康复训练对脑卒中偏瘫大鼠的行为学和脊髓GAP-43表达的影响

康复训练对脑卒中偏瘫大鼠的行为学和脊髓GAP-43表达的影响

金延华李浩范李红梅

金延华李浩范李红梅

（吉林省延边大学附属医院康复医学科吉林延边133000）

【摘要】目的：探究康复训练对脑卒中偏瘫大鼠的行为学和脊髓GAP-43表达的影响效果。方法：选取40只脑卒中偏瘫大鼠作为研究对象，对其实施为期4周的康复训练，比较康复训练前后其行为学和脊髓GAP-43表达的影响效果。结果：所有40只脑卒中偏瘫大鼠经康复训练后，行为学指标评分与未训练前相比较，组间具有统计学差异（P＜0.05）；脑卒中偏瘫大鼠脊髓GAP-43阳性细胞、GAP-43mRNA方面，康复训练前后差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：康复训练能够显著提高脑卒中偏瘫大鼠的行为学指标评分并改善脊髓GAP-43表达，具有重要的临床应用价值。

【关键词】康复训练；脑卒中；偏瘫；行为学；生长相关蛋白

【中图分类号】R74【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2015）08-0068-02

脑血管疾病是当前临床常见病，因发生突然且病情进展较快，由此所致的致残率、致死率均处于较高水平，即使经过治疗，患者往往会伴有不同程度的运动功能障碍。经临床研究证实，康复训练能够显著提高脑卒中偏瘫患者运动、行为以及认知能力，但是其作用机制当前尚未形成一致共识[1]。基于此，本次研究就康复训练对脑卒中偏瘫大鼠的行为学和脊髓GAP-43表达的影响展开深入分析，现将结果报道如下：

1.资料与方法

1.1一般资料

选取40只脑梗塞偏瘫大鼠作为研究对象，所有大鼠均为雄性，日龄：25d～42d，平均日龄（38.5±1.5）d。

1.2方法

1.2.1康复训练方法所有40只脑卒中瘫大鼠均实施为期4周的康复训练，其具体训练内容如下：（1）转棒行走、平衡木训练。采用滚筒式训练器械对脑卒中偏瘫大鼠进行转棒行走训练，转动频率控制在5.5r/min。之后将长度为150cm、宽2.5cm的方木棒放置在距离地面10cm处进行平衡木训练，引导大鼠在该平衡木上行走。转棒训练则是选取长度为110cm、直径5cm的木棒并将其中心点固定在5r/min的自动转动器之上，分别进行左右往复交替运动，以此来锻炼脑卒中偏瘫大鼠平衡能力。

（2）网屏训练。选用网屏大小为50cm×50cm的孔隙网带，孔隙大小为1.5cm×1.5cm，网屏左右以及上方的木质边框高度为30cm，其距离地面的垂直高度为85cm，并在网屏下方铺垫厚度为10cm左右的海绵。在平行位置时将脑卒中瘫大鼠置入网屏内部，之后缓缓提高一端网屏，在10s时间内将网屏由水平位置转变至竖直姿态，以此来观察大鼠抓握能力。

上述康复训练每次训练持续时间为30min，每周训练5次，四周后评估大鼠行为学指标改善情况。

1.2.2脊髓GAP-43表达测定方法脊髓GAP-43表达的测定采用齐一生物科技（上海）有限公司生产的GAP-43检测试剂盒进行测定，所有检测步骤均严格按照试剂盒内说明书操作要求进行。其工作浓度为1:55，Caspase-3蛋白检测之中以细胞浆棕黄色着色为阳性细胞，在高倍电子显微镜下计算所有脑卒中偏瘫大鼠GAP-43阳性细胞数量。GAP-43mRNA则是采用逆转录PCR技术（ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction）以及紫外线光度计进行测定[2]。

1.3观察指标

本次研究观察指标为康复训练前后脑卒中偏瘫大鼠行为学指标以及脊髓GAP-43表达改善效果。其中行为学指标包括Bederson神经功能、平衡木、转棒行走、网屏实验四项评分，除转棒行走评分总分为5分外，其余三项总分均为3分，得分越高表明康复训练效果越差；脊髓GAP-43表达包括GAP-43阳性细胞、GAP-43mRNA两项内容。

1.4统计学方法

本次研究当中的所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行处理，计量资料采用均数±标准差（x-±s）表示，以t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2.结果

2.1康复训练前后脑卒中偏瘫大鼠的行为学指标比较

所有40只脑卒中偏瘫大鼠为实施康复训练前Bederson神经功能评分为（2.50±0.50）分、平衡木（2.78±0.48）分、转棒行走（4.81±0.50）分、网屏实验（2.50±0.72）分。经经康复训练后Bederson神经功能评分为（1.11±0.22）分、平衡木（1.08±0.21）分、转棒行走（2.24±0.12）分、网屏实验（0.88±0.24）分，康复训练前后各指标评分相比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2康复训练前后脑梗塞偏瘫大鼠脊髓GAP-43表达比较

康复训练前脑梗塞偏瘫大鼠脊髓GAP-43阳性细胞为（13.98±3.20）、GAP-43mRNA（1.24±0.15），康复训练后，GAP-43阳性细胞为（8.8±2.50）、GAP-43mRNA（0.68±0.15），康复训练前后差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3.讨论

生长相关蛋白（growthassociatedprotein-43，GAP-43）在正常发育过程中，其神经元的轴突能够延长并与轴突靶组织形成明显的突触，继而保证生物个体的各项功能[3]。对于生物个体之中成熟的神经元而言，其轴突的生长状态以及突触的可塑性始终始终处于被抑制状态，从而避免了神经元轴突及突触过度生长而影响行为、运动、认知功能。所以无论是GAP-43阳性细胞还是GAP-43mRNA在机体为受到损害时均处于较低表达水平。然而，一旦机体受到损伤，如：脑血管疾病，则神经元轴突因受损而导致轴突延长与重建功能被激活，其表达含量随之提高。因而，通过监测并实施有效的锻炼来恢复神经元功能，则能够显著提高机体各项功能的恢复效果且GAP-43阳性细胞、GAP-43mRNA得到抑制而含量降低。

本次研究中所有40只实验用脑卒中偏瘫大鼠在实施康复训练前后，其自身的Bederson神经功能、平衡木、转棒行走、网屏实验四项评分以及GAP-43表达方面均取得了比较理想的改善效果，结果表明，康复训练能够显著提高脑梗塞偏瘫大鼠行为学指标并改善脊髓GAP-43表达，具有重要的临床应用价值。

【参考文献】

[1]樊留博，章霞，卢战等.电针联合强制性运动对脑缺血大鼠神经功能及GAP-43表达的影响[J].中华中医药学刊，2015，11（01）:162-165.

[2]樊留博，刘宝华，章霞等.电针联合强制性运动对脑缺血大鼠GAP-43和GFAP表达的影响[J].温州医科大学学报，2015，14（03）:166-170.

[3]廖杨平，程道宾，苏丽等.运动训练对大鼠脑缺血再灌注后神经修复及GAP-43和Neurocan表达的影响[J].中风与神经疾病杂志，2011，15（04）:303-306.