血细胞分析仪与镜检法检测低值血小板结果比较分析

血细胞分析仪与镜检法检测低值血小板结果比较分析

王延桂2姜虹2

王延桂2姜虹2

（1烟台市中心血站山东烟台264001;2烟台市烟台山医院山东烟台264001）

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)17-0385-02

【摘要】目的就血细胞分析仪与镜检法计数低值血小板结果进行比较分析。方法选取低值血小板患者血标本，用仪器进行血小板计数，同时血涂片间接计数血小板并观察形态，以人工镜检法为参考。结果镜检结果同仪器结果存在显著差异（P<0.05）。结论对低值血小板结果及仪器有错误提示或PLT直方图异常时，要进行手工复检或重新采血检测。

【关键词】血细胞分析仪镜检法低值血小板比较

血小板计数是血液检查的一个重要指标，特别是对血小板减少的患者，血小板计数是临床决定是否进行血小板输注的重要参考指标，因此准确计数血小板显得尤为重要。现在，就COULTERLH750计数低值血小板并与显微镜检进行比较分析，以评价低值血小板计数的准确性。

1材料与方法

1.1材料

1.1.1标本选取2009年6-10月住院患者标本100例，年龄2-68岁，男性67例，女性32例。血小板均<50×109/L。

1.1.2仪器血液分析仪COULTERLH750,OLYMPUS显微镜。

1.1.3试剂贝克曼公司血球配套试剂及质控液，实验室自配瑞氏染液及草酸铵溶液（均按《全国临床检验操作规程》（第二版）配制）。

1.2方法

1.2.1抽取患者1.5mg/mlEDTA-K2抗凝静脉血3ml，每份标本制备血涂片各两张。

1.2.2LH-750由厂家定期校准并参加省室间质评，成绩优异。仪器每天进行室内质控，结果均在控。

1.2.3仪器血小板计数：

每份样本在仪器上均测定2次，记录结果（数据，错误提示及直方图），求其均值。实验在采血后两小时之内完成。

1.2.4血涂片分析：涂片经瑞氏染色，选择厚薄适宜区，计数1000个红细胞并同时计数所见血小板，求得血小板/红细胞之比值。再将此值×红细胞数，求得血小板数，并观察血小板及红细胞等形态[1]。

1.2.5血小板计数参考方法：WHO推荐血小板计数方法：取20ul血加入10g/L草酸铵稀释液0.38ml，溶血10mim后充入计数板放置30min，用显微镜计数中央大方格四周4个中方格和中央1个中方格中血小板数。当血小板特别少时，仅计数中央整1大格，此操作均由有经验的检验员用双盲法计数，取两次结果的均值。

1.2.6统计学方法：各项数据用±S表示，组间比对采用t检验，检验水准α=0.05。

2结果

2.1仪器血小板计数后出现R、曲线拟合不好及有报警提示病例占65%。

2.2血涂片观察红细胞及血小板形态，并依此分组，比较仪器法、血涂片法与镜检法结果，仪器法与镜检法计数结果差异有统计学意义（P<0.05）,血涂片法与镜检法计数结果比较，大血小板组、小红细胞组、红细胞碎片组差别无统计学意义（P>0.05），血小板聚集组差别有统计学意义(P<0.05).

3讨论

3.1血细胞分析仪是计数血小板的主要仪器,LH750采用电阻抗法计数2-20fl的血小板数量，再拟合出一条0-70fl的曲线，目的是排除计数干扰，但条件不满足时，仪器不能给出拟合曲线，这时血小板数值后出现R，通常导致R的原因有:出现异常形态的血小板，血小板发生聚集，存在细胞碎片如：红细胞碎片、血小板大小不一（输血后），电磁波或噪音干扰小孔计数等。本实验结果表明，仪器曲线拟合不好或报警提示占65%，血涂片镜检所见，大血小板、小红细胞、红细胞碎片及血小板聚集病例共53%，说明在低值病理标本中干扰物质较常见，导致血小板计数结果出现偏差，小红细胞、红细胞碎片的体积与血小板分布体积接近时，仪器识别不清将误认为是血小板，使检测结果偏高，而将大血小板误认为红细胞计数，将血小板凝集团块当作白细胞来计数，使计数假性减少[2]。

3.2对血小板严重减少的患者，由于超出了电阻抗法检测血小板的线性范围，须用参考方法进行复检。本组资料显示，大血小板组、小红细胞组及红细胞碎片组，血涂片法与镜检法结果差异无统计学意义，采用血涂片法可反映患者血小板数量及形态特点。有人认为，采用血涂片计数血小板此法虽不十分精确，但可从另一侧面直观地“间接”计数血小板，还可观察血小板的大小、形态、有无聚集及聚集体大小等，是一种简单易行的方法[3]。但对血小板聚集组，血涂片法与镜检法结果差异有统计学意义，可能与血小板聚集成团、血小板分布不均，导致计数较困难有关。

参考文献

[1]KunickaJE,FischerG,MurphyJ,etal.Improvedplateletcounting:aproposednewreferenceprocedure[J].BritJHeamat,2000,10(8):228-235.

[2]TATSUMIN,TSUDAI,FUNAHARAY.Assessmentofhematologicaldataobtainedbytheapertureimpedancemethodinbloodfrompatientswiththalassemiaorhemoglobinpoathy[J].ICMRAnn,1998,8:49-60.

[3]杨良.血涂片血小板计数方法的意义[J].检验医学与临床，2009,1(6):17-18.