探讨抗-HIV检测质量控制

探讨抗-HIV检测质量控制

王玲华王霞

宁夏石嘴山市第二人民医院检验科753000

【摘要】目的探讨HIV抗体初筛实验获得准确检测结果的方法。方法实验前、实验中、实验后的数据进行质量控制。结论HIV抗体的检测在做好质量控制的前提下能提高检验结果的准确性，减少误差。

【关键词】HIV抗体；初筛试验；质量控制

HIV抗体检测是了解人类免疫缺陷病毒（HIV）感染情况的有效途径，及时发现传染源才能更有效地控制艾滋病传播。要想获得满意的HIV抗体初筛实验结果，实验室质量控制尤其重要。作为艾滋病抗体初筛实验室我们做了以下几方面的工作，能够得到较为准确的初筛实验结果。

1.资料与方法

1.1标本来源：2013年9月-2015年9月前来医院就诊的门诊、住院需要手术的术前检查病人及血站献血员共5600例。

1.2试剂来源

1.2.1人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体诊断试剂盒（酶联免疫双抗原夹心法）。基因工程抗原gp41和gp36包被酶联板，用基因工程HIV-1和HIV-2嵌合抗原ENV18标记辣根过氧化物酶，以及其它试剂组成的试剂盒，采用双抗原夹心法检测人血清中的人类免疫缺陷病毒抗体。由北京金豪制药有限公司提供。

1.2.2人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（双抗原夹心酶联免疫法）。用多种HIV-1和HIV-2的特异性抗原制作预包被板及酶结合物用双抗原夹心酶法检测人血清中的（HIV1/2）型抗体。由科华科技有限公司提供。

1.3检测方法：严格按照试剂说明书规范操作，并注意以下问题：

1.3.1检验技术人员均接受过专门的技术培训并获合格证书。

1.3.2标本放置离心机3500rpm/min离心15min，取上清液相应量加样，要注意经低温冰箱贮存的标本融化后混匀。

1.3.3使用标准过的加样器，配套吸嘴与一次性使用。

1.3.4洗板前观察洗板机注水针是否通畅通畅，洗板后用蒸馏水反复冲洗几遍后备用，将板拍干后添加试剂。

1.3.5酶标仪测定光密度值前确认孔内无气泡。

1.3.6实验过程中使用内部和外部对照质控血清。内部对照质控血清是试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清；外部对照质控血清由实验室自行制备，一般是该试剂盒Cutoff值的2-3倍[1]。方法如下：收集HIV抗体阳性及阴性血清，北京金豪制药有限公司试剂盒（Cutoff值0.118）严格按照阳：阴为1：6比例进行稀释；科华科技有限公司试剂盒（Cutoff值0.110）按阳：阴为1：2比例进行稀释，上酶标仪比色吸光度值达到0.386、0.313，按一周的实验用量分装、封口，-20℃保存（冰冻血清不能反复冻融，融化后放置在2-8℃冰箱内保存，一周内使用）。

1.3.7建立标准操作文件（SOP）：内容包括详细的操作程序，如实验条件（温度等）仪器的使用和维护、质控品的使用，设备和试剂说明书作为附录[2]（SOP由岗位人员起草、实验室主任审定，每年至少修改一次）。

2.结果

HIV抗体检测除5596例阴性结果外，其余4例吸光度值见附表。

从附表可见，有四例首次检测抗HIV的吸光度值均大于Cutoff值，用金豪和科华两家试剂复检后，吸光度值均小于Cutoff值。另一例标本首次及复检后吸光度值均大于Cutoff值，报自治区疾病预防控制中心（CDC）做确证实验（反馈结果为阴性）。假阳性的百分率为0.018%（1/5596）.

3.讨论

艾滋病即获得性免疫缺陷综合症（AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的一种免疫缺陷性疾病，通过初筛实验室对人群中进行艾滋病抗体检查，检测出的阳性标本送上级CDC确认后发现传染源，并对这一人群进行建档管理，治疗，能有效的防止艾滋病的传播。

在5600例HIV抗体筛查实验过程中，我们共查出4例弱阳性标本，三例用二种试剂复查后吸光度值均低于Cutoff值直接报阴性，1例经复查后吸光度值仍高于Cutoff值，送检自治区CDC做确证实验，反馈回来结果是阴性，假阳性率为0.018%（1/5596），HIV抗体检测假阳性的百分比控制在最低水平，进而提高HIV抗体检测水平，为AIDS患者早期发现、有效控制提供了较准确的筛查依据。

参考文献：

[1]尚红.HIV检测及临床意义。2004年度卫生部临床检验中心室间质量评价总结大会大会及专题讲座资料2004.5；12

[2]王红，艾滋病初筛实验质量控制认识点滴。重庆市临床检验中心，检验医学与临床，2005，2（2）：15