影响硫酸庆大霉素颗粒剂含量测定的因素分析

影响硫酸庆大霉素颗粒剂含量测定的因素分析

陈卓1李经纬2

陈卓1李经纬2

（1陕西省汉中市食品药品检验所陕西汉中723000；2陕西省宁强县中医院陕西汉中724400）

【摘要】本文报道硫酸庆大霉素颗粒剂含量测定的方法研究。根据实验结果得知，统计结果表明某些剂型添加剂对实验结果有较大影响，甚至造成实验精密度超出标准规定，而致实验失败。我们采取了分离方法，将影响实验精密度的因素分离出来，保证了实验精密度，减小实验误差。

【关键词】抗生素生物检定颗粒剂分离

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）22-0373-02

【Keywords】BiologicalAssayofAntibioticsGranulesfractional

《中华人民共和国药典》2005年版二部及《中华人民共和国药典》2010年版二部（以下简称《中国药典》2005年版；《中国药典》2010年版）规定硫酸庆大霉素颗粒剂含量测定为生物检定法，按量反应-平行线原理设计，在工作中为灭菌水直接溶解法进行实验。我们在工作中发现，采用本方法实验，其平均可信限率极难达到标准规定的限度，而致失败。以及多次重复，多人复核实验。而浪费了大量人力、物力及时间，甚至影响药品执法部门的工作。前文已报道了硫酸庆大霉素颗粒剂的含量测定—微生物法管碟法的2.2法及3.3法，浊度法2.2，3.3法。本文报道其浊度法的一剂量法。

平均可信限率（FL%）（以下简称FL%）是控制实验精密度的重要指标，FL%愈小表示精密度愈高，实验误差愈小，《中国药典》2005年版及《中国药典》2010年版均规定本品种FL%不得大于7%为控制值。

且我们在工作中发现该品种其他剂型：注射剂、片剂等均可达到符合其控制值，我们分析其现象可能为该剂型的添加剂不同所造成。我们采取分离方法将其有效成份提出进行了研究。

1实验条件

1.1仪器与试剂

1.1.1培养基：抗生素检定培养基，处方:胨5g;牛肉浸出粉1.5g；酵母浸出粉3g,磷酸氢二钾3.68g;磷酸二氢钾1.32g;氯化钠3.5g;葡萄糖1g;按《中国药典2010年版二部》附录97页方法配制。

1.1.2菌种：金黄色葡萄球菌【CMCC（B）】26003中国药品生物制品检定所

1.1.3标准品：庆大霉素标准品批号：130326-200314中国药品生物制品检定所

1.1.4仪器：

隔水式恒温培养箱PYX-DH3上海市跃进医疗器械一厂紫外分光光度计752（自动）上海天普分析仪器有限公司

恒温水浴箱S648国营创新医疗器械厂37-65℃±0.75℃

2实验方法

液-液萃取法；抗生素微生物检定法[1][2]；量反应平行线测定法—浊度法一计量法[1][2][3][4]

2.1分离方法液-液萃取法

2.1.1取硫酸庆大霉素颗粒按每1万单位（10mg）加脂相溶液20ml，振摇至溶解。加灭菌水50ml，分5次加入，每次10ml，振摇混匀，静置，分取上层溶液。合并萃取液。加灭菌水至100ml，使成100单位/ml，为试验溶液（1）。

2.1.2取庆大霉素标准品适量加灭菌水至溶解，制成100单位/ml，为对照溶液。

2.1.3未经分离的溶液按《中国药典》2005年版或《中国药典》2010年版试验方法制备，为试验溶液（2）[1][2]。

2.1.4将上述溶液加灭菌水，分别制成20U/ml，10U/ml，5U/ml为试验液（1）,（2）及(3)[1][2][4]。

2.1.5实验结果按《中国药典》2005年版及《中国药典》2010年版“生物检定统计法”进行统计，结果见表1；表2[1][2][3][5]。

3结果

分离与不分离影响：表1F>F7,6P<0.01

表2F>F4.00P<0.01

4讨论

4.1生物检定法是抗生素含量测定的一种法定方法，为超微量检定方法，该方法极为灵敏，故易受多种因素影响。

4.2通过对硫酸庆大霉素多种剂型比较如注射剂、片剂等，平均可信限率在严格控制实验条件下均可以达到《中国药典》2005年版或《中国药典》2010年版规定，而颗粒剂在相同条件下极难达到规定。

4.3通过分析认为，按《中国药典》2005年版及《中国药典》2010年版规定，其平均可信限率超标现象可能为不同剂型的某些添加剂造成。故采取较简单易行的液-液萃取法分离除去影响实验结果的成份，才能达到《中国药典》2005年版或《中国药典》2010年版规定，使实验误差得以降低，提高实验成功率。

4.4本实验仅作为硫酸庆大霉素颗粒剂的含量测定—量反应平行线设计的浊度法—1剂量法试验参照。

4.5按未分离方法实验，多次重复试验，实验结果合并处理亦可达到规定要求[1][2][4][5]，但费时较长，消耗大量的人力、物力，且与药监执法及临床需要极不适应。

参考文献

[1]《中国人民共和国药典》2005年版二部

[2]《中国人民共和国药典》2010年版二部

[3]《卫生统计学》四川医学院，1980

[4]《生物检定统计法》，周海钧等，1983

[5]《抗生素药品检验》，张治锬等，1987

表1