做好血站酶免检测室内质控分析

做好血站酶免检测室内质控分析

陈文和张慧玲杨雪斌

红河州中心血站661100；红河州妇幼保健院661100；红河州中心血站661100

【摘要】酶免血液检测是血站保证血液质量的核心，而使用弱阳性质控血清进行室内质控能有效监测和评价本实验室实验操作过程的规范性，试剂的稳定性，环境的适宜性和仪器的运行状况等，通过总结笔者认为做好血站酶免检测室内质控应通过选择合适的质控血清浓度；做好质控血清的保存和使用保证质控品的重复性、精确性、连续性；做好新进质控品使用前的确认工作；以及制定出适合自己工作实际的质控判断规则来实现。

【关键词】ELISA；血液检测；室内质控

【中图分类号】R461【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）-07-315-01

血站采用的定性ELISA试剂本身都带有阴性、阳性对照品，它只能监测实验的有效性，无法监测灵敏性及测定下限的变化，为了更好的保证血液检测质量，国家规定必须使用弱阳性质控血清进行外部评价，即室内质控。它的主要作用在于监测实验的精确性和重复性，发现随机误差，减少系统误差对实验的影响，那么血站实验室如何做好酶免检测室内质控呢，现就日常工作中的几点体会，与同行分享：

一、应选择合适的质控血清浓度

现在采供血机构使用的室内质控血清基本上都是从北京康彻斯坦生物有限公司购买的，而且北京康彻斯坦生物有限公司针对一个实验项目提供的室内质控品又是一个系列浓度，那么我们就必须对这一系列浓度的质控血清进行测定，以选择适合自身浓度的质控品。方法是购买少量系列浓度的质控品，以目前正在使用的试剂、方法对其进行测定，求其OD均值，并计算出S/CO均值，以2-5倍左右的S/CO值作为选择质控血清浓度的标准【1】，按《血站实验室质量管理规范》要求，采供血机构实验室最少使用1种以上试剂（国产或进口），也就是说每个检测项目我们应当根据试剂的不同选择不同浓度的质控品，虽然国产试剂之间差异不是很大，但国产试剂与进口试剂之间存在很大的差异，选择时应当特别注意。

二、做好质控血清的保存和使用

每次购买回质控血清后，应及时移入-20℃冰箱保存，并做好标识，使用时应根据实验用量，有规律、有计划地对其融解，最好每周融解一次，保存在4℃冰箱内，避免反复冻融，融解剩余质控血清应废弃；另外，在实验过程中应当尽量减少质控血清在室温的放置时间，加样完毕后及时收回放进4℃冰箱。只有这样才能保证质控血清内各成分相对稳定，从而使监测实验结果的精确性得到保证。

三、做好新进质控品使用前的确认工作

《血站实验室质量管理规范》规定室内质控品使用前必须进行确认，每新到一批质控品，由于邮寄过程中温度不能保证（3-4天），质控品浓度会有所变化，尤其是高温季节，因此，使用前质控品的确认就显得尤为关键，方法为：用同批号的试剂对其测定，求出S/CO均值，与原来使用相同浓度（不同批号）的质控品测定的S/CO均值比较，自己制定一个可接受范围标准，若在标准范围内则可使用，若超出标准，则不能使用【2】。

四、做好质控品的重复性和精确性需注意的问题

现在，采供血机构实验室最头疼的是质控品的精确性和重复性，当然不同批号的试剂，不同批号的质控品，不同的人员操作，会对质控品的重复性产生一定的影响和差异，但在实验过程中发现这个差异不大，完全可以接受，其主要影响因素为：1全自动酶免系统前处理加样的准确性和酶标阅读仪测量的准确性，我们应当定期对其维护、保养和校准，确保加样和判读准确无误。2实验室必须有一个相当恒定的温度和湿度（温度18-25℃，湿度30-70％），尤其是在每年换季时，温差大，更应保证室内的温度和湿度。3工作人员要形成一个相当稳定的工作流程和良好的操作习惯，不能随意的更改实验流程，更不能非法操作。

五、做好室内质控的连续性应注意的问题

大家都知道，不同批号的试剂、质控品、不同的人员操作，都应重新绘制质控图，这样就很难保证质控图的连续性，尤其是检测量不大的血站，试剂和质控品的批号不停的更换，这样就更不能保证室内质控的连续性。另外，重新绘图时，会暂时出现一个质控图的断档现象，而且断档期的数据无法得到控制，形成一时的“盲区”。一个好的解决方法是：我们要加大同一批号的试剂和质控品的库存量，一般为（4-5个月），一方面保证短期不更换，另一方面是试剂和质控品同步；而在试剂或质控品更换时，只需在质控图上作明标记，按原来的方法继续绘图，达到一定次数后（一般为20次），重新求出均值和标准差，按新的数据继续绘图，这样就不会出现断档，也能更好地做到质控图的连续性。

六、制定出适合自己工作实际的质控判断规则

现在我们大多采用Levey-Jennings质控图法，如果按要求来讲，质控的判断规则最少也有七八条，甚至上十条，但从实际工作角度考虑，有些在工作中根本用不上，因此，我们必须调整和选择一些与实际工作密切相关的，以此作为标准，比如：一次超出±3SD，连续2次超出±2SD，连续4个质控点落在同一侧1S以外，连续两个点相差4SD，连续7次呈上升和下降趋势算作实验失控，总之要简练实用。

七、更换试剂批号时对室内质控品的处理

由于酶联免疫试剂的效期相对较短，而在冷冻条件下，免疫质控血清效期相对较长，一个批号的质控血清往往要几个批号的试剂才会用完，因此实验中常会遇到更换试剂批号后如何处理质控图的问题。更换不同厂家的试剂必须重新计算RCV（最好在更换前完成RCV的测定，以免中断室内质控）。更换相同厂家不同批号的试剂，使用质控血清浓度值上下相邻的系列质控血清验证新批号试剂S/CO值的一性。推荐对不同批号试剂间系列血清结果回归方程进行比较，以获得两批试剂间的换算因子，可以在同一质控图上继续描点室内质控的目的在于监控试验的有效性，确保日常工作的连续性和稳定性。室内质控能控制实验室每天的检测结果是否可靠，能否报告，是实验室管理的最基本措施。要做好室内质控，必须抓好质量控制的每一个环节。要获得可靠的血液检验结果，必须建立健全室内质控体系。规范实验室质量管理体系和标准操作规程，做好检验科的SOP文件，并严格按照文件进行操作，常规做好每天的室内质控。

参考文献：

[1]邓晓琴、杨茂、刘颖等血站实验室酶联免疫吸附试验室内质控的实施与探讨《实用医院临床杂志》2012年09期

[2]饶月丽、张伟强、邬丽娜酶联免疫吸附试验室内质控影响因素的分析《临床血液学杂志》2009年06期