73株弧菌的分离与鉴定

73株弧菌的分离与鉴定

庞敏王波田春梅

庞敏王波田春梅

(桓台县结核病防治所256400)

【摘要】从657例泻便标本分离出弧菌属细菌73株，分离率为11.1％，以致伤弧菌(24株32.8%)、副溶血弧菌(19株26%)和河弧菌(9株9.6%)为主。0-1群霍乱弧菌9株(5.5%)经血清学鉴定均为小川型，患者呈散在发病。

【关键词】弧菌属霍乱弧菌急性腹泻

【中图分类号】R931.5【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）21-0187-02

弧菌属(Vibrio)细菌是一群短小，弯曲呈弧状的的革兰氏阴性菌，是引起人类急性腹泻的主要病原菌之一。广泛分布于自然界，以水中多见，本菌属大多菌种为非病原菌，对人致病的主要有霍乱弧菌和副溶血弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。近年来，由于水质污染和海产品的大量食用，由弧菌属细菌引起的腹泻明显增加。我们在2007-2011年夏秋二季在监测霍乱弧菌的工作中，从657例急性腹泻便标本中分离出73株弧菌属细菌。

材料和方法

一、标本来源2007-2011年夏秋二季来我院就诊的急性腹泻病人粪便标本657份。

二、培养基霍乱、副溶血弧菌增菌液，硫代硫酸盐枸橼酸盐胆盐蔗糖琼脂(TCBS)，霍乱弧菌专用4号琼脂，克氏双糖铁琼脂(KIA)和各种生化反应培养基，由桓台县卫生防疫检验所提供。霍乱弧菌诊断分型血清由兰州生物制品研究所提供。

三、分离鉴定程序以无菌棉签取腹泻便分别置l％NaCl胨水和碱性胨水中，经37℃8—10h增菌，取表面培养物分别接种在4号琼脂甲板和TCBS平板，经37℃18—24h培养后，挑取可疑菌落接种在KIA上。用霍乱弧菌多价诊断血清做玻片凝集试验。暗视野观察动力。做一系列生化反应，氧化酶、硝酸盐还原试验阳性菌落用弧菌科细菌编码和微量生化反应管进行细菌生化鉴定，最后参考有关文献确定菌种[2]。

四、药敏试验药敏纸片由桓台县卫生防疫检验所提供

结果

一、73株弧菌属细菌的分类从657例急性腹泻病人粪便中分离出弧菌属细菌率为11.1％。经生化反应鉴定可归属于10个种，结果见附表：

二、药敏试验结果73株弧菌属细菌对10种抗菌药物中最敏感的是氯霉素(96.9％)，依次为复方新诺明(94.8％)，庆大霉素(87.4％)，阿米卡星(66.8％)，妥布霉素(64.9％)，多粘菌素(59.5％)，四环素(56.6％)，环丙沙星(51.7％)。主要弧菌的耐药情况：副溶血弧菌的耐药率是氨苄西林(94.8％)，青霉素G盐(91.8％)；致伤弧菌是氨苄西林(89.3％)，青霉素G盐(92.8％)；河弧菌是氨苄西林(85.7％)，青霉素G盐(100.0％)；0—1群霍乱弧菌对氨苄西林耐药62.7％，对青霉素G盐和多粘菌素耐药率均为75．0％。

讨论

与人类感染有关的弧菌属有12个种，感染后可引起不同程度的腹泻和食物中毒[3]。近年由弧菌属引起的感染性腹泻引起人们的关注。微生物实验室也从监测沙门、志贺菌属为主，向弧菌属转移。为加强霍乱弧菌的监测，2007-2011年我们对来院就诊的腹泻病人全部进行了弧菌属的培养鉴定。同期检出弧菌属细菌73例，分离率为11.1％，而检出的沙门、志贺菌属只有21例，分离仅为3.1％，说明弧菌属细菌已成为桓台地区感染性腹泻的主要病原菌。

弧菌属增菌液以1％NaCl胨水和碱性胨水为好，方便，适用，且效果满意，选择培养基则以TCES为佳[4]。本文分离出的4株o—1群霍乱弧菌经血清学鉴定均为小川型。患者呈散在发病。由于隔离治疗及时，经住院后均痊愈，末造成流行，因而微生物实验室在夏秋二季加强对霍乱弧菌的监测工作是防止霍乱流行的重要措施[5]。

必须贯彻预防为主的方针，加强检疫，及时检出病人，严格隔离治疗，必要时实行疫区封锁，以免疫情扩大蔓延。接种霍乱死菌苗，能增加人群的免疫力，保护率为55%-90%,免疫力维持的时间较短，一般为3-6个月。口服减毒活菌苗和注射类毒素可自动免疫，特别是自然筛选或通过基因重组技术获得只产生B亚单位的活菌苗，可诱导产生有效的抗毒性和抗菌性免疫。同时，及时和适当补充液体和电解质是治愈霍乱的关键所在。常用的抗菌药物有四环素，强力毒素。近年来用氟哌酸，氟嗪酸撩闲亦佳。

参考文献

[1]庞敏，山东省淄博市桓台县结核病防治所检验科

[2]毕平安，李素波．浙江嘉兴地区感染性腹泻患者病原菌调查。中华流行病学杂志，1994，15(6A)；117

[3]娄永新，王金良．实用临床细菌学检验与进展．天津：天津科技翻译出版公司，1993：145

[4]李蓉，徐迪诚．微生物分类和鉴定技术进展．哈尔滨：光明日报出版社，1989：

[5]李素波，毕平安，腹泻患者粪便弧菌属及气单胞菌属分离鉴定结果分析．佳木斯医学院学报，1995，18