大兴安岭农场管理局检测中心内蒙古呼伦贝尔165471
摘要:通过不同体积吸收液对大豆中粗蛋白进行测定,分别用25毫升硼酸吸收液和5毫升硼酸吸收液进行吸收,并对结果进行分析,结果表明:硼酸吸收液采用5毫升的体积来测定大豆粗蛋白,不但不影响检测结果,还可以降低实验成本,减少环境污染。
关键词:吸收液粗蛋白凯氏定氮法不同体积改进
Abstract:thecrudeproteininsoybeanwasdeterminedbydifferentvolumesofabsorbent,25mLofboricacidabsorbentand5mlofboricacidabsorbentwereusedtoabsorbthecrudeprotein,andtheresultswereanalyzed.Theresultsshowedthattheboricacidabsorbentused5mlofvolumetodeterminethecrudeproteininsoybean.Notonlydoesitnotaffectthetestresults,itcanalsoreducetheexperimentalcostandreduceenvironmentalpollution.
Keywords:differentvolumeimprovementofabsorptionfluidcrudeproteinkaijinitrogenmethod
按照国标方法GB/T14489.2-2008《粮油检验植物油料粗蛋白质的测定》,硼酸吸收液的体积是25mL,蒸馏液体积达到100mL为宜,不单到滴定时摇晃不方便,而且试剂量较大,成本高。而本方法采用吸收液为5mL,不仅滴定时摇晃方便,还能不影响测定结果,节约实验成本。
1实验检测
1.1仪器
KDN-08B型定氮仪(上海昕瑞仪器仪表有限公司),KDN-08型八孔消化炉(上海昕瑞仪器仪表有限公司),高速万能粉碎机,电子天平
1.2试剂
所用试剂其纯度无特殊说明均为分析纯,所用的水是蒸馏水。
硫酸:18moL/L(优级纯)
催化剂:0.4g硫酸铜(CuSO4•5H2O),6g硫酸钾(K2SO4),磨碎混匀。
硼酸溶液:c(H3BO3)=20g/L,20g硼酸加水溶解并定容至1000mL。
氢氧化钠溶液:c(NaOH)=400g/L,400g氢氧化钠加水溶解并定容至1000mL。
盐酸标准溶液:c(HCI)=0.1moL/L,盐酸标准溶液配置和标定按GB/T601执行。
甲基红-溴甲酚绿指示剂:0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红于玛瑙研钵中,加入少量95%乙醇,研磨至指示剂溶解后,加95%乙醇至100mL。
1.3检测原理
试样在催化剂的作用下,用硫酸破坏有机物,使含氮物转化成硫酸铵,加入强碱进行蒸馏,使氨逸出,用硼酸吸收后再用盐酸滴定,测出氮含量。将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。
消化反应式为:
2NH2(CH2)COOH+13H2SO4=(NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O(1)
蒸馏反应式为:
(NH4)2SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4(2)
吸收反应式:
2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O(3)
滴定反应式:
(NH4)2B4O7+5H2O+2HCI=2NH4CI+4H3BO3(4)
计算公式:
式中:X-样品粗蛋白质含量(%)
V1-滴定试样时消耗盐酸标准溶液体积(mL)
V2-滴定空白时消耗盐酸标准溶液体积(mL)
C-盐酸标准滴定溶液浓度(moL/mL)
m-样品的质量(g)
0.0140-每毫克当量氮的克数
6.25-氮换算成蛋白质的平均系数
1.4检测步骤
1.4.1试样的消煮
准确称取粉碎均匀的试样0.5g(准确至0.0002g),放入消煮管中,加入6.4g混合催化剂,12mL硫酸,淤420℃下的消煮炉上消化至消化液呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,至少0.5h-1h,取出冷却后加入30mL蒸馏水。
1.4.2蒸馏
采用半自动定氮仪,将待消化液的管子插在蒸馏装置上,用硼酸吸收液加入3滴混合指示剂。冷凝管末端要浸入吸收液,然后向消煮管中加入50mL氢氧化钠溶液进行蒸馏,蒸馏时间分别以吸收液达到一定体积为宜。
1.4.3滴定
用盐酸标准溶液滴定馏出液,由蓝绿色至刚变为红紫色。
2实验结果分析
硼酸采用不同体积对同一样品(大豆)中的粗蛋白测定,25mL吸收液蒸馏时间以体积达到100mL为宜,5mL吸收液蒸馏时间以体积达到50mL为宜,通过检测结果对比分析,结果如下各表:
从以上数据可以看出,两组数据均符合测氮的要求,但第二组所用吸收液体积小,节约了实验成本,也降低了环境污染,因此吸收液体积采用5mL更适合粗蛋白的测定。
3结论
不同体积的检测数据对比分析可以看出:硼酸吸收液的体积对测定结果的影响不大,完全可以采用5mL硼酸吸收液来测定粗蛋白含量,不仅测定结果符合要求,还能降低试验成本,减少污染。
参考文献
[1]GB/T14489.2-2008,粮油检验植物油料粗蛋白质的测定
[2]彭展英,吸收液在凯氏定氮法中的应用研究化工时刊第27卷第10期
[3]GB/T6432-1994,饲料中粗蛋白测定方法
[4]鲍士旦,《土壤农化分析(2000)》
[5]GB/T5511-1985,粮食油料粗蛋白测定方法