快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用

快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用

罗超群

罗超群

湖南省邵阳市中医医院制剂室422000

摘要：目的：探讨快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用价值。方法：研究组选取快速高效液相色谱分离技术（UPLC）分析仙灵脾、冬虫草，而对照组则选取高效液相色谱分离技术（HPLC）分析仙灵脾、冬虫草，对两组的检测结果进行分析比较。结果：研究组两种药材分离速度及峰容量明显高于对照组，分离时间、LOQ（定量限）显著低于对照组，组间比较差异具有统计学意义（P<0.01）。结论：在中药分析中选择快速高效液相色谱分离技术方案具有更显著的检测效果，分析时间明显缩短，灵敏度提高，值得临床推广及应用。

关键词：快速，高效液相色谱，分离技术，中药分析

中医药亦称汉族医药，是一笔宝贵的民族财富，对民族发展有着十分重要的作用。近些年来，在医疗保健中人们越来越关注传统中医药[1]。中药治疗疾病的根本载体为其化学成分群，故药物阐明与质量监控的重点是分析中药化学成分，不过因其化学成分十分复杂，分析药物成分存在难以分离、灵敏地低等难点，一直是学者研究的重难点。传统的高效液相色谱分离的不是特别彻底，且分析时间较长，效果不佳。近些年，伴随UPLC技术的不断发展，分析中药结果质量大大改善，弥补了HPLC的不足之处[2]。我院现探讨快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用价值，现总结报道如下。

1资料与方法

1．1一般资料

选择颗粒状的仙灵脾、冬虫草两种中药各100g，选取中药材前均要行灭菌操作，防止污染其他物质，影响分析结果。

1．2方法

UPLC与HPLC均产自德国西门子公司。操作前先培训技术员，规范操作，保证其熟练仪器操作性能与色谱柱，严格遵守说明书操作。使用色谱柱之前，要先测试柱的性能，并保存好结果，作为今后评价柱性能变化的参考。柱性能会因使用的流动相、样品、柱温等差异而有所不同。色谱仪关机顺序：清洗液路时直接将检测器关机，清洗结束后先按STOP让泵停止后在关电源不允许直接关机。

1．3统计学处理

数据均通过SPSS19.0软件处理，计量资料用t检验，计数资料用卡方检验，当P<0.05时表示数据间比较差异具有统计学意义。

2结果

2．1两组药材分析结果的比较

研究组两组药材分离速度、分离时间、LOQ（定量限）及峰容量等均明显优于对照组，差异具有统计学意义（P<0.01）。具体数据见表1、表2。

表1仙灵脾分析结果的比较

3讨论

中药是在中医学理论指导下预防、诊断、治疗或调节人体机能的药物[3]。目前，随着“回归自然”观念的影响，越来越多的声音呼唤天然药物防治疾病，其中中药材资源丰富，疗效显著，而且不良反应少等优势逐渐在临床得到广泛应用[4-5]。不过现阶段我国中药制剂还难以打入国际主流市场，竞争力不足，主要原因是我国缺乏被世界认可的客观标准。要想中药材能够成功跻身国际市场，应着重研究如何提高中药材质量，选择现代化高科技研究质量标准。因此选择一种高效的质量检测分析方案显得尤为重要[6]。

高效液相色谱是在经典色谱和气相色谱基础上发展而来的，主要包括高压液相色谱、高温液相色谱及基于整体柱高效液相色谱等几种。高效液相色谱法是一种非常重要的分离分析方法[7]，又称近代柱色谱法，在测定药物标准含量中得到广泛应用，不过在响应值较低的峰检测中高效液相色谱法是无法检测出来的[8]，灵敏度非常低，应用受到限制。不过，随着科学技术的飞速进步，一种新的分离技术弥补了HPLC的不足，即快速高效液相色谱分离技术。其基本理论认为色谱柱效能的提高便可以改善仪器解析度。相比较于传统的HPLC而言，UPLC具备以下几点优势：分离度更高，UPLC固定相粒度可以高达1.7um，效能大大提高，分离的更加彻底；速度也更快，UPLC单位时间内提供的信息量更多，解析度不变条件下，小粒度提供的分析速度也更快，明显减少柱长；另外灵敏度要更高，UPLC可以显著增强柱效，峰宽变窄，提升峰高，而且UPLC所用柱子要短一些，从而进一步使峰高增加，灵敏度可以明显提高两到三倍。一般情况下分析中药多种成分，因含比较多的化合物种类，数目也难以确定，因此含量差异也就更大。利用UPLC分析中药，无疑是为中医药现代化发展提供了一条更高效的药物分析道路。本研究结果发现：研究组两种药材分离速度、分离时间、LOQ（定量限）及峰容量等均明显优于对照组，比较差异具有统计学意义。UPLC体积不大，受外界因素干扰不会太明显，而且溶剂消耗较少，药物消耗减少。可以在短时间内分析鉴定一些比较复杂的化学成分，更加准确定量定性鉴定中药药物合成。

由此可知，快速高效液相色谱法分离技术分析中药是一种比较理想的手段，能够明显提高分离速度及灵敏度，大大缩短分析时间。目前还在快速发展期，虽然还处在一些不足之处，但是伴随色谱技术与仪器的逐渐发展，相信一定会越来越完善，有利于在中药研究中发挥更重要的作用，其必将在中药研究中发挥重要的作用，为中药的现代化、国际化提供必要的技术支撑。

参考文献：

[1]张仲源，连佳.中药促进透皮吸收剂薄荷醇的多效性[J].中医外治杂志，2013，22（05）：54-56.

[2]刘颖，周建良.液相色谱分离技术的小型评价装置及其应用[J].化学工业与工程技术，2009，27（05）：682-689.

[3]刘艳芳，刘艳明，董军，李伟，王超然，张秀莉，梁鑫淼．中药物质基础的高效液相色谱分离分析方法研究[J]．中国科学，2009，16（15）：233-234.

[4]张守军.快速高效液相色谱分离技术在中药分析中的应用分析[J].2013，（20）：44-45.

[5]汪建龙.高效液相色谱法在中药分析中的应用进展[J].现代中西医结合，2011，20（16）：2072-2074.

[6]HanTing，ZhangQiao-Yan，ZhangHong.AuthenticationandquantitativeanalysisonthechemicalprofileofXanthiumfruit（Cang-Er-Zi）byhighperformanceliquidchromatographydiodearraydetectiontandemmassspectrometrymethod[J].AnalyticaChimicaActa，2009，（02）：272-273.

[7]王耀鹏，顾志荣，王亚丽.近红外光谱快速定量技术在中药分析中的最新应用进展[J].甘肃中医学院，2015，21（9）：223-226.

[8]张伟，邸丹丹.在中药分析中快速高效液相色谱分离技术的应用[J].健康必读，2013，12（5）：89-90.