女性NGU患者生殖道分泌物HSV的检测

女性NGU患者生殖道分泌物HSV的检测

邓茂1黄文才2赵家兰3李燎1颜丹1(通讯作者

（1四川医科大学附属第一医院皮肤性病科610000）

（2泸州市第二人民医院646100；3泸州市纳溪区中医院646000）

【摘要】目的：了解川南地区女性非淋菌性尿道炎（NGU）患者单纯疱疹病毒（HSV）感染情况。方法：采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对134例临床诊断为NGU的女性患者和62例参加健康体检妇女生殖道分泌物进行HSV检测。结果：134例女性NGU患者中，检测出HSV阳性者36例，阳性率26.87%（36/134）；62例健康妇女体检中，HSV阳性者3例，阳性率4.84%（3/62），患者组与对照组比较差异有显著意义（x2=107.45，P<0.05）。结论：NGU女性患者容易合并HSV感染，FQ—PCR快速、简便，特异性高，灵敏度强，操作简便，此法用于检测HSV，可诊断且可分型，有利于UGN患者合并HSV感染的早期诊断和及时治疗。

【关键词】女性；NGU；分泌物；HSV；检测；川南地区

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）33-0024-02

ThefemalegenitaltractsecretionsNGUpatientsthedetectionofHSV

DengMao,LiLiao,YanDan(correspondingauthor).FirstHospitalAffiliatedtoSichuanMedicalUniversity,SichuanProvince,Chengdu610000,China;

HuangWencai,TheSecondPeople'sHospitalofLuzhou,SichuanProvince,Luzhou6461003,China;

ZhaoJialan.TheTraditionalChineseMedicineHospitalofNaxiDistrict,LuzhouCity,SichuanProvince,Luzhou646000,China

【Abstract】ObjectiveInthebasisofunderstandingofsexofgonococcusofwomenblameurethritis(NGU)patientswithherpessimplexvirus(HSV)infection.MethodsUsingfluorescencequantitativepolymerasechainreaction(FQ-PCR)techniquein134casesofclinicaldiagnosisforthehealthycheck-upofthefemalepatientsand62casesofNGUwomen'sgenitaltractsecretionsdetectionofHSV.ResultsOf134casesoffemalepatientswithNGU,detectHSVwas36cases,positiverate26.87%(36/134);62casesofhealthywomeninthephysicalexamination,HSVwas3cases,agroupofpatientswithpositiverate4.84%(3/62),therearesignificantdifferencecomparedwithcontrolgroupsignificance(chi-square=107.45,P<0.05).ConclusionsNGUwomeneasytomergeHSVinfection,FQ-PCRisrapid,simple,highspecificity,strongsensitivity,simpleoperation,thismethodisusedtodetectHSV,candiagnosisandclassification,isconducivetoUGNcombinedHSVinfectioninpatientswithearlydiagnosisandtimelytreatment.

【Keywords】Women;NGU.Secretion;HSV.Detection;Sichuanregion

NGU是最常见的性传播疾病之一，其致病原因主要是感染了沙眼衣原体及解脲支原体[1]，近年来NGU患者感染HSV的情况已受到关注[2]，为了解川南地区女性NGU患者感染HSV情况，我们用FQ—PCR对134例送检的NGU女性患者标本和62例健康体检妇女标本进行HSV检测，现报告如下。

1.资料与方法

1.1病例资料

134例女性患者按照NGU诊断标准[3]已明确诊断为NGU，她们来源于我院皮肤性病科、泌尿外科和妇产科；来源于泸州市第二人民医院、泸州市纳溪区中医院的性病科和妇产科，年龄在19～51岁，平均33.6岁。对照组标本来源于来我院进行健康体检的妇女，年龄28～55岁，平均32.8岁，UU（支原体）、CT（衣原体）检测均为阴性。

1.2标本采集

用无菌棉拭子插入女性宫颈管内2cm左右，轻轻旋转以获取足够的上皮细胞和分泌物，停留约10s后轻轻取出，置-20℃冰箱中保存待检。

1.3试剂与仪器

HSV荧光定量PCR的试剂盒购于深圳匹基生物技术有限公司；使用杭州大和热磁电子有限公司生产的基因扩增仪（TC—96/T/H）和上海棱光技术有限公司生产的微量荧光检测仪（DA620）。

1.4方法

1.4.1引物设计在单纯疱疹病毒DNA聚合酶基因保守序列区设计一对引物[4]：51-AAGGAGGCGCCCAAGCGTCCG-31和51-TGGGGTACAGGCTGGCAAAGT-31，HSV-I扩增长片段度为299bp，HSV-Ⅱ扩增片段长度为241bp。

1.4.2标本处理将所取标本置1ml生理盐水中，15000r/min离心5min，弃上清液，在沉淀中加入50ulDNA提取液，充分混匀，煮沸10min，1000r/min离心5min，取上清液2ul作FQ-PCR反应。

1.4.3FQ-PCR检测标本经过DNA提取液裂解后，取制备好的DNA模板2ul做PCR，同时做标准曲线，且设阴阳对照管。循环条件：93℃预变性2min，然后按93℃45s、55℃60s做10个循环，最后按93℃30s、55℃45s做30个循环；保存文件，运行程序。工作结束，仪器自动计算出检测结果。阳性标本定量对数平均值为2.4×106。

1.5统计学处理

数据处理用x2检验。

2.结果

2.1在134例NGU女性患者（患者组）中，检出HSV阳性36例，占26.87%（34/134）；其中HSV-II阳性18例，占13.43%（18/134）,HSV-I阳性12例，占8.96%（12/134），HSV-II和HSV-I均阳性6例，占4.48%（6/134）。

2.2在62例健康体检妇女（对照组）中，检出HSV阳性者3例，占4.84%（3/62），这3例均是HSV-I，未检出HSV-II。

3.讨论

NGU目前在西方欧美的一些国家已位居性传播疾病之首，在我国其发病率也日渐增多，已成为最常见的性传播疾病之一。NGU是由除淋球菌以外的多种病原体感染引起的尿道炎的总称，NGU的病原体复杂多样。近年来NGU患者合并感染HSV的情况已受到广大医务人员关注。本实验检测的结果表明，女性NGU患者组感染HSV阳性率为26.87%，其中HSV-II阳性18例，占13.43%（18/134）,HSV-I阳性12例，占8.96%（12/134），HSV-II和HSV-I均阳性6例，占4.48%（6/134）。

说明患者合并感染HSV的主要是HSV-II；对照组感染HSV-II的阳性率仅为4.48%，且无HSV-I感染，两个组感染HSV-II的情况相比较差异显著（x2=106.45，P<0.05），说明女性NGU患者有可能合并HSV感染，而且主要是合并HSV-II的感染。FQ-PCR技术具有简便、快速、准确、特异性高的特点，此法用于检测HSV特异性DNA，既可诊断又可分型，有利于UGN患者合并HSV感染的早期诊断和及时治疗。

【参考文献】

[1]BravermanPK，StrasburgerVC.SexuallyTransmittedDiseases.ClinPediatPhila.1994,33(1):26-37

[2]RalphMadeb，NeedforDiagnosticScreeningofHerpesSimplexVirusinPatientswithNongoncoccalUrethritis.ClinicalInfectiousDiseases.2000，30(2):982

[3]叶干运，徐文严等，主编.性传播疾病.南京：江苏科学技术出版社，1988.43

[4]张学军主编.皮肤性病学.第五版.北京：人民卫生出版社，2001.190.