食管癌组织中COX-2、VEGF-C表达与淋巴结转移及预后关系的研究

食管癌组织中COX-2、VEGF-C表达与淋巴结转移及预后关系的研究

闫振华贺春语

闫振华贺春语（河南省汝州市中医院河南汝州467500）

【中图分类号】R735.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2011）16-0039-02

【摘要】目的研究食管鳞状细胞癌（ESCC）中COX-2、VEGF-C蛋白的表达情况及与食管癌病理特征及预后的关系。方法采用免疫组织化学(SP)法检测58例食管鳞癌组织中COX-2、VEGF-C的表达，并分析其与临床病理各因素及生存的关系。结果58例患者的ESCC组织中，COX-2、VEGF-C均呈高表达，阳性表达率分别为70.6%、53.4%。COX-2和VEGF-C在有淋巴结转移组中的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P=0.018、P=0.000)，COX-2在低分化组的表达明显高于中、高分化组（P=0.028），COX-2与VEGF-C表达无相关性（P均>0.05），COX-2阳性表达患者生存时间较阴性组明显缩短（P=0.045）。结论COX-2、VEGF-C是预测食管鳞癌淋巴结转移和判断预后的重要指标。

【关键词】食管肿瘤鳞状细胞癌环氧化酶-2血管内皮生长因子-C

淋巴结转移是食管癌最常见的转移途径，也是影响预后的主要因素。研究证实环氧化酶-2（COX-2）在多种肿瘤组织及细胞中存在着过表达,与肿瘤的发生、发展密切相关。血管内皮生长因子-C(VEGF-C)是最强的促淋巴管生成因子,能够诱导淋巴增生和实体瘤的扩散。本研究采用免疫组化SP法检测COX-2、VEGF-C蛋白在食管癌中的表达，探讨二者与淋巴结转移及生存的关系。

1对象和方法

1.1对象收集河南省肿瘤医院2002年10月～2003年5月临床资料完整的食管鳞状细胞癌（ESCC）病例58例，被检测的肿瘤标本均为石蜡包埋组织，手术标本50例、胃镜活检病理组织8例。其中男37例，女性21例；年龄38～80岁，中位年龄63岁；高分化14例,中分化25例,低分化19例；采用2002年AJCC食管癌TNM分期标准分期，Ⅰ期6例、Ⅱ期37例、Ⅲ期15例；淋巴结转移24例,无淋巴结转移34例。所有患者均为初治，手术前或做胃镜前均未行放、化疗。随访日期从手术日期开始，到患者死亡或随访截止日期为止，随访截止日期为2009年5月1日，随访时间为9～65个月。

1.2方法所有标本均经10%甲醛固定,石蜡包埋,制成3μm厚的切片,采用免疫组化SP法进行COX-2、VEGF-C染色。兔抗人COX-2多克隆抗体、鼠抗人VEGF-C单克隆抗体,即用型S-P试剂盒,DAB二氨基联苯胺显色剂试剂盒,均购自福州迈新公司。免疫组化染色按SP试剂盒操作说明进行,以微波修复法进行抗原修复,工作液浓度均为1:150。

1.3评定标准COX-2、VEGF-C均以食管鳞癌细胞细胞浆/胞膜内出现棕黄色细颗粒为阳性细胞。染色表达情况采用半定量法推算,分别按以下比例计分:肿瘤细胞染色阳性率为0%～4%计0分,5%～24%计1分,25%～49%计2分,50%～74%计3分,75%～100%计4分;染色强度用0(阴性)、1(弱阳性)和2(强阳性)来表示。各指标的表达水平用肿瘤细胞染色阳性率与染色强度评分的乘积来表示，具体结果统计按Krajewska等推荐的方法进行。

1.4统计学方法应用SPSS10.0统计软件包进行统计分析，不同临床特征间同一指标比较采用卡方检验；生存资料应用Kaplan-Meier表示，并采用Log-rank方法进行分析,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1ESCC组织中COX-2、VEGF-C的表达及与临床病理特征的关系58例患者的ESCC组织中COX-2、VEGF-C均高表达，阳性表达率分别为70.6%、53.4%，COX-2和VEGF-C在有淋巴结转移组中的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P=0.018、P=0.000)，COX-2在低分化组的表达明显高于中、高分化组（P=0.028）。但二者的阳性表达与患者性别、临床分期因素均未显示相关性。

2.2ESCC组织中COX-2、VEGF-C的表达的相关性分析ESCC组织中COX-2与VEGF-C蛋白表达无明显相关性（x2=2.840，P=0.092）。

2.3COX-2、VEGF-C对ESCC预后的影响58例ESCC患者1年生存率为93.1%，3年生存率为46.6%，5年生存率为25.9%，中位生存时间为37.3月。应用Kaplan-Meier生存曲线分析发现COX-2表达与生存时间（OS）呈负相关，COX-2阳性表达患者生存时间较阴性组明显缩短（P=0.045），VEGF-C表达阳性组OS与阴性组比较均无明显差异。

3讨论

COX-2是催化花生四烯酸代谢为前列腺素(PG)的限速酶,参与炎症、肿瘤等病理过程。对于COX-2表达与食管癌临床病理特征之间的关系,学者们分歧较大。本研究结果显示ESCC中COX-2阳性表达率70.6%，且与淋巴结转移、分化程度有关,提示COX-2在食管鳞癌的发生、发展、肿瘤的浸润和转移中起重要作用。随访结果显示58例患者1年生存率为93.1%，3年生存率为46.6%，5年生存率为25.9%，中位生存时间为37.3月。这与Chan等报道一致。应用Kaplan-Meier生存曲线分析发现，COX-2表达与OS呈负相关，COX-2阳性表达患者生存时间较阴性组明显缩短,提示COX-2的阳性表达者预后差。

血管内皮生长因子-C是内皮细胞专一的促有丝分裂因子,是最强的促淋巴管生成因子,它与VEGFR-3结合可诱导淋巴管内皮细胞增生,促进淋巴管的延伸和新淋巴窦的发育。本研究结果显示VEGF-C蛋白在ESCC中表达率为53.4%，与淋巴结转移相关,而在性别、分化程度、临床分期上无差异。提示VEGF-C蛋白在促进肿瘤新生血管和淋巴管生成中起着重要作用,对判断肿瘤恶性程度和预后有一定临床意义。

COX-2可能通过促进VEGF-C的表达，引起肿瘤的淋巴结转移。最新的研究显示，前列腺素E2（PGE2）作为COX-2的重要产物，能够刺激肿瘤细胞MCF-7中一种趋化因子受体（CCR7）上调，增强肿瘤细胞向淋巴管上皮细胞的迁移能力。可见COX-2在肿瘤发生发展以及淋巴结转移中，发挥了重要的作用。而本研究在食管癌中未能显示COX-2和VEGF-C的表达有相关性，这需要更多的临床资料来证实。

本研究结果表明,COX-2和VEGF-C的表达与食管鳞癌的淋巴转移及预后有关,使用COX-2抑制剂或用抗体阻断VEGF-C来抑制肿瘤淋巴转移可能是有效的治疗策略。而COX-2与淋巴结转移关系的具体机制需进一步探讨。