(浙江省嘉兴市第二医院药剂科浙江嘉兴314000)
【摘要】目的:制备避蚊胺乳膏,并初步建立有效成分的含量测定方法。方法:拟定三种不同处方,以基质的稳定性及外观性状为考察指标,采用综合评分法对基质处方进行筛选。制备避蚊胺乳膏,采用高效液相色谱法,以WatersSymmetryShieldRP18(5μm,3.9×150mm)为分析柱,甲醇-水(80:20)为流动相,柱温20℃,流速1.0ml/min,在240nm波长处,测定乳膏剂中避蚊胺的含量。结果:制备的乳膏外观性状良好,药物含量为6.53%,避蚊胺浓度在1.0~5.0mg/ml范围内与峰面积有良好的线性关系。结论:该乳膏剂处方合理,制备工艺简便,测定方法快捷、准确、可靠,有利于质量研究。
【关键词】避蚊胺乳膏剂;高效液相色谱
【中图分类号】R94【文献标识码】A【文章编号】1007-8231(2016)17-0231-02
前言
乳膏剂是采用乳剂型基质制成的软膏剂[1-2]。将DEET制成乳膏剂,具有不易燃,携带、使用方便和涂后无油腻感、便于清洗等特点[3]。过去,DEET及其制剂的分析以气相色谱法为主。有关驱避剂气相色谱分析国内已有报道。最近几年,DEET及其制剂的分析主要以高效液相色谱法为主。本文采用高效液相色谱法测定避蚊胺乳膏中DEET的含量,取得满意的结果。
1.实验材料
1.1仪器
DF-101S集热式恒温加热磁力、电子天平、电热鼓风干燥箱KQ-200DB型数控超声波清洗器、岛津UV-1240型紫外分光光度计、Waters996型光电二极管阵列检测器、Waters501泵WatersMA01757真空脱气机、TCM柱温箱Millenium32色谱工作站、微孔滤膜(孔径为0.22um)Mllipore纯水仪
1.2药品与试剂
N,N-Diethyl-m-toluamide(deet),白凡士林,十八醇,硬脂酸,单硬脂酸甘油酯,十二烷基硫酸钠,液体石蜡,丙三醇,对羟基苯甲酸乙酯,甲醇,纯化水
2.实验方法与结果
2.1避蚊胺乳膏基质的处方筛选
2.1.1乳膏基质处方组成见乳膏基质处方组成见为白凡士林、十八醇、单硬脂酸甘油脂、液体石蜡、硬脂酸、丙三醇、十二烷基硫酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、水。
2.1.2将各组乳膏基分别经3000r/min离心10min后考察其外观性状。
2.1.3将各组乳膏基质室温放置7天后观察其外观性状。以膏体稠度、色泽、亮度、细腻性、涂展性、稳定性等为指标,采用综合评分法评价各基质处方,结果外观性状稠度适中,洁白光亮,涂展性好,离心无明显变化,放置7天后无明显变化,评分10,外观性状膏体较稀,质白,易涂展,离心分层,有粗颗粒,放置7天后分层,有粗颗粒,评分5,外观性状膏体稠厚,质白光亮,涂展性欠佳,离心无明显变化,放置7天后有粗颗粒,评分6。实验结果表明,1号处方所得的膏体外观性状较好,性质稳定,为最佳处方。
2.2避蚊胺乳膏剂的制备
2.2.1处方:避蚊胺1.0g,白凡士林1.2g,十八醇0.9g,单硬脂酸甘油酯0.45g,液体石蜡0.9g,硬脂酸0.6g,丙三醇0.15g,对羟基苯甲酸乙酯0.015g,十二烷基硫酸钠0.15g,加水至15g,制成1支。
2.2.2制备方法(1)称取处方量十二烷基硫酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、丙三醇及水,置于烧杯中,加热至70℃左右溶解,得水相混合物。(2)称取处方量白凡士林、十八醇、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸、液体石蜡,置于蒸发皿中,加热熔融,搅拌使混合均匀并控制在70℃左右,加入避蚊胺搅拌溶解,得油相混合物。(3)搅拌下,将水相混合物缓缓倒入油相混合物中,保温搅拌10分钟,使充分乳化,搅拌下冷至室温,即得。
2.3乳膏质量标准的研究
2.3.1性状该乳膏为半固体制剂,洁白光亮,均匀细腻,涂展性良好。
2.3.2鉴别称取避蚊胺乳膏约0.5g,置于50ml烧杯中加入约5ml甲醇超声提取约5分钟左右,过滤,用少量甲醇洗涤,将滤液转移入10ml量瓶,用甲醇稀释至刻度,摇匀,200~400nm紫外扫描,于235.5nm处有最大吸收峰。
2.4避蚊胺乳膏含量测定
2.4.1色谱条件色谱柱采用WatersSymmetryShieldRP18(5μm,3.9×150mm),以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:甲醇-水(80:20);检测波长:235nm;流速:1.0mL?min-1;柱温:20.0℃;进样量20uL。
2.4.2溶液制备
2.4.2.1对照品储备液的制备精密称取DEET对照品0.500g,置100ml量瓶中,加甲醇定容配成5mg/ml的对照品溶液,摇匀,作为对照品储备液。
2.4.2.2供试品溶液的制备准确称取避蚊胺乳膏0.500g,置于50ml烧杯中加入约5ml甲醇超声提取约5分钟左右,过滤,用少量甲醇洗涤,将滤液转移入10ml量瓶,用甲醇定容,摇匀,作供试品溶液。
2.4.2.3空白溶液的制备取空白基质约0.500g,同2.4.2.2项下制备得空白溶液。
2.4.3专属性考察取DEET对照品、供试品和阴性对照品溶液各20ul注入高效液相色谱仪,按2.4.1项下条件测定,记录色谱图(a、b、c)。DEET峰处无杂质峰干扰,说明实验条件专属性良好。
2.4.4稳定性试验
2.4.4.1耐热寒试验取5g避蚊胺乳膏置具塞试管中密闭,于50℃恒温水浴6h,无油水分层现象。取5g避蚊胺乳膏置具塞试管中密闭,于-15℃的冰箱中放置24h,无油水分层现象。
2.4.4.2离心试验取避蚊胺乳膏置于刻度离心管中,以3000r/min离心15min,无分层现象。
2.4.5加样回收率试验精密称取空白基质5份各0.5g,按处方比例要求分别加入DEET对照品,使之混合均匀。按供试品溶液制备项下操作,制备回收率测定溶液,测定DEET的峰面积,结果平均回收率98.62%,RSD1.83%。加入量0.0381g,测得量0.0373g,回收率97.9%。加入量0.0362g,测得量0.0366g,回收率101.2%。加入量0.0353g,测得量0.0346g,回收率97.9%。加入量0.0348g,测得量0.0347g,回收率99.6%。加入量0.0359g,测得量0.0347g,回收率96.5%。
3.结论
本文建立了测定避蚊胺乳膏剂中避蚊胺含量的高效液相色谱法。该方法专属性强,分离度好,测定方法快捷、准确、可靠,在1.0~5.0mg/ml范围内进样浓度与峰面积的线性关系良好,回归的相关系数r=0.9995。
4.讨论
4.1色谱条件优化
4.1.1流动相得选择在流动相选择方面,曾用过甲醇-冰醋酸(100:1),分离情况与单用甲醇无明显变化。用甲醇-水(100:10)为流动相,图形有所改善,但分离效果不理想,提示流动相中水的量加大可以改善分离效果。流动相为甲醇-水(80:20)时,溶剂和DEET能够达到完全分离,无杂质峰干扰,保留时间适宜,峰型较好。最终确定流动相为甲醇-水(80:20)。
4.1.2提取液的选择分别对甲醇-水(9:1)、甲醇-水(8:2)、乙醚、甲醇、乙酸乙酯、异丙醇等多种提取液进行考察,结果发现DEET在甲醇中有较好的溶解度,提取效果较好,所以选取甲醇为提取液。
【参考文献】
[1]董桂蕃,李承毅.国外趋避剂研究动向[J].中华卫生杀虫药械,2001,7(4):5-7.
[2]毕富春,王文丽.驱蚊胺气相色谱分析[J].农药,1988,27(6):25-29.
[3]盛国荣.乳膏剂质乳化方法的实验比较[J].厂矿医药卫生,1998,14(1):58-59.