泰州市中医院江苏泰州225300
摘要:目的探索慢性乙型病毒肝炎患者在抗病毒治疗中用超敏HBV-DNA测定对其疗效判定的影响。方法选取我院2017年06月-2019年06月门诊及住院慢性乙型病毒肝炎患者患者326例,本研究采用普敏法和超敏HBV-DNA进行分别测定,比较两种方法的效果。结果两组测量结果表明超敏HBV-DNA优于普敏法,对血清HBsAg阳性患者阳性检出率分别为92.33%、38.34%,且超敏HBV-DNA在普敏法测定值小于103IU/mL无响应后,仍能对含量为(101-102)IU/mL患者进行准确测定。结论超敏HBV-DNA定量检测灵敏度高,对普敏法HBV-DNA测定小于103IU/mL的患者有着很好的检测技术,有助于减少患者因检测指标误导停药,影响临床治疗,超敏HBV-DNA定量检测应用价值更高,值得在临床进一步推广应用。
关键词:慢性乙型病毒肝炎;超敏法;定量
慢性乙型肝炎是由于HBV感染所致,其对人类生命构成严重威胁的传染性的疾病[1-2]。据研究统计,全世界慢性乙型肝炎病患者达到3亿,然而中国是慢性乙型肝炎主要的高发国家,在我国对于慢性乙型病毒肝炎患者的诊疗主要依赖于HBV免疫血清标志物,在其传染的过程中HBV的复制对于传染整个过程事关重要,HBV-DNA定量检测可以反映慢性乙型肝炎的传染活性[3-4],因此HBV-DNA定量分析有助于指导患者合理用药,目前临床常用普敏法进行测定,即采用传统的荧光定量聚合酶链式反应(PCR)外标法对于HBV-DNA定量分析,该方法存在灵敏度低。特异性差,且结果误差大,无法精确,通常HBV-DNA测定值小于103IU/mL则无响应,无法准确获知病情,影响合理用药[5]。随着新技术的发展,超敏HBV-DNA已在临床逐渐应用,且有助于普敏法小于103IU/mL患者准确测量,掌握病情,合理指导临床用药[6],故本研究结合我院实际情况,探索慢性乙型病毒肝炎患者在抗病毒治疗用超敏HBV-DNA测定对其疗效判定的影响,现做如下研究报道。
1资料与方法
选取我院2017年06月-2019年06月门诊及住院慢性乙型病毒肝炎患者患者326例,诊断标准为参照《慢性乙型肝炎防治指南》血清HBsAg阳性患者作为研究对象,排除标准为抗-HAV、抗-HIV、抗-HCV以及血液标本出现溶血、脂血的患者。
用无抗凝剂的干燥管采集静脉血4mL,静置后离心,分离血清后,取等量放于离心管中-20℃环境中保存待检。核酸提取方法:含有100微升的核酸吸附剂离心管中加入50微升血清,充分混匀后静置,并及时旋涡混匀。离心后弃去上层清液,重复向沉淀中添加定量洗涤液,然后将沉淀离心,留存沉淀,向内加入定量的核酸洗涤液,充分混匀,离心获取上层清液。分别进行普敏法和超敏法进行测定,超敏法:采用PerkinElmer全自动核酸提取加样仪,罗氏LightCycler480Ⅱ荧光PCR仪器进行扩增分析。普敏法:传统外标法,采用达安基因公司的乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法),检测仪器为罗氏LightCycler480Ⅱ荧光PCR仪。
2结果
通过两种方法同时对326名慢性乙型病毒肝炎患者的血清进行测定分析,结果表明,采用超敏HBV-DNA定量检测法,326名患者的血清HBsAg阳性患者超敏法检出301名阳性,而采用普敏法HBV-DNA定量检测,326名患者的血清HBsAg阳性患者超敏法检出125名阳性,且两组比较具有显著性差异,其结果见表1。
3讨论
目前的超敏定量分析均采用PerkinElmer全自动核酸提取加样仪,其对血液的标本实施可以实施一系列的核酸提取、纯化,其特点为回收率高、准确度高、重复性好等特点,本研究基于传统的荧光定量聚合酶链式反应(PCR)外标法对于HBV-DNA定量分析,该方法存在灵敏度低。特异性差,且结果误差大,无法精确,通常HBV-DNA测定值小于103IU/mL则无响应,无法准确获知病情,影响合理用药等问题,采用超敏HBV-DNA方法探索其对慢性乙型病毒肝炎患者在抗病毒治疗中疗效判定的影响,结果表明,超敏HBV-DNA定量检测法检测远优于普敏法,有助于指导患者合理用药,值得在临床进一步推广应用。
参考文献
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