解郁安神法对睡眠剥夺大鼠褪黑激素时相性作用观察

解郁安神法对睡眠剥夺大鼠褪黑激素时相性作用观察

黎齐秒1熊嘉玮1吴海波2陈宝田1*

黎齐秒1熊嘉玮1吴海波2陈宝田1*（*通讯作者）

（1.南方医科大学附属南方医院中医科广州510515;

（2.上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院，上海200437）

作者简介：黎齐秒，女，南方医科大学中医药学院在读博士研究生，从事中西医结合脑病研究。通讯作者：陈宝田，教授，主任医师，博士生导师，国务院有突出贡献专家津贴获得者，国家中药管理局脑病重点学科带头人，中华全国中医药学会科技奖评委，广东省中西医结合疼痛专业委员会主任委员。

【摘要】目的:研究解郁安神法对睡眠剥夺大鼠褪黑激素的影响。方法:30只大鼠随机方法分为治疗组和对照组；睡眠剥夺72小时，分别在睡眠剥夺0h，24h，48h，72h检测大鼠褪黑激素含量。结果：在0h,24h治疗组和对照组大鼠褪黑激素指标无显著性差异。在第48h,72h两个时间点上，两组的褪黑激素比较有显著性差异（48h：t=-3.247，P=0.003；72h：t=-4.770，P=0.000）。结论：中药解郁安神法可以促进试验大鼠褪黑激素含量的升高，是解郁安神方调节睡眠的机制及依据。

【关键词】柴胡桂枝汤；解郁安神；睡眠剥夺；褪黑激素

【中图分类号】R135.8【文献标识码】B【文章编号】1008-6455（2010）09-02

失眠症是一种严重影响人类健康的病症,大约有10%-15%的成年人患有慢性失眠，褪黑素(melatonin，MT)作为近年来研究睡眠障碍的重要激素，具有明确的促进入睡及增加睡眠时间的作用。笔者观察中药治疗失眠症过程中，褪黑素浓度的变化，进一步探讨中医药治疗失眠的作用机制。

1材料与方法

1.1实验动物：清洁级Wistar大鼠30只，南方医院实验动物中心提供。随机方法分为2组，每组15只。

1.2试验药物：中药柴胡桂枝汤颗粒（药物由南方医院中药房提供），治疗组大鼠每天按20g·Kg-1灌胃，生理盐水组给予等量生理盐水灌胃。

1.3实验方法：采用“改良多平台睡眠剥夺法”进行睡眠剥夺[1]。两组分别在睡眠剥夺（SD）0h，24h，48h和72h时，采血检测血清褪黑激素。（测定方法：时间：凌晨01:00~02:00时段；4℃冰箱静置，2500r/min离心10min。采用ELISA法检测褪黑激素水平。

1.4统计方法：采用统计软件SPSS13.0进行统计学处理和分析，治疗前后指标差值采用协方差分析（analysisofcovariance，ANCOVA），不同时间点数据变化采用重复测量数据的方差分析（ANOVAfortherepeatedmeasures）和独立样本t检验进行比较（Independent-SamplesTTest）。

2结果

（1）如表1两组治疗前后褪黑激素含量变化有显著性差异（F=70.601，P=0.000），说明治疗组褪黑激素含量增加的速度显著快于对照组。

（2）如表2，两组治疗中褪黑激素随时间变化的观察：在第3，4天两组的血清褪黑激素比较均有显著性差异（第3天：t=-3.247，P=0.003；第4天：t=-4.770，P=0.000），分组与时间之间存在交互作用（F=29846，P=0.000）。

说明中药安神方治疗在排除睡眠剥夺的干预因素后，能够促进大鼠血清褪黑激素含量升高的速度。

3讨论

褪黑素(Melatonin，MT)是主要由松果体分泌的神经内分泌激素，血中褪黑素水平呈现昼夜节律变化[2]，具有抗自由基损伤达到脑保护功能[3-5]近年来，褪黑激素诱导自然生理性睡眠，矫正紊乱的睡眠节律的作用尤为引人注目[6]，对于抑郁症、老年性、帕金森病、精神症状伴有的睡眠质量下降，通过补充MT，增加患者夜间睡眠时间效果显著[7，8]；褪黑激素作为调节睡眠活动的重要神经递质，已被广泛用于临床研究与治疗中。

在本试验中，中药安神方治疗能够促进睡眠剥夺条件下大鼠血清褪黑激素含量升高的速度，作为中药安神方调节睡眠障碍动物的睡眠作用机制，也为进一步为中药安神法改善脑功能提供了证据。

参考文献

[1]MeerloP,SgoifoA,SucheckiD.Restrictedanddisruptedsleep：effectsonautonomicfunction,neuroendocrinestresssystemsandstressresponsivity[J].sleepmedrev,2008;12(3)：197-210

[2]JastrowH,RackeJ.AnalysisofsynapticbodiesintheSpraguedawleyratpinealglandunderextremnphotoperiods[J].Micron,2007,38(3):237-51

[3]MaldonadoMD,Murillo-CabezasF,TerrorMP,etal.Thepotentialofmelatoninineducingmorbidity-mortalityaftercranioceebraltrauma[J].JPinealRes,2007,42(1):1-11

[4]ReiterRJ,GultekinF,FloresLJ,etal.Melatonin:potentialutilityforimprovingpublichealth[J].TSKKoruyucuHekimlikBlteni,2006,5(2):131-158

[5]ReiterRJ,TanDX,TerronMP,etal.Melatoninanditsmetabolites：newfindingsregardingtheirproductionandtheiradicalscavengingactions[J].ActaBiochemPol,2007,54(1)：1-9

[6]BoutinJA,AudinotV,FerryG,etal.Moleculartoolstostudymelatoninpathwaysandactions[J].TrendsPharmacolSci,2005,26(8):412-419

[7]DowlingGA,MastickJ,CollingE,etal.MelatoninforsleepdisturbancesinParkinson.sdisease[J].SleepMed,2005,6(5)：459-466

[8]SrinivasanV,Pandi-PerumalSR,CardinaliDP,etal.MelatonininAlzheimer’sdiseaseandotherneurodegenerativedisorders[J].BehavBrainFunct,2006,2:151