精液的免疫学检查分析

精液的免疫学检查分析

蔡胜男

蔡胜男（黑龙江省医院150036）

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）22-0185-02

不育(孕)的原因十分复杂，免疫学因素和某些病人的不育(孕)有密切关系。尤其是血清和生殖道局部的抗精子抗体(antispermatozoonantibody，AsAb)是引起免疫性不育(孕)的主要原因。

1抗精子抗体测定

抗精子抗体对精子有制动和细胞毒作用。男性和女性病人都可出现，尤其对男性不育症的综合分析有一定参考价值。

1.1检测方法及评价

1.1.1酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)将精子抗原吸附到聚苯乙烯固相载体表面，其固相抗原可与标本中AsAb结合，并与加入的抗人IgG酶结合物起反应，形成抗原-抗体-酶结合物免疫复合物。最终在酶底物作用下而显色。本法测定AsAb的敏感性高，特异性强，是目前国内临床上使用最多的AsAb确诊试验。

1.1.2精子凝集试验(spermagglutinationtest，SAT)血清、生殖道分泌物中存在的AsAb与精子膜固有抗原结合，使精子出现凝集现象。用试管-玻片凝集法或浅盘凝集法观察无凝集，或观察10个高倍视野有6个以上视野无凝集者为阴性。本试验操作简单、快速，但仅为判断AsAb是否存在的过筛试验。

1.1.3精子制动试验(spermimmobilizationtest，SIT)AsAb与精子表面抗原相互作用激活补体系统，使精子顶体破坏，中段细胞膜通透性及完整性受损，导致精子失去活力。精子制动值<2时为阴性。本试验为判断AsAb是否存在的过筛试验。

1.1.4免疫珠试验(immunobeadtest，IBT)是用兔抗人免疫球蛋白共价结合的聚丙烯酰胺微球，可同时检测IgA、IgG、IgM型抗体。将洗涤后的精子悬液与免疫珠悬液混合后，免疫珠会粘附于表面有抗体的精子上。用相差显微镜观察，≥20％的活动精子被免疫珠粘附时为阳性。为WHO推荐的方法，国内临床上应用较少。

1.1.5混合免疫球蛋白试验(mixedantigloblinreaction，MAR)用混匀未加处理的新鲜精液与包被人IgG的胶乳粒混合，再向混合液中加入特异的单克隆抗人IgG血清。在胶乳粒与活动精子之间形成混合凝集证明精子表面有IgG抗体存在。若≥50％的活动精子同颗粒粘附表示可能为免疫性不育；10％～50％活动精子与颗粒粘附，为可疑免疫性不育。为WHO推荐的方法，国内临床上应用较少。

1.2质量控制免疫珠试验与MAR试验两者结果并非经常一致，免疫珠试验与精子凝集试验和制动试验呈正相关。如这些试验为阳性，还应辅以酶联免疫吸附试验等加强诊断的正确性。不育夫妇AsAb阳性者占25％～30％，其所针对的抗原绝大多数在精子膜上。

1.3临床意义AsAb有IgG、IgA、IgM、IgE四种类型。在血清、精浆、宫颈粘液中，不同类型AsAb均可测出，血清中AsAb以IgG、IgM为主，精浆中以IgA、IgG为主。AsAb按其对精子的作用分为凝集性、制动性和结合性三类。AsAb的作用机制为：①由于精子制动抗体的作用或因精子被粘附在宫颈粘液上，影响精子通过子宫颈管。②抑制精子顶体酶的活性，使精子不易穿透包绕卵细胞的卵丘、放射冠和透明带。③抑制精子与卵细胞膜的融合。④导致胚胎死亡和流产。

2精浆免疫抑制物质测定

人类精液含30多种抗原，但其进入女性生殖道后通常并不引起免疫应答，这是因为在精浆中含有免疫抑制物质(seminalplasmaimmunoinhibitionmaterial，SPIM)。SPIM的免疫抑制效应可能是多种物质综合作用的结果。其中的妊娠相关蛋白A(PAPP-A)，亦称男性抑制物质(maleinhibitionmaterial，MIM)能抑制机体对精子的免疫反应，保护受精卵免受排斥，维持正常的生殖生理过程。SPIM测定常用抗补体试验，MIM测定一般采用单向免疫扩散试验。参考值SPIM为430±62U／ml，MIM为3.0±0.3g／L。

SPIM和MIM活性减低与不育(孕)、习惯性流产、配偶对丈夫精液过敏的发生密切相关。

3精浆免疫球蛋白测定

正常男性精浆中免疫球蛋白的含量仅为血清的1％～2％。临床上常用双抗体夹心ELISA法或放射免疫分析法进行测定。双抗体夹心ELISA法：IgA为90.3±57.7mg／L，IgG为28.6±16.7mg／L，IgM为2.3±1.9mg／L，无补体C3和C4。AsAb阳性者IgA、IgG和IgM显著高于AsAb阴性者，生殖道感染者分泌型IgA增高。

参考文献

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