丙型肝炎疫苗研究进展

丙型肝炎疫苗研究进展

陈琛

陈琛（福建省福州市第四医院检验科福建福州350001）

【摘要】全世界约有3%的人口感染丙肝病毒（HCV），每年因丙肝致死的人数超过47万，丙肝已成为危害人体健康的“隐形杀手”。当前治疗丙肝一般采用抗丙肝病毒的药物（干扰素）。但由于此类药物有一定的副作用且疗效不稳定，仍需要开发出一种稳定有效的丙肝疫苗。当前国内外尚无稳定有效的丙型肝炎防治疫苗。目前针对丙肝疫苗的研究主要集中在T细胞疫苗，即如何有效触发CD4+与CD8+T细胞产生免疫反应。近年来，预防性与治疗性HCV疫苗的研究都有一定的发展，另一方面，HIV&HCV混合疫苗也逐渐成为研究的热点。

【关键词】丙型肝炎疫苗研究

【中图分类号】R392【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）05-0324-01

1丙型肝炎的流行病学

丙型肝炎呈全球性流行，是欧美及日本等国家终末期肝病的最主要原因。据世界卫生组织统计，全球约有3%的人口感染HCV（1.7亿人），每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。

全国血清流行病学调查资料显示，我国一般人群抗HCV阳性率为3.2%。各地抗HCV阳性率有一定差异，以长江为界，北方(3.6%)高于南方(2.9%)，西南、华东、华北、西北、中南和东北分别为2.5%、2.7%、3.2%、3.3%、3.8%和4.6%。抗HCV阳性率随年龄增长而逐渐上升，由1岁组的2.0%至50～59岁组的3.9%。男女间无明显差异。HCV1b和2a基因型在我国较为常见,其中以1b型为主；某些地区有1a、2b和3b型报道；6型主要见于香港和澳门地区，在南方边境省份也可见此基因型[1]。

2丙肝疫苗的免疫机理

在HCV的抗原基因中，核心蛋白Core、NS3区、NS4区、NS5区基因编码的抗原免疫原性最强，相应抗体出现早，分布广，亲和力强[2]。NS3蛋白是一种多功能蛋白；NS5蛋白是RNA依赖的RNA聚合酶，均为HCV复制所必需，是抗病毒治疗的重要靶位。因此，针对HCV的免疫反应应该从这几个基因编码区着手，产生出能够中和核心蛋白Core、NS3区、NS5区基因编码的抗病毒物质。研究表明，（干扰素）能够一定程度上中和核心蛋白Core、NS3区、NS5区基因编码，产生相应的抗病毒蛋白，从而有效抑制HCV病毒的繁殖与传播。因此如何使人体产生干扰素成为丙肝疫苗的研究重点。实际上，CD4+T细胞可以产生干扰素，但同时，CD4+T细胞的成熟又需要CD8+T细胞的刺激。所以CD4+与CD8+T细胞在丙肝疫苗的研究中占有重要的地位。此外，E1与E2糖蛋白的中和作用也有助于控制HCV感染。

基于以上的分析，理想的HCV疫苗要能够产生强烈的CD4+与CD8+T细胞交叉反应，并产生中和抗体（NAb）来抑制HCV的繁殖或清除HCV。此外，CD4+与CD8+T细胞的特异性免疫反应在HCV的感染中也起到关键的作用。但是也有研究表明，在疫苗中加入结构蛋白对抑制HCV更为关键，并在黑猩猩的动物模型实验中得到证实。然而，HCV疫苗的研究面临许多难题，主要有：HCV繁殖能力强，易变异，从而降低抗病毒蛋白与中和抗体的作用；由于HCV抗原的持续刺激，CD8+T细胞逐渐失去对HCV的特异性作用。因此，研究者尚未研制出稳定有效的HCV疫苗。

3当前正在研究的丙肝疫苗

3.1治疗性疫苗

过去的几年里，研究者尝试研制治疗性HCV疫苗，这类疫苗可以减少患者体内的病毒载量，减少病毒的二次传播，延缓疾病的临床表现，并在临床上进行了试验。

研制治疗性疫苗的普遍思路是用合成肽组建core、NS3、NS4蛋白，再混入辅助剂，注入体内。试验中60个患者接受疫苗后，有三分之二表现出HCV特异性T细胞免疫反应。但是免疫反应较弱，也没有出现病毒载量的明显下降。

之后出现一种DNA疫苗，这种疫苗携带NS3/4A信息，注入体内后会产生HCV特异性T细胞免疫反应。试验将携带HCV结构蛋白编码的DNA疫苗注入患者体内后，大部分患者体内可以检测出HCV特异性免疫反应与中和抗体。虽然病毒载量并没有减少，但几乎一半患者的肝纤维化有好转。

虽然目前的治疗性疫苗无法完全清除HCV，但是这些研究给未来的研究方向提供了思路。此外，很多研究已经进入临床试验阶段，并表现出极大的潜力，有望在未来的丙肝治疗中得到应用。

3.2预防性疫苗

目前世界上通用的丙肝疫苗都属于治疗性疫苗，还没有疫苗能起到预防丙肝的作用，其原因是HCV易变异。早期人们有研究重组糖蛋白作为预防性HCV疫苗，但很少用于临床。

一种HCV疫苗是将gpE1/gpE2蛋白混于MF59中，然后再注入黑猩猩体内。这种思路可以在体内引发抗体反应，并且避免同源病毒的感染。但这个思路并不能产生中和抗体，因而还是有缺陷。试验中的大多数黑猩猩消除了HCV感染，说明这个思路可以治疗因HCV引起的一些疾病。人们将对此项研究进行安全性、人体承受能力、免疫原性的评估。此项研究已经完成，但没有报道具体的数据。

另一种思路是直接对黑猩猩种植HCV疫苗。种植疫苗后，已经可以检测到NS3、NS4、NS5、core蛋白，虽然在5只黑猩猩体内都检测到了抗HCV免疫反应，但18个月后5只黑猩猩体内都没能清除HCV。类似的研究还有一些，其思路都是通过T细胞免疫反应来清除HCV，但效果都有限，且还未进行人体试验。

从实际角度出发，进行预防性疫苗的研究有一定的风险，因为可能让健康的人体感染病毒，而动物模型的实验结果也不能完全代表临床实验。因此，预防性疫苗的研究存在较大的阻碍，成果也较少。

3.3HIV&HCV混合疫苗

据估计约有四百多万人同时感染了HIV与HCV病毒，而感染HCV的病人较一般人群更容易感染HIV[3]。对此类病人施以一般的HCV治疗效果很一般，其原因是抗HCV与HIV的药物会相互干扰。因此针对同时感染HIV与HCV的病人，需要一种特殊有效的治疗方案，而HIV-HCV混合疫苗就显得很重要，并成为研究的热点。

在混合感染HIV与HCV的人群中种植HCV疫苗，必须使HCV疫苗应能适应HIV与抗HIV类药物的环境。还需要考虑的一个问题是，由于HIV的干扰，此类HCV疫苗应该具有某种增强免疫反应的特点。一旦感染HIV，一般会消耗大量的CD4+T细胞，这个现象也被认为是感染HIV的标志之一，而CD4+T细胞参与的反应恰恰是HCV治疗中很重要的一个环节。因此在此类疫苗中应该考虑增强特异性免疫的效果，如增强CD4+T细胞反应。但是从HIV方面考虑，在HIV的刺激下，CD4+T细胞会成为HIV的靶细胞，使得HIV的感染更加严重，因而不应该存在过多的CD4+T细胞。实际上，在对HCV进行免疫反应的时候，会刺激HIV进行大量繁殖。因此如何在两者之间进行权衡是一个难题，或者可以采用新的HCV免疫策略来回避这个问题。但目前已有的HCV疫苗大都是基于T细胞免疫的，如何在增强CD4+T细胞免疫作用的同时避免过多的CD4+T细胞成为HIV的靶细胞，这个难题不可避免。此外，由于HIV的存在还会引起一些问题。HIV会刺激大量的B细胞，减少记忆B细胞的数量，进而降低对HCV的特异性反应敏感程度，减少抗HCV中和抗体数量。

HAART疗法可能是HIV&HCV混合疫苗研发的一个突破点。有研究表明，HAART疗法可以恢复部分HCV疫苗的抗病毒能力，因此在种植HIV&HCV混合疫苗前对患者进行HARRT治疗可能会对患者有所帮助。也就是先用HARRT消除大量的HIV，然后对患者种植HCV疫苗，这样可以避免CD4+T细胞在两种病毒中的相反作用。

4丙肝疫苗的总结与展望

HCV易繁殖、易变异，对应疫苗的研制存在很多难题。目前治疗性与预防性HCV疫苗的研究有了一定的成果，但都不能稳定有效，无法应用于临床。有效的疫苗要能够产生有效的免疫反应，进而清除病毒。由于感染HCV的患者更容易感染HIV，HCV疫苗的研制要同时考虑HIV的影响，这对HCV疫苗的研制造成了很大的困难。许多研究都强调，未来的HCV疫苗研究方向是研制出中和抗体的产生与持续有效的T细胞反应并存的疫苗，并且同时考虑HIV的影响。总之，HCV疫苗将在丙肝的治疗中起到关键的作用，而HCV疫苗的研究也将继续成为丙肝研究的热点。

参考文献

[1]中华医学会肝病学分会.丙型肝炎防治指南.中华传染病杂志，2004年4月第22卷第2期.

[2]李铭,沈小川,林矫矫,倪振亚,苑纯秀,刘金明,杨冠珍,蔡幼民,吴祥甫.丙型肝炎病毒CS,NS3NS4区抗原融合基因的构建及其在大肠杆菌中的表达[J].中国病毒学,2001(3).

[3]ThomasDL.ThechallengeofhepatitisCintheHIV-infectedperson.Annu.Rev.Med.59,473–485(2008).