肝素治疗对重度子痫前期孕妇胎盘中白细胞介素10含量的影响观察

肝素治疗对重度子痫前期孕妇胎盘中白细胞介素10含量的影响观察

穆凤娟赵新然孙敬之张红霞

穆凤娟赵新然孙敬之张红霞

（沧州中西医结合医院东院区妇产科河北沧州061000）

【摘要】目的：观察小剂量肝素对重度子痫前期孕妇胎盘中白细胞介素10（IL-10）的阳性细胞数的影响，探讨肝素治疗重度子痫前期的抗炎机制。方法：重度子痫前期孕妇180例分为治疗组90例和治疗对照组90例，治疗组连续7d每日静脉滴注25%硫酸镁60mL+肝素25mg；治疗对照组连续7d每日静脉滴注25%硫酸镁60mL，另选择同期正常晚期妊娠孕妇90例作为正常对照组。胎盘正常娩出后，采用免疫组织化学法检测各组孕妇胎盘中IL-10的阳性细胞数。结果：正常组、治疗组、治疗对照组胎盘中IL-10阳性细胞数分别为（26.5±5.2）、（16.1±3.7）、（6.2±2.3）个mm-2。治疗组、治疗对照组胎盘中IL-10阳性细胞数与正常组比较明显降低，差异有统计学意义（P<0.01)；而治疗组胎盘中IL-10阳性细胞数明显高于治疗对照组，差异有统计学意义（P<0.01)。结论：IL-10作为抑炎细胞因子在重度子痫前期的发病中起一定作用，肝素可通过抗炎机制减少重度子痫前期孕妇胎盘中白细胞介素10的消耗。

【关键词】肝素白细胞介素10重度子痫前期

【中图分类号】R45【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）03-0013-02

妊娠期高血压疾病（hypertensivedisordercomplicatingpregnancy，HDCP）的重度子痫前期是导致围产期母儿严重并发症和死亡率增高的重要原因。目前肝素用于治疗重度子痫前期的机制研究均为抗凝机制，其对重度子痫前期孕妇胎盘白细胞介素10（IL-10）细胞因子的影响尚无报导。本研究通过观察肝素对重度子痫前期孕妇治疗后胎盘白细胞介素10（Interleukin-10，IL-10）的阳性细胞数的影响，探讨肝素治疗重度子痫前期的抗炎机制及重度子痫前期的发病机制，为更好地指导临床治疗提供实验依据。

1资料与方法

1.1一般资料

2009年10月至2013年02月沧州中西医结合医院东院区妇产科住院并确诊为重度子痫前期孕妇180例，均符合《妇产科学》第6版诊断标准参照[1]，除外临产、胎膜早破、感染、恶性肿瘤，无糖尿病和原发肾脏疾病、原发高血压及凝血功能障碍性疾病，未使用对凝血功能有影响的其他药物，近1个月内未使用抗生素及免疫抑制剂等对炎症因子有影响的药物。分为2组：治疗组(硫酸镁+肝素）90例，年龄19～36岁，平均年龄（25.6±2.5岁），孕周31～36周，平均孕周（33.3±1.8）周；治疗对照组（单纯硫酸镁）90例，年龄20～35岁，平均年龄（25.1±2.8）岁，孕周32～35周，平均孕周（34.2±1.4周）。随机选择同期正常晚期妊娠孕妇90例作为正常组，年龄20～35岁，平均年龄（25.8±2.2）岁，孕周30～37周，平均孕周（34.4±2.1）周。3组年龄、孕周、孕次比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2治疗方法

治疗组静脉滴注5%葡萄糖溶液1000mL+25%硫酸镁60mL+肝素钠25mg，每日1次，维持静脉滴注6～8h；治疗对照组静脉滴注5%葡萄糖溶液l000mL+25%硫酸镁60mL，每日1次，维持静脉滴注6～8h。2组方案均可视病情加服心痛定10mg，每8h1次。2组均7d为1疗程。

1.3监测指标及标本采集与处理

胎盘正常娩出后，无菌操作取产后胎盘组织,经液氮冷冻后,转移-70℃待用。冷冻切片厚度为10μm,将切好的胎盘组织片放在预先使用多聚赖氨酸处理的载玻片上,放置于-70℃备用。取各组组织切片,用免疫组织化学的方法对IL-10的阳性细胞数进行检测。将冷冻组织切片放入冷丙酮中固定，逐次3g?L-1H2O2甲醇溶液去除内源性过氧化物酶，1g?L-1TritonX-100溶液通透细胞和山羊血清封闭，在胎盘组织切片上滴加兔抗人IL-10(1:150倍稀释)，放入湿盒中4℃过夜。洗掉一抗后分别滴加生物素化山羊抗兔IgG/HRP二抗，室温作用2h后，即用二氨基联苯胺（DAB）显色，苏木素复染。每一步骤均用磷酸盐缓冲液(PBS)洗3次，每次5min。复染后的组织片经酒精脱水，二甲苯脱酒精后，封片镜检。如细胞具有完整细胞结构，胞浆被染成棕褐色，而胞核可见为蓝色，为阳性细胞；如细胞具有完整细胞结构，胞核被染成蓝色，胞浆未被染成棕褐色，在胞核的映衬下显示为浅蓝色为阴性细胞。免疫组织化学图片用数码扫描分析系统显微镜和北航彩色病理图像分析系统，对检测的胎盘组织切片中单位面积阳性细胞数进行计算。

1.4统计学处理

采用SPSS18.0统计软件包进行数据处理。用Student’s-test分析2组之间单位面积胎盘组织中阳性细胞数的差异（T检验,95%可信区间）,P＜0.05存在显著性差异，P＜0.01存在极显著性差异。

2结果

正常组、治疗组、治疗对照组胎盘中IL-10阳性细胞数分别为（26.5±5.2）、(16.1±3.7）、(6.2±2.3）个?mm-2。

治疗组、治疗对照组胎盘中IL-10阳性细胞数与正常组比较明显降低，差异有统计学意义（P<0.01)；而治疗组胎盘中IL-10阳性细胞数明显高于治疗对照组，差异有统计学意义（P<0.01)。

3讨论

HDCP一直是危害母婴健康的重要疾病，而重度子痫前期更是导致孕产妇及胎儿死亡的主要原因。近年来有研究表明，内皮细胞损伤是妊娠期高血压疾病发生的重要环节，而内皮细胞激活是导致内皮细胞损伤的直接原因[2]。本研究观察到重度子痫前期孕妇胎盘中IL-10在治疗组和治疗对照组的表达均明显低于正常妊娠孕妇，与之前学者报道[3]发现在先兆子痫妇女中血清及胎盘匀浆中IL-10含量高于正常妊娠孕妇结果相符合。

IL-10是近年来发现的具有多种生物学活性的抑制性淋巴因子，是一种在母胎界面主要存在的免疫细胞因子，可以通过调节滋养细胞浸润、抑制滋养细胞的凋亡和细胞毒性因子的生成来促进生理性血管重铸成、胎盘的形态形成和成熟、及绒毛血管的发生和血管网的建立[4-5]。胎盘部位IL-10的生物学作用是发挥抗炎症和调节母体免疫应答的功能，从而在妊娠的胚胎植入、免疫维持及分娩方面起着重要作用。

Rein[6]等体外培养胎盘滋养细胞48小时，发现先兆子痫患者中IL-10的生成量在妊娠晚期明显下降，认为IL-10的下降与先兆子痫中胎盘浸润不足有关。体外培养足月胎盘绒毛滋养层细胞发现：促炎症细胞因子可以通过PG合成和代谢的途径影响PG的生成，这种作用可以被抗炎症细胞因子，如IL-10所中和。IL-10含量的降低与先兆子痫妇女中TNF-a含量增高所引起的机体免疫应答，以维持体内Th1/Th2因子平衡和实验方法有关，同时也说明了妊高征妇女存在的胎盘缺氧和血管内皮损害与体内细胞因子的含量有关。

肝素是一种直链黏多糖，目前已知肝素可通过多种机制或途径起到抗炎作用[7]，并对炎症级联反应中的多种炎症介质有抑制作用。近年就肝素抗凝机制治疗重度子痫前期孕妇的疗效观察报道很多，认为肝素有助于改善重度子痫前期孕妇的治疗效果，且对母儿安全[8]。本研究治疗组在重度子痫前期孕妇传统硫酸镁解痉治疗基础上加用小剂量肝素，胎盘中IL-10的表达较治疗对照组显著升高，提示肝素不但改善妊娠期高血压疾病的凝血功能，而且还可通过其抗炎机制降低TNF-α的含量，抑制炎症反应从而减少了IL-10的消耗，达到治疗妊娠期高血压疾病的目的，为探讨妊娠期高血压疾病更理想的治疗方法提供了理论基础。

参考文献

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[8]徐永萍，刘立新，潘因，等.低分子肝素治疗重度子痫前期患者效果的研究[J].现代妇产科进展，2006，15（1）：54-56.