金黄色葡萄球菌与溶血素基因分布观察

金黄色葡萄球菌与溶血素基因分布观察

张笑稚

张笑稚

（商丘市睢阳区疾病预防控制中心河南商丘476100）

【摘要】目的探讨金黄色葡萄球菌中β-溶血素基因以及α-溶血素基因分布情况。方法分离生牛乳、人体化脓组织以及生鲜肉等5种不同来源的320株金黄色葡萄球菌作为研究对象，采用PCR技术对金黄色葡萄球菌中的溶血素基因分布情况进行分析。结果有312株金黄色葡萄球菌中被检出含有溶血素基因，总检出率达97.5%（321/320），其中β-溶血素基因检出率72.5%，α-溶血素基因检出率为94.2%。结论不同来源金黄色葡萄球菌溶血素检查几率不同，且针对β-溶血素基因以及α-溶血素基因的检查几率也不相同，说明金黄色葡萄球菌中溶血素分布会因来源的不同存在差异性。

【关键词】金黄色葡萄球菌溶血素基因分布观察

【中图分类号】R378【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）31-0077-02

金黄色葡萄球菌是致使人类食物中毒的一种常见病菌，同时其也会引起人或动物发生败血症、肺炎以及心包炎等疾病[1]。金黄色葡萄球菌通过产生多种致病因子而使动物或人类致病，据研究报道，在金黄色葡萄球菌中有4种不同类型的溶血素[2-3]。为了分析金黄色葡萄球菌中不同溶血素的的分布情况，本文选取5种不同来源的320株金黄色葡萄球菌作为研究对象，发现不同来源金黄色葡萄球菌溶血素检查几率不同，先阐述如下。

1材料与方法

1.1材料

从832份样品中分离出320株金黄色葡萄球菌作为研究对象，在这320株金黄色葡萄球菌中有果蔬10株、人化脓组织42株、速冻食品70株、水产品15株、生牛乳60株，肉质品100株以及豆制品23株。

1.2研究方法

1.2.1提取金黄色葡萄球菌中的DNA

①将1ml的菌悬液放置在1.5ml的离心管中，经5000r/min离心处理2min，将菌体收集；②将收集好的菌体用500μLTE做沉淀处理，之后加入50μL苯酚进行抽提，经1000r/min离心处理1min；③利用苯酚再抽提1次；④取上清液，加入500μL冰无水乙醇以及25μL的NaAc，经12000r/min离心处理5min；⑤做风干处理。

1.2.2PCR反应

在PCR反应体系中包括：dNTR0.5μL、水18.25μL、上游引物0.5μL、下游引物0.5μL以及DNA模板1μL等。

2结果

比较320株金黄色葡萄球菌的扩增结果发现，金黄色葡萄球溶血素基因中β-溶血素基因以及α-溶血素基因扩增带和设计的大小不符合，经测序结果证实是β-溶血素基因以及α-溶血素基因，由此可以说明采用PCR技术可以有效检测溶血素基因。

在PCR检测结果中，有5类来源不同的320株金黄色葡萄球菌，其中有321株中含β-溶血素基因或是α-溶血素基因，总检出率达97.5%（321/320），其中β-溶血素基因检出率72.5%，α-溶血素基因检出率为94.2%，具体统计结果如表1所示。

表1不同来源金黄色葡萄球菌菌株中溶血素基因检出率

3讨论

在不同来源的菌株中表现出的基因携带率不同。在320株金葡萄球菌中有71.25%的菌株中被查出同时含有α-溶血素基因以及β-溶血素基因，有23.25%的菌株中只查出含有α-溶血素基因，有1.67%的菌株中查出只含有β-溶血素基，有3.83%的菌株中均未检出α-溶血素基因以及β-溶血素基因。从总的分布规律中我们可以看出，α-溶血素基因以及β-溶血素基因同时检出的几率最高，这也可以说明有很大一部分金葡萄球菌中同时含有α-溶血素基因以及β-溶血素基因，同时两组之间具有协同作用[4]。

针对人化脓组织菌株而言，同时检出含有α-溶血素基因以及β-溶血素基因的菌株仅占38.32%，只检出含α-溶血素基因占57.64%，由此说明对人产生致病作用的溶血素基因主要是α-溶血素基因。其主要原因是因α-溶血素基因属于成孔蛋白，作用在活体组织中，而β-溶血素基因却受到相应的抑制[5]。由以上数据我们可以分析出，α-溶血素基因在人感染金葡萄球菌病例中具有非常重要的作用，这在一定程度上验证了刘瑞田的研究成果。

结语：

综上所述，不同来源金黄色葡萄球菌溶血素检查几率不同，且针对β-溶血素基因以及α-溶血素基因的检查几率也不相同，说明金黄色葡萄球菌中溶血素分布会因来源的不同存在差异性。

参考文献

[1]李冬野,崔玉东,侯喜林,等.金黄色葡萄球菌β-溶血素的原核表达及其溶血素活性检测[J].中国人兽共患病学报,2012,23(2):136-139.

[2]索玉娟,于宏伟,凌巍,等.食品中金黄色葡萄球菌污染状况研究[J].中国食品学报,2008,8(3):88-93.

[3]ElizabeteRodriguesdaSilva,JorgeUbirajaraDiasBoechat,JulianaCristinaDiasMartins，etal.Hemolysinproduc-tionbyStaphylococcusaureusspeciesisolatedfrommastiticgoatmilkinBraziliandairyherds[J].SmallRuminantRe-Search,2011,56:271-275.

[4]凌巍,于宏伟,李宁,等.金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)的分布研究[J].中国食品学报,2011,8（2):147-151.

[5]刘瑞田.金黄色葡萄球菌外毒素的研究进展[J].国外兽医学-畜禽疾病,2012,15(1):12-14.