程斌1陈煜2程寅琳3刘霞3(1.上海市浦东新区人民医院检验科;2.北京理工大学材料学院;
3.第二军医大学长海医院医院感染中心上海201200)
【摘要】研究对比壳聚糖碘,碘町,安尔碘对金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌的抑菌效果。方法纸片琼脂扩散法。结果对于金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌壳聚糖碘与安尔碘有相同的抑菌作用。
【关键词】壳聚糖碘;碘町;安尔碘;金黄色葡萄球菌;铜绿假单胞菌;大肠埃希氏菌;纸片琼脂扩散法
【中图分类号】R285.5【文献标识码】B【文章编号】1008-6455(2010)10-0224-01
壳聚糖(chitosan)是自然界中唯一的带正电荷的支链多糖,具有抗菌,抗肿瘤,增强免疫等功能,由于2-NH2的存在,壳聚糖具有一定的抑菌功能,但抑菌性能有限,且受到壳聚糖分子量、脱乙酰度等条件的影响。在壳聚糖分子链上接枝季铵盐后可显著提高其抑菌性能。本实验采用对壳聚糖接枝环氧丙基三甲基碘化铵型壳聚糖季铵盐衍生物(简称壳聚糖碘)的抑菌性能进行了研究。安尔碘,碘酊都是常用的消毒剂,尤其是安尔碘在临床已应用多年,是一种含碘络合物的复合消毒剂,具有消毒能力强,杀菌迅速,不易引起过敏等优点,是一种深受临床工作者喜爱的消毒用品,本实验是将壳聚糖碘与传统的消毒产品碘町,安尔碘作一些常规菌株的抑菌对比,为开发新型的消毒产品提供一些理论依据。
1材料和方法
1.1材料:壳聚糖碘由北京理工大学材料学院合成,碘町中国常熟市星海制药有限公司生产,安儿碘由第二军医大学长海医院提供。
1.2(1)药敏纸片的制备:将定性滤纸用打孔器打成0.6mm,121℃15min高温灭菌,用无菌吸头吸取5ul壳聚糖碘(浓度为2%),碘町,安尔碘逐片加样5ul,放无菌培养皿中置37℃孵育箱烘干,密封储存于2℃-8℃无霜冷冻箱内备用
(2)菌株:卫生部临床检验中心的质控菌株金黄色葡萄球菌(ATCC29213),铜绿假单胞菌(ATCC27853),大肠埃希氏菌(ATCC25922)
(3)M-H培养基和血平板均由上海科玛嘉生物技术有限公司提供
1.3(1)将菌株接种置血平板,37C孵育箱24小时
(2)将接种的细菌用无菌棉签挑至无菌生理盐水中,调节至0.5麦氏比浊标准的菌液浓度,用无菌棉签蘸取菌液,在管壁内将多余菌液旋转挤去,然后在血平板内均匀涂抹3次,每次旋转平板60C,最后沿平板内缘涂抹一周
(3)将涂抹菌液后的血平板置室温下3-5min,用无菌镊子将含材料纸片紧贴于血平板琼脂表面,各纸片中心相隔>24mm,纸片距平板内缘>15mm
(4)将以上血平板置于37℃孵育箱24小时阅读结果。
2结果
以下是抑菌圈直径的测量结果:
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3讨论
根据现代医院消毒学对抑菌试验的判断标准,抑菌环直径>7mm者,判断为有抑菌作用,结果显示,这三种不同的含碘消毒产品对金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,大肠埃希氏菌均有抑菌作用,抑菌环的直径大小排列为:壳聚糖碘>=安尔碘>碘町,造成此结果的原因是由于壳聚糖本身有抑菌作用,与碘络合以后使其的抑菌作用大大增强,所以显示出对以上细菌的强大抑菌能力,与复方抗菌剂安尔碘的抑菌能力不相上下。碘及其复合物具有广谱杀菌抑菌作用,其作用原理是碘元素直接穿透细胞膜,使菌体蛋白质凝固,产生沉淀,从而导致微生物死亡。壳聚糖的抗菌原理主要是由于其本身携带正电荷,小分子量的壳聚糖能穿透细胞壁进入细胞,导致细菌的代谢紊乱,从而起到杀菌作用,大分子量的壳聚糖则由于正电荷的作用黏附在细胞壁表面,破坏细胞膜渗透屏障作用,从而起到杀菌作用,壳聚糖碘的抑菌原理很复杂,目前还处于研究阶段。
安尔碘,碘町(俗称碘酒)是都是常用的含碘消毒剂,碘町主要用于皮肤消毒。碘町杀菌作用较强,其碘的含量为2%、碘化钾的含量为1.5%,因有强烈的刺激作用,不宜用于消毒粘膜,用于皮肤消毒时.待碘町干后,须用酒精擦除,,同时也减轻对皮肤的着色,否则会引起皮肤发泡或过敏甚至于引起皮肤碘烧伤。2%碘町还可用于外科紧急灭菌处理等。安尔碘是国内首创的一种新型含络合碘复合型皮肤消毒剂,具有广谱、速效、特效的杀菌作用,其独特有效的杀菌消毒效果经过多年的应用得到了临床的认可。但是,碘町和络合碘对皮肤都有一定的刺激性,而络合碘中所用的表面活性剂(如PVP)等长期使用存在着一定的毒性,而壳聚糖无毒性,刺激性,无免疫抗原性,是一种有良好的生物相容性的生物材料,与碘络合以后,壳聚糖碘作为一种新型的抗菌剂具有很多特点:
首先,壳聚糖碘克服了碘伏,碘维酮等抗菌剂遇水后容易流失的问题,络合碘碘不稳定的缺点,壳聚糖碘在60℃温度下加热6小时,有效碘的流失<1%。
其次,动物实验表明壳聚糖碘对动物的皮肤和黏膜不会产生任何刺激作用,由于此特点,所以壳聚糖碘可以开发各种用于破损皮肤和黏膜的消毒产品。
最后,由于壳聚糖碘使用方便,刺激性小,具有缓释作用,所以还可以开发各种用于医疗器械及日常生活中的各种消毒(如餐具,生活用品等)。
参考文献
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