关于产ESBLs的肺炎克雷伯菌的流行病学检测分析

关于产ESBLs的肺炎克雷伯菌的流行病学检测分析

沈柏宇

沈柏宇（中国人民解放军第三军医大学学员旅三队400038）

【中图分类号】R563【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）21-0272-02

【摘要】通过对产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行流行病学检测，分析病人与环境中共株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对各种抗菌药物的耐药性，并采用脉冲场凝胶、电泳分析其同源性，统计产ESBLs的肺炎克雷伯菌的流行情况，根据可能存在的流行环节，确定院内感染的流行株，制定相应的院感预防措施，务求及早发现及早处理，最大限度降低对我院的不良影响。

【关键词】肺炎克雷伯菌院内感染流行株抗菌药物耐药性

近年来，β-内酞胺类抗生素尤其是第三代头抱类药物在临床上被广泛应用，产ESBLs的肺炎克雷伯菌快速蔓延的问题随之而来，并且国内外不乏关于此菌导致暴发院内大流行的报道，引起了医学界高度的重视。本文通过对产ESBLs的肺炎克雷伯菌进行流行病学检测，分析病人与环境中共株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对各种抗菌药物的耐药性，制定相应的、预防措施。

1产ESBLs的肺炎克雷伯菌的临床检出情况

1.1不同菌种产ESBLs的检出率：选取本院大肠埃希菌212株，检出产ESBLs菌123株，检出率为57.8%；肺炎克雷伯菌391株，检出产ESBLs菌217株，检出率为55.4%。

1.2不同病房中产ESBLs菌的检出率：抽取各科ICU病房的标本中，检出产ESBLs菌149株，检出率为78.9%；普通病房的标本中，检出率为35.1%。

2产ESBLs的肺炎克雷伯菌的检测方法

2.1产ESBLs的肺炎克雷伯菌的初筛试验：按照常规的标准纸片扩散法进行操作，根据初筛检测标准：头孢他啶≤22mm；头孢三嗪≤25mm；氨曲南≤27mm进行各种药物的抑菌环直径的判断，凡是达到以上标准的，提示该菌株有可能产生ESBLs。

2.2纸片确证试验：头孢他啶(CAZ，30μg/片)、头孢噻肟(FTX，30μg/片)、头孢他啶＋克拉维酸(CAZ/CLV，30μg/10μg)、头孢噻肟＋克拉维酸(FTX/CLV，30μg/10μg)，分别进行两种纸片单独测量和两种纸片＋克拉维酸测量，对比其抑菌环直径。加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌环直径≥5mm时，可确诊为ESBLs菌株。

2.3脉冲场凝胶电泳分析：脉冲场凝胶电泳参数为14℃，120度角，脉冲时间4-40s电泳23小时。将细菌培养过夜后用低溶点胶灌模，以溶菌酶和Lysostaphin裂解其细胞壁后，在50℃下以蛋白酶K进行过夜消化，在37℃下以限制性内切酶Xbal(60U)进行过夜酶切。分子量标记物为λLadder，经EB染色后，置紫外灯下观察并记录结果。

3产ESBLs的肺炎克雷伯菌的药敏试验分析

3.1产ESBLs的肺炎克雷伯菌的药敏试验判定标准：采用纸片扩散法（K-B）法，判断标准按NCCLS2004标准执行。

3.2产ESBLs的肺炎克雷伯菌的药敏试验结果分析：肺炎克雷伯菌(CAZ、CAZ/CLV≥5mm)；大肠埃希菌AT(CAZ、CAZ/CLV≤2mm)。

3.2.1产ESBLs的肺炎克雷伯菌对亚胺培南（IPM）敏感率最高，为100%；对阿米卡星敏感率为81.18%，哌拉西林/三唑巴坦敏感率为80.09%，较敏感；对其余抗菌药物呈现不同程度的耐药性，均小于60%，平均敏感率46.3%。

3.2.2流行病学分析：通过数据分析发现，无论是产ESBLs还是非产ESBLs的肺炎克雷伯菌均对氨苄西林高度耐药，并对阿米卡星、亚胺培南、哌拉西林/三唑巴坦均敏感性较高，但产酶株对其余的抗菌药物敏感率均比非产酶株明显低(P<0.05)，具有统计学意义。药敏试验结果表明，非产ESBLs菌株对哌拉西林、氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑耐药性较高，除此之外，对其他的抗菌药物敏感率均＞60%。本检测中发现3株非产ESBLs的肺炎克雷伯菌对亚胺培南也有耐药性，其耐药机制分析可能通过细菌产生AmpCβ-内酰胺酶或碳青霉烯酶，合并外膜孔道的蛋白缺失而造成。

4小结

综上所述，抽样中产ESBLs菌株的患者绝大多数是曾因重型感染使用过第三代的头孢菌素类药物，甚至长期使用过广谱抗生素，提示临床上滥用广谱抗生素可能导致细菌的耐药基因突变并且大范围播散。

参考文献

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