，白细胞正常或减少，血脂升高。

1.2方法（1）PCR法：肺炎支原体感染核算扩增荧光检测试剂盒主要采用的是中山大学达安基因股份有限公司，检测的仪器是从美国的MJ公司购买的PCR仪，根据说明进行检测。血清学检测检测MpIgM以及Mp-IgM主要采用ELISA法，根据试剂盒要求进行操作。观察患者在24小时以上，培养阳性者培养液从紫色变成绿色或者黄色，呈透明状。如果37度培养在24小时以上不变色者就是阳性。（2）被动凝结法：采用被动凝结法的试剂盒主要是来自于日本富士瑞必欧株式生产，标本：发病在三天以内的患者，取静脉两毫升进行血清分离，具体操作步骤依据说明书进行。血清稀释1：80的患者就属于阳性，被判断为感染了肺炎支原体。

2结果

PCR法：把PCR法和血清法、培养法进行比较分析。PCR法和血清比较没有明显差异，无统计学意义；与培养法有明显差异，具有统计学意义；血清法与培养法相比有明显差异，有统计学意义。

被动凝结法：采用被动凝结法检测肺炎支原体，感染肺炎支原体的患者百分率为13%，其中，男性60例，女性40例，男女感染肺炎支原体没有统计学意义；中轻度感染有54例（54%），中度感染有20例（20%），中度感染26例（26%）；肺炎支原体感染滴度1：80的患者58例，滴度为1：160的患者30例，滴度为1：320的患者10例，滴度为1：640的患者为2例。

3结论

因为肺炎支原体没有细胞膜，因此，对细胞膜具有抗菌作用的药物对其是没有作用的，对于肺炎支原体的治疗和其他病菌的治疗方法是不一样的。对于患者的肺炎支原体感染检测作用是比较明显的，可以预防很多的并发症。肺炎支原体实验室诊断的方法比较多，对其进行培养和分离是其中一种比较准确的方法。但是，这一方法要求相对较高、敏感性也比较低、时间比较长，所以在临床上使用的比较少。血清学检测在我国主要采用的是ELISA法。Mp-IgM抗体在感染后的一周才会开始产生，在3周左右，效价就会达到一个高峰期。但是，轻度的感染只会刺激局部免疫，没有液体免疫的反应出现，对于患者及时发现病情是极为不利的。肺炎支原体的潜伏期比较长，患者出现状况时Mp-IgM的水平已经达到一定程度，Mp-IgM阳性就被作为急性期感染的诊断指标。采用PCR法检测肺炎支原体与培养法、血清法相比，特异性更好、敏感性更高，尤其是针对那些在早期就感染了病菌的患者有明显的效果。但是，PCR法对于仪器、设备的要求比较高，价格也比较昂贵。

肺炎支原体感染在临床上并不属于典型的病症，因此对于早期的诊断存在一定的难度，肺炎支原体是一种能进行自我繁衍的微生物，临床上所采用的抗菌药都没有明显的效果，如果不能及时的诊断，感染这种病原体的幼儿就会非常痛苦。本文主要采用了PCR法与被动凝结法进行了肺炎支原体的检测，相比较来看，PCR法实验的时间相对较短，敏感度也比较高，但是所使用的设备比较昂贵，ELISA法需要专门的仪器对血清进行检测，敏感性是比较一般的。而被动凝结法是一种比较特殊的方法，主要采用的是明胶粒子和肺炎支原体进行结合，通过血清与其产生反应。根据本文资料得出结果：血清肺炎支原体滴度与病情的严重程度存在正相关的关系，换句说法就是，血清肺炎支原体滴度越高，病情就越严重。对于患者肺炎支原体的检测，采用被动凝结法具有明显的临床效果。