洛丽高丽娜(辽宁省鞍山市食品药品检验所114006)
【摘要】高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液C组分中各种因素的影响,如色谱柱、流动相配比。在上述研究基础上建立了以甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相系统,在16min内即可完成样品分析,且C1峰与相邻杂质峰获得了良好分离。
【关键词】高效液相色谱硫酸庆大霉素甲酸
【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2014)06-0281-01
【Abstract】theHPLCmethodfortheanalysisofCofgentamycinsulfateinjectioncomponentsofvariousfactors,suchasthechromatographiccolumn,mobilephase.Onthebasisoftheabovestudyestablishedmethanol:water:formicacid(70:25:5)asthemobilephasesystem,canbecompletedin16minsampleanalysis,andtheC1betweenpeaksobtainedgoodseparation.
【Keywords】HPLCgentamycinsulfateacid
硫酸庆大霉素是多组份的氨基糖甙类抗生素,4个主要成份为C1、C1a、C2a和C2,1]。采用高效液相色谱法测定硫酸庆大霉素注射液C组份,其难度在于C1峰与其大量其它杂质峰重叠,影响了组份测定的准确性。本文通过分析各国药典现行硫酸庆大霉素C组份的高效液相色谱法,考察了不同型号的色谱柱,流动相醇水比例,用甲酸代替冰醋酸及不同的前处理方法对硫酸庆大霉素C组份保留行为的影响,建立了甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相系统成功地测定了硫酸庆大霉素注射液C组份,使C1峰与杂质峰分离良好。本法适用于硫酸庆大霉素注射液的质量控制,并为庆大霉素产品质量的改进,提供了依据。
1、实验方法
1.1药品与试剂
硫酸庆大霉素标准品(中国药品生物制品检定所),硫酸庆大霉素(东北制药总厂),硫酸庆大霉素注射液(市售),硫乙醇酸、异丙醇、冰醋酸、甲酸、甲醇均为色谱纯。
1.2高效液相系统
Waters2695型高效液相色谱仪,紫外检测器,色谱柱:WatersC18(250mm×4.6mm),流速:1.0ml/min,波长:330nm,进样量:10ul。
1.3方法
以甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相,经色谱分离,采用归一化法计算各组份的百分数。
2、结果与讨论
2.1不同色谱柱的影响
以流动相甲醇:水:甲酸(70:25:5),流速1.0ml/min,测定3种不同厂家的色谱柱对硫酸庆大霉素C组份保留行为的影响。色谱柱对庆大霉素C组份的分离效果相当,但保留时间以Waters柱最合适。可见,采用Waters较为理想。
2.2流动相中醇水比例的影响
硫酸庆大霉素C组份对流动相中醇水比例十分敏感,甲醇浓度减少可使C1峰与相邻峰较好分离,但分离时间长。随着甲醇浓度的增大,分析周期缩短,但C1峰与相邻峰重叠,相对保留时间以甲醇:水:甲酸(70:25:5)为最佳[2],分析周期恰当。
2.3流动相中冰醋酸的影响
从流动相中甲醇比例降低有利于C1峰与相邻峰分离得到启发,将冰醋酸改为甲酸以增加流动相极性,达到了预期的分离效果。在甲醇:水比例不变的前提下,将冰醋酸改为甲酸,C1峰与相邻峰能完全分开,且重现性好,结果更为准确。
3、小结
甲醇:水:甲酸(70:25:5)为流动相系统,对硫酸庆大霉素注射液样品中C组份相对比率的测定,即可C1峰与其相邻峰分开,又可使分析时间适宜,16min内即可完成样品分析,且重现性好,结果准确可靠,为硫酸庆大霉素注射液质量控制及质量标准的改进,提供了新的依据。
参考文献
[1]胡昌勤等:高效液相色谱流动相对庆大霉素C组份保留行为的影响中国抗生素杂志1994:19(1):21~24
[2]中国药典HPLC分析庆大霉素组分条件的系统研究1995;二部:905