高中生物实验四步分析法

高中生物实验四步分析法

汪丽萍

高中生物实验四步分析法

□江西省昌江一中汪丽萍

生物学是一门实验性很强的学科，在实验过程中会有多种因素影响、干扰实验结果，致使实验失败。此时，实验分析就显得很重要：一方面，可以找出并排除影响因素，使实验重做能获得成功；另一方面，还可以总结出经验教训，甚至可能还有意外的收获、新的发现。

生物实验过程中辩证地看待实验的成功与失败、进行实验分析的一般方法、初步培养实验分析的能力，掌握生物实验中的一般分析法，即从取材、药品与试剂、步骤及操作、显微镜的使用四个方面对实验进行分析的方法。

一、选材分析

正确取材是实验成功的第一步。很多生物实验失败的原因，往往是取材不正确而引起的，因而在实验分析时，要首先考虑取材是否正确。例如，实验一“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”（以下简称“实验一”）中，取材应该是正在分裂的细胞，准确切取洋葱根尖生长点部位，是实验成功的前提。如果制成的装片中看不到或看到很少的分裂相细胞，就是因为切取部位正确导致的，即没有选准根尖的生长点部位。实验二“观察植物细胞的质壁分离和复原”（以下简称“实验二”）中，取材部位应该是在新鲜的洋葱鳞片叶外表皮的紫色较深处。而在内表皮或紫色很浅的部位取材，往往观察不到或仅有很少紫色液泡。实验三“绿叶中色素的提取和分离”（以下简称“实验三”）中，选取的叶片要肥厚、色浓，而老叶、发黄的叶子则不能用做本实验的材料。

二、药品与试剂分析

药品与试剂的量、浓度、纯度等都是影响实验正确结果的重要因素，要逐一检查，不能忽视。

1.药品与试剂的量。有些实验对药品与试剂的量有一定的要求，如实验三中，无水乙醇、层析液的量就要按规定使用：提取5ｇ叶片中的色素，用10ｍL无水乙醇是适中的，若无水乙醇过多，会使色素浓度降低，减少滤纸条上色素的量，使分离效果不明显；若无水乙醇少了，色素提取又不充分。色素分离时，向烧杯中倒入层析液时，其量的标准是液面不能超过1ｃｍ（距烧杯底），否则将没及滤纸条上的滤液细线，色素就迅速溶解到层析液中去了，结果在滤纸条上得不到相应的色素分离图谱。

2.药品与试剂的浓度。实验中，规定的浓度，都是人们经过多次试验后，认为最适合的。实验员在实验前配制药品与试剂时，浓度要配准，否则将会影响实验。如蔗糖溶液浓度较高时（高于30％），会使细胞因发生强烈质壁分离而失水过多，细胞死亡，不能复原。

3.药品与试剂的纯度。有的实验试剂的纯度有较高的要求，所用蒸馏水用自来水代替，就会影响实验结果。

三、步骤及操作分析

步骤及操作是否正确是影响实验结果的主要因素，故应重点分析，主要有以下三种情况。

1.漏做某个实验步骤。实验步骤不能少，如实验一中，根尖用15％盐酸解离后，若不经漂洗直接染色，则染色效果极差，因为根尖上附着的盐酸将和碱性染料起中和反应，从而影响着色；制片时，用镊子尖把根尖弄碎，这一步也易漏掉。

2.操作方法错误。在具体操作某个步骤时，没有按规定的操作方法做，肯定会影响实验结果。如临时装片制作时，如将盖玻片直接放在清水滴上，这样制成的装片中，气泡较多，严重影响观察。实验二中，应用镊子撕取洋葱表皮，如用刀片削或挖，以至取出的表皮较厚，这样在显微镜下也就看不到单层细胞。

3.操作不严格。如解离、染色时间不够，漂洗的时间或次数不足。制作洋葱表皮临时装片时，未将清水滴中卷起的表皮平展开来；做质壁分离复原实验时，滴入清水的次数少，滤液细线划得不细不齐都会对实验果有一定的影响。

四、显微镜的使用分析

需用显微镜的实验，有时会因为显微镜的操作，镜头污染等问题，而影响观察，看不到已经出现的现象或结果。显微镜的操作要按一定的程序进行，如对光程序、高倍镜观察程序等。如果不按程序操作，既耽误了时间，又观察不到相应的结果，而且易损坏显微镜。通常在用高倍镜观察时，把盖玻片压碎了，弄脏了镜头，就是由于在下降镜筒时，眼睛看的是目镜而不是物镜，这样，镜筒下降到什么位置就不知道了。正确的程序应该眼睛看着物镜，同时下降镜筒，让物镜接近装片，然后眼看目镜、调节细准焦螺旋直至观察到清晰物像。此外，目镜或物镜头被严重污染、焦距没有调好、放大倍数不够、视野较暗、标本不在通光孔的中心位置等诸多因素，都会直接影响观察。

“四步分析法”可以在实验课上讲授，也可以在实验（理论）专题复习课中讲授。在具体的实验分析或解题过程中，既可顺次运用，亦可综合运用，具体问题，灵活分析。