临床细菌检验中PCR检验法的准确性分析

临床细菌检验中PCR检验法的准确性分析

侯红娟

（安岳县人民医院四川资阳642350）

摘要：目的分析临床细菌检验中PCR检验法的准确性。方法选取2015年1月至2017年6月期间我院妇科收治的84例阴道炎患者，所有患者均行PCR检验法和细菌培养法进行细菌检验，对比检查结果。结果PCR检验法其细菌阳性检出率明显高于细菌培养法，且加特纳菌与棒状杆菌检测准确率明显高于细菌培养法，数据对比有统计学意义（P＜0.05）；肠球菌检出率细菌培养法虽优于PCR检验法，但数据对比无统计学意义（P＞0.05）；患者对PCR检验法满意度明显优于细菌培养法，有统计学意义（P＜0.05）。结论临床细菌检验中PCR检验法准确性较高，可为临床医疗提供参考，值得推广应用。

关键词：临床细菌检验；PCR检验法；细菌培养法；准确性

[Abstract]Objective：ToanalyzetheaccuracyofPCRtestinclinicalbacterialtest.Method：FromJanuary2015toJune2017，84casesofvaginitisweretreatedinourhospital.AllpatientsweretestedbyPCRtestandbacterialculture，andtheresultswerecompared.Result：PCRtestthebacterialpositiveratewassignificantlyhigherthanthatofbacterialculturemethod，andthedetectionofGardnerellavaginalisandCorynebacteriumaccurateratewassignificantlyhigherthanthatofbacterialculturemethod，datacomparisonwasstatisticallysignificant（P<0.05）；thedetectionrateofEnterococcusbacteriaculturemethodisbetterthanthePCRtest，butnosignificantdatacomparison（P>0.05）；patientsatisfactionwithPCRtestmethodisobviouslybetterthanthatofbacterialculturemethodwasstatisticallysignificant（P<0.05）.Conclusion：TheaccuracyofPCRtestinclinicalbacterialtestishigh，whichcanprovidereferenceforclinicalmedicaltreatment，anditisworthpopularizing.

[Keywords]Clinicalbacterialtest；PCRtest；bacterialculture；accuracy

阴道炎（vaginitis）指阴道黏膜和黏膜下结缔组织炎症，作为妇科门诊常见疾病，各年龄段均可发病，患者多伴有外阴瘙痒、灼痛、异常流液、尿频等症状，临床以细菌性阴道病、滴虫性阴道炎、阴道假丝酵母菌病及萎缩性阴道炎为主，如何有效诊断病菌以便医者开展针对性治疗成为当前民众关注的焦点[1]。细菌培养作为人工细菌繁殖技术是阴道炎常用诊断方法，但因该方法耗时长且检出率低，常引发医患冲突，为了提高检测准确率，以便及早确诊病情，当下医者推出PCR检验法[2]。本文旨在分析临床细菌检验中PCR检验法的准确性，现研究资料如下。

1资料与方法

1.1临床资料

从2015年1月至2017年6月我院妇科就诊的阴道炎患者中选取84例作为研究对象，所有入选患者均同意行PCR检验法和细菌培养法，且签署知情同意书，患者均符合阴道炎临床诊断标准[3]。本次研究患者年龄28-47岁，平均（32.45±3.74）岁；病程4-42个月，平均（24.12±3.56）个月；其中大专及以上学历41例、高中文化程度26例、初中文化程度14例、小学及以下文化程度3例；患者均伴有不同程度外阴瘙痒、灼痛、白带异常等症状。经免疫学检验确诊：加特纳菌32例、棒状杆菌30例、肠球菌22例。排除精神交流障碍及无法自行完成调查问卷者。

1.2研究方法

所有入选对象均行PCR检验法和细菌培养法检测，应用无菌棉签取采取阴道后穹窿部分泌物，告知患者采集前24h内禁性交、阴道灌洗及局部用药，严格检查医用器具，无菌操作，所取阴道分泌物放置生理盐水中贮存，进行后续细菌检验，具体方法如下。

1.2.1PCR检验法

将提取物混合液于1200r/min转速条件下离心分离15min，去除上清液沉淀后加入裂解液，于水浴锅加热至60℃，水浴时间为2min，以1200r/min条件再次行离心分离，选取清液制作模板，置入荧光PCR仪器中进行循环，应用检测仪进行检测。

1.2.2细菌培养法

取混合液于二氧化碳恒温箱内培养2d，待长出菌落后选取半透明样光滑、水滴状细菌应用微生物细菌鉴定仪进行生化检验。所有检验工作均由2-3名专业检验师严格操作，确保检验结果科学性和严谨性。

1.3观察指标

比较PCR检验法和细菌培养法在临床细菌检验中的阳性检出率及加特纳菌、棒状杆菌与肠球菌的检出率。检验结束后就患者对检验方法满意与否开展问卷调查，（91-100）分即非常满意、（76-90）分满意、（61-75）分一般满意、（0-60）分不满意，满意度=非常满意+满意+一般满意。

1.4统计学处理

本文涉及所有数据均使用统计学软件SPSS20.0进行处理，用（x±s）、（％）表示计量和计数资料，用t和2对数据进行检验，分析组间差异，若P＜0.05，即有统计学意义。

2结果

2.1两种检验方法其检验结果比较

84例患者选用PCR检验法其阳性检出率为83.33%（70/84）高于细菌培养法59.52%（50/84），差异有统计学意义（P＜0.05），且加特纳菌、棒状杆菌与肠球菌检出率有所差异，详细数据见表1。

3讨论

阴道炎即阴道炎症，是引发外阴及阴道瘙痒、刺痛、白带增多的一组病症，作为常见妇科病，常因治疗方法不当、擅自停药及再次感染导致病情反复，多数病患伴有白带有血丝或带脓问题，易加重其精神压力，影响生活质量。健康妇女因阴道组织结构的特点可自行抵御病原体，抑制病菌繁衍，但当阴道抵御能力受损时病原菌侵袭会破坏阴道与菌落平衡环境，引发阴道炎症，给其生活带来诸多不便[4]。临床研究表明，以细菌性阴道病、念珠菌阴道炎和滴虫性阴道炎为主，多数患者无明显症状，致使确诊时病情较为严重，增加治疗难度[5]。

近年来，随着生活节奏加快，我国女性阴道炎患病率逐年递增，细菌感染是引发阴道炎的首要原因，常规妇科检查可初步筛选可能性疾病，为进一步确诊疾病，以往医者多选择阴道分泌物培养的方法进行诊断，如细菌性阴道炎患者其阴道分泌物多呈牛奶样均质、有异味，胺试验和线索细胞呈阳性（＞20%）、pH值＞4.5；念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物中可见白假丝酵母菌的芽生孢子或假菌丝、pH值为4.5时可确诊为混合感染；滴虫性阴道炎可于阴道分泌物中找到滴虫，其悬滴法确诊率为80-90%，培养法准确率达98%；老年性阴道炎确诊时需排除其他病变；而幼女性阴道炎检查时应询问患儿母亲有无病史，结合症状和查体检查确珍。

阴道炎常见致病菌以加特纳菌、棒状杆菌及肠球菌为主，医者可根据细菌营养需求选择适宜原料制作培养基，调整pH值和温度，促进细菌短期内快速生长，以帮助医者鉴定细菌种类，为后续医疗工作提供参考，在实际操作时医者必须严格按规定无菌操作，禁止在实验室饮食，佩戴手套禁止用手抚摸面部或头部，以免发生感染，一旦出现培养物破损传染物外泄问题及时处理，以减少污染。但在实际操作时该方法耗时较长且随着抗生素的广泛使用，多数患者在检查前因使用抗生素致使样本中因含有抗生素使病菌处于抑制状态，降低细菌阳性检出率，因此应改进细菌培养方法，组建专业检验团队，设置专业微生物实验室，简化工作环节，优化工作内容，定期组织工作人员进行专业培训和素质教育，提高工作效率和工作质量，以便更好的帮助患者确诊病菌，开展临床医疗[6]。PCR检验法作为近几年新兴细菌检验方法，是荧光定量PCR的演变，该试验方法较为灵敏且融合了DNA特异性，有效的提高了阴道细菌阳性诊断率，当前被广泛应用于阴道细菌临床诊断中，该检查方法操作简便且对设备要求不高，整个检验过程均为无菌条件下进行，可避免细菌感染，提高细菌检验的安全性[7]。本文旨在分析临床细菌检验中PCR检验法的准确性，结果显示：PCR检验法阴道细菌阳性检出率明显高于常规细菌培养法，数据差异有统计学意义（P＜0.05）；且PCR检验法在检验加特纳菌与棒状杆菌中其检出率明显优于细菌培养法，差异有统计学意义（P＜0.05），检验肠球菌其检出率虽低于细菌培养法，但组间差异无统计学意义（P＞0.05），患者对PCR检验法满意度明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），即医者检验阴道炎时可应用PCR检验法其阳性检出率较高，医者可综合患者临床症状确诊病情，为后续医疗提供参考。科学把控各类阴道病其临床症状结合检验结果进行确诊，如细菌性阴道病，患者阴道分泌物多呈牛奶样，有腥臭味，pH值大于4.5，胺试验显阳性，10-40%的患者无明显症状，少数患者会出现分泌物异常且性交后加重症状，检查时患者阴道黏膜多无炎性反应；念珠菌性阴道炎患者多伴有阴道炎症状（尿频、尿急、红斑、水肿），分泌物中可找到假菌丝；而滴虫性阴道炎可在分泌物中找到滴虫，常用悬滴法和培养法，但在实际检验时需注意采样前24-48h内禁止灌洗或局部用药，标本制作后注意保暖及时送检，以保证检验的准确性，该类患者其分泌物多呈稀薄脓性、泡沫状，阴道口与外阴有瘙痒感，偶有血尿症状[8-9]。加特纳菌又名阴道嗜血杆菌，该细菌与非特异性阴道炎有关，可引发多种妇科并发症，在实际临床检验时应结合实验室其他指标，以提高疾病诊断准确率，便于医者有针对性的进行医治，提高治疗效果。棒状杆菌属革兰氏染色阳性杆菌，多形态且排序不规则，可引发局部炎症，医者应准确把握该病菌检验表现，准确判断病菌；PCR检验法在肠球菌检验中其检出率低于细菌培养法，作为革兰阳性（G+）球菌，多分布于自然环境及人和动物消化道内，常引发尿路感染与皮肤软组织感染，医者应根据该病菌原理优化检验方法，提高检出率，以便最大程度发挥PCR检验的价值。

总之，临床细菌检验中PCR检验法的准确性较高且经济安全，可在临床推广应用。

参考文献

[1]黄绰妤，胡记妹，陆婉维，等.PCR检查法与细菌培养法在临床中的用于阴道细菌检查的检验分析[J].医学信息，2015，28（13）：284-285.

[2]王传海.临床细菌检验中PCR检验法的准确性分析[J].中国卫生标准管理，2016，7（6）：150-152.

[3]王冬梅.PCR检验法在细菌检验中的临床效果分析[J].中国现代药物应用，2016，10（13）：40-41.

[4]许丽霞，黄剑芳，刘集鸿.细菌培养与聚合酶链反应（PCR）检测在细菌性痢疾检测中的应用分析[J].检验医学与临床，2014，11（12）：1676-1677.

[5]邱可清，沈学群，高丽华，等.分析阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值[J].中国现代药物应用，2015，9（12）：74-75.

[6]常新剑，裴秋玲.浅析PCR检验法在阴道炎患者细菌检验中的应用效果[J].当代医药论丛，2015，13（19）：44-45.

[7]潘克女，张永乐，徐爱芳，等.实时荧光PCR方法分型检测细菌16SrRNA基因的临床应用[J].中国卫生检验杂志，2016，26（5）：673-675.

[8]阎峻，张艳红，高媛，等.PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的对比研究[J].中国生化药物杂志，2017（7）：43-44.

[9]景晓敏.PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的对比研究[J].医药论坛杂志，2014，9（10）：84-85.