苍南县人民医院浙江温州325800
摘要:受到多种原因的限制,生物监测技术目前并不完善,但是作为能够评价综合毒性的有效方法,能为人类提供大量的、连续的、综合的环境信息。生物监测方法与理化检测方法联合应用,更能够评价污染物的综合毒性效应,更准确地监测综合污染状况。本文对水环境监测中生物监测技术的应用进行了分析探讨,仅供参考。
关键词:水环境检测;生物监测;应用
1基本原理
生物体与其生存的环境关系十分密切,它们互相影响,相互制约,相互依存。当污染物进入到生物赖以生存的环境中,同养料一起被生物吸收并在生物体内发生一系列的迁移、聚集等过程。生物体受到污染,出现相应的症状。生物监测技术就是利用生物体对污染物或环境变化所产生的敏感性反映来判断污染程度的一种方法。例如,水环境受到污染时,生活在其中的鱼类反应十分敏感,其呼吸频率变化明显,当污染物达到一定浓度时,就会出现中毒现象,甚至死亡。可以利用鱼类受污染物影响前后呼吸频率的变化来判断污染物的毒性效应。
2水环境监测中生物监测技术的应用
2.1生物行为反应监测技术
生物行为反应监测是通过生物受到污染物质危害后所产生的趋利避害的行为反应或生理机能的变化,来评价水体污染情况,确定污染物安全浓度,并及时做出预警响应的方法。常用的环境监测水生生物主要有鱼类、双壳软体动物以及水蚤等,其中鱼类作为环境监测的指示生物最为常用。斑马鱼是一种对水质非常敏感的热带淡水鱼,一旦水体发生污染,就会在几分钟内做出相应的行为反应,因此是一种非常好的环境监测生物。斑马鱼的基因与人类基因有较高的相似度,以斑马鱼为指示物得出的水质监测结果,多数情况下都适用于人类。研究人员采用半静态法以斑马鱼为受试生物研究重金属对水生生物的综合毒性作用,实验发现重金属离子Cu2+、Cd2+和Cr6+对斑马鱼具有的不同毒性作用,斑马鱼体内过氧化氢酶CAT活性与Cu2+、Cd2+和Cr6+浓度均具有显著的剂量-效应关系,因此可以用斑马鱼为指示生物来监测重金属污染。另外,还有采用鲤鱼、金鱼等作为监测生物的报道,根据鱼的呼吸变化指示有毒环境,研究人员发现在有污染物存在的情况下,鱼鳃呼吸加快且无规律。在进行生物毒性分级时,可以时间为变量,即通过多种小型组合鱼在污染源废水原液中的半致死时间为标准进行判断。鱼类多用于淡水环境下的生物监测,而在海洋中一般利用双壳类生物活体对水体污染做出的生理或行为响应,国外已经取得较好的研究进展和应用示范。国外研究人员将电磁感应技术应用于贻贝双壳距离变化的监测作为水体毒性状况指示,通过高频电磁感应系统监测贝类运动,能够有效提高监测效率。除了鱼类和双壳贝类,水蚤也常被用作生物监测的指示生物,水质预警监测系统使用光电检测器来测算出水蚤的位移能力,由此判断水蚤的生命活动,从而得知水质受污染状况。另外,水蚤的死亡率或繁殖能力也可作为污染物毒性的测试指标。
2.2发光细菌监测技术
在众多的生物监测技术中,发光细菌监测技术是一项发展相对成熟的技术。该技术主要应用于自来水厂等生活用水水源的监测中,提高国民生活、生产用水的安全性。目前该技术主要以细胞发光特征、污染物遗传毒性作为参考并结合如水质毒性监测仪、Mirotox生物毒性检测仪等相应的检测仪器进行检验。该技术最快可在3h内获取检验结果,与其它技术相比具有操作便捷、灵敏度高,检验结果快等显著优势。在电子技术的推动下,发光细菌监测技术在结合紫外线分光及荧光等分度法进行技术创新之后获取了较大的发展,具有广泛的应用前景。
3实例探究生物监测技术的应用———以发光细菌监测技术为例
某县水域面积占全市总面积的42.5%,水网纵横,污染复杂。针对特定项目有毒化学物质进行监测,比如重金属、农药残留、有机物等,无法涵盖所有毒性物质,容易产生水体安全监管漏洞。因此,现对其进行发光细菌监测。
3.1检测过程
生物毒性在线监测系统的检测过程由两部分组成:①发光菌的培养和保存;②发光菌与水样接触反应进行发光测量以及测量后的质控和清洗。这两个步骤在测试中自动完成,无需人工干预。该毒性仪的设计中采用了双光路对照监测技术,测量中一路为参考水样,一路为待测水样,基于双光路的测量机理,可以克服测量中发光细菌由环境引起的变化和自身生理状态的变化。
3.1.1发光菌的培养保存
固定化的发光细菌(冻干粉)处于休眠状态,需要-20℃保存,以保持活性。在实际使用时,用复苏稀释液将固定化的发光细菌在常温中复苏15min,然后存放在一个5℃的特氟龙恒温孵育仓中。孵育仓中放有一个不停旋转的搅拌子,防止细菌溶液沉淀。复苏的发光菌的寿命为一周。
3.1.2测量
检测过程分为四步:第一步,抽取发光细菌进入菌种孵育仓,对菌种进行孵育,达到最佳的生理状态。第二步,抽取待测水样注入反应池,继而抽取发光菌同样注入反应池,混合后,检测发光量(S0)。第三步,在反应池中进行t分钟(水样测量默认30min)接触反应,再次检测发光量(St),按照以下公式计算得出相对发光度RLI(%)。第四步,测量完成后,仪器启动清洗,对光路进行清洗,防止交叉污染。
其中,RLI(%)为待测水样的相对发光度;C0及Ct分别表示参考水样的初始发光量和t时刻的发光量;S0及St分别表示待测水样的初始发光量和t时刻的发光量。每次水样测试后,接着进行一次质控样(10mg/LZnSO4•7H2O)测试,质控样要求相对发光度≤75%,测试结果与水样同步保存,从而保证测量的有效性。
3.2在线集成
仪器接入水源地水质自动监测系统中,受上位机控制,可实现全天候连续监测。一般情况下,每4h自动运行一次测试流程(遇突发状况可加密至1h),测试数据通过系统数采经由光纤网络传输至中心站数据平台。同时,仪器自带网络模块,通过组网可实现直接远程控制,实时查看仪器运行状况、远程触发调试并进行故障诊断等。
3.3监测结果
3.3.1毒物测试
使用生物毒性在线监测仪对不同浓度毒物进行测试,测定相对发光度。测试结果见表1。
另外,针对除草剂、甲醇、有机磷农药等进行毒性测试实验,当阿特拉津的浓度为2.5mg/L(溶剂丙酮的浓度约为25g/L),相对发光度为58%,具有一定毒性;25mg/L的甲醇,相对发光度为88%,毒性不大;25g/L的有机磷农药,相对发光度为16%,5g/L的有机磷农药,相对发光度为73%。
3.3.2生物毒性与常规监测指标的相关性
在监测期间,对常规指标中的生物毒性与电导率做了测量数据统计,2011年10月1日~11月11日电导率与相对发光度日均值变化见图1,41组数据相关性检验r=0.731。
4结束语
生物监测技术现在还没有在我国全面的实行起来,但是生物监测技术对于自然环境的监测能力是有目共睹的,无论是利用微观的细小生物如原生生物还是宏观生物鱼类、两栖类等都可以读取大量的环境信息,随着生物监测技术的进一步发展与推广,在将来的环境监测中生物监测一定会成为一种重要的技术手段,利用生物进行环境监测将越来越简单方便,对污染物毒性的监测也会越来越准确。对于我国走可持续化道路有着十分积极的推动作用。对水环境污染状况的评价有着重大的意义。
参考文献:
[1]吴烈国.基于无线传感器网络的水环境监测系统研究[D].中国科学技术大学,2014.
[2]朱耀祖.生物监测技术在水环境监测中的应用[J].科技与创新,2014,21:153.