苍耳子鼻炎胶囊的抑菌性作用分析任

苍耳子鼻炎胶囊的抑菌性作用分析任

梁辰，张红，杜艳羽，孙承晓

济宁医学院， 272067

摘要：目的：探讨研究苍耳子鼻炎胶囊抑菌性作用分析。方法：采用培养基培养法，以大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌为模型，通过液体培养基稀释法测定苍耳子鼻炎胶囊最低抑菌浓度（MIC），采用滤纸法对苍耳子鼻炎胶囊的抑菌效果进行分析。结果：通过实验证明苍耳子胶囊在一定浓度条件下对不同微生物有抑菌活性，3组微生物中对大肠杆菌、葡萄球菌抑菌活性最高，对芽孢杆菌有抑菌活性，但其MIC浓度较高。实验表明苍耳子胶囊对大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌的MIC分别为：20mg/ml、20mg/ml和40mg/ml。结论：在3种模型菌群中，苍耳子鼻炎胶囊对大肠杆菌和葡萄球菌的抑菌活性高，对芽孢杆菌的抑菌活性较低，提示在临床应用该药品时应充分了解感染来源，充分考虑药品毒性和有效性，有针对性的提高药品剂量，以期实现更理想的治疗效果。

关键词：苍耳子鼻炎胶囊、抑菌性

Analysis Of Antibacterial Effect Of Xanthium Rhinitis Capsules

Abstract: Objective: To investigate the antibacterial effect of Xanthium rhinitis capsules. METHODS: The medium inhibitory culture method was used to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of Xanthium rhinitis capsules by liquid medium dilution method using Escherichia coli, Staphylococcus and Bacillus. The filter paper method was used for the treatment of Xanthium rhinitis capsules. The bacteriostatic effect was analyzed. RESULTS: It was proved by experiments that Xanthium rhinitis capsules had antibacterial activity against different microorganisms under certain concentration conditions. The three groups of microorganisms had the highest antibacterial activity against Escherichia coli and Staphylococcus, and had antibacterial activity against Bacillus, but the MIC concentration was higher. Experiments have shown that the MICs of Xanthium rhinitis capsules against Escherichia coli, Staphylococcus and Bacillus are: 20 mg/ml, 20 mg/ml and 40 mg/ml, respectively. Conclusion: Among the three model bacterial groups, Xanthium Rhinitis Capsules have high antibacterial activity against Escherichia coli and Staphylococcus, and has low antibacterial activity against Bacillus, suggesting that the source of infection should be fully understood which clinically applied. Fully consider the toxicity and effectiveness, increase the dosage of the drug in order to achieve a more ideal therapeutic effect.

Key words: Xanthium rhinitis capsule, antibacterial

慢性鼻炎、鼻窦炎为常见的临床疾病，其发病原因多为鼻窦引流受阻、变态反应体质以及细菌感染导致鼻腔粘膜组织受损破坏，其病情反复，不易控制，针对慢性鼻炎、鼻窦炎常用的药物治疗主要有抗炎、抗菌、提高免疫力等方式

^[1-2]。苍耳子鼻炎胶囊其主要成分为苍耳子、白芷、辛夷花、黄芩等中药材的提取物，临床药理研究表明苍耳子富含挥发油，能够改善鼻炎患者鼻通气及嗅觉功能，其黄芩、白芷等成分有一定的抑菌活性，能够对感染性鼻炎进行针对性治疗^[3-7]。

本文以引起鼻炎的常用菌群作为菌株模型，采用培养基稀释法研究苍耳子胶囊的抑菌作用，测定其对模型菌群的最低抑菌浓度（MIC），对其抑菌效果进行评价^[8-9]。

材料与仪器

1.1 实验材料

大肠杆菌（广东环凯微生物科技有限公司）；芽孢杆菌（广东环凯微生物科技有限公司）；葡萄球菌菌株（广东环凯微生物科技有限公司）；苍耳子鼻炎胶囊 规格0.4g/粒（四川森科制药有限公司）；蛋白胨（红润生物科技有限公司）；牛肉膏（上海诚竺生物科技有限公司）；

1.2 实验设备

电子天平（上海精密仪器仪表有限公司）、DNP-9272-II型恒温培养箱（广州瑞丰设备有限公司）

实验方法

2.1 培养基制备

称取蛋白胨10.0g加入牛肉膏3.0g、葡萄糖5.0g、氯化钠5.0g，加入去离子水定容至1000ml，采用1mol/L的氢氧化钠溶液调节PH至7.0-7.5。在121℃条件下湿热灭菌20min即得液体培养基溶液。

分别称取蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，琼脂20.0g，葡萄糖、氯化钠各5.0g，加入去离子水定容至1000ml，采用1mol/L氢氧化钠调节PH至7.0-7.5，湿热灭菌后即得固体培养基。

2.2 菌液配制

接种环刮取适量菌株接种于固体培养基，置于恒温培养箱中培养24h对菌株进行活化，取适量菌株接种于4 ml液体培养基中，置于37℃，5%-10% CO₂条件下培养8h，即可得到菌株混悬液。

2.3 MIC测定方法

2.3.1 实验组配制方法

取苍耳子鼻炎胶囊4粒，除去胶囊壳，用研钵研成细分，加入液体培养基40ml，配制成40mg/ml的母液，采用液体培养基将母液稀释成高、中、低三种浓度的溶液，浓度分别为10mg/ml，20mg/ml和40mg/ml，每种浓度分为3组，每组3份，分别标记为A、B、C组。向A、B、C组中分别加入大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌各100μl，置于恒温恒湿培养箱中，在37℃，5%-10% CO₂条件下进行培养。

2.3.2 空白对照组配制方法

分别向空白液体培养基中加入大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌三种菌株的混悬液100μl，与实验组置于上述条件下进行培养。

2.3.3 判定结果

以对照组试管有显著细菌生长为评价时间，观察实验组细菌生长情况，以浓度最低的没有显著细菌增长的浓度为该药物的最低抑菌浓度（MIC）。

2.4 抑菌效果评价

将3种菌株分别接种于培养基表面皿上，均匀涂布，按照3.3.1方法配制苍耳子鼻炎胶囊培养基母液500ml，分别稀释成10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml的溶液各200ml，将滤纸置于溶液中浸泡备用。将浸泡后的滤纸用无菌镊子夹取，沥干多余试液，将滤纸置于表面皿上，每皿贴6片（3片药液，3片空白）。将表面皿置于恒温培养箱中，在适宜条件下培养24h，测定抑菌圈的大小，评价抑菌情况。

3 实验结果

3.1 MIC测定

对照组试管在培养24h后3种细菌均产生肉眼可见的浑浊，表明对照组细菌生长显著。取出实验组试管，观察并记录不同药液浓度试管中各细菌生长情况。将培养基按照浑浊度情况分为6个等级，浑浊度最高的为6级，浑浊度最低的为1级。MIC测定结果如表1所示，对照组中大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌均呈现较大程度的浑浊，其中大肠杆菌和葡萄球菌浑浊度均为5级，芽孢杆菌浑浊度为6级。在实验组中，低浓度组均呈现浑浊现象，芽孢杆菌的浑浊程度高于大肠杆菌和葡萄球菌，其浑浊度分别为3级、2级和2级。中浓度组中大肠杆菌和葡萄球菌的试管均澄清，芽孢杆菌在中浓度组有2只试管呈现浑浊，均呈现较低程度浑浊（1级），中浓度的芽孢杆菌有1支试管呈现澄清状态。中浓度组的芽孢杆菌浑浊度（1级）均较低浓度组（3级）显著澄清。在高浓度组的3组试管均呈现澄清、透明。

由实验结果得出，苍耳子鼻炎胶囊对大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌均有不同程度的抑菌性，其对大肠杆菌和葡萄球菌抑菌性能较高，对芽孢杆菌抑菌性较差。大肠杆菌、葡萄球菌和芽孢杆菌的最低抑菌浓度分别为：20mg/ml、20mg/ml和40mg/ml。

苍耳子鼻炎胶囊对大肠杆菌、葡萄球菌抑菌活性较高其原因可能是大肠杆菌、葡萄球菌相对于芽孢杆菌对其抑菌成分更加敏感，芽孢杆菌因为其本身易产生芽孢，低浓度的抑菌剂不易对其产生效果，因此较低浓度的溶液对芽孢杆菌的抑菌效果较差，但其对芽孢杆菌的抑菌效果随着溶液浓度提高而提高。

表1 苍耳子鼻炎胶囊抑菌MIC测定结果

注：“-”表示培养基澄清；“+”表示培养基浑浊，数字表示浑浊程度，数字越大，浑浊程度越高。

3.2 抑菌效果评价

抑菌效果评价实验结果表明苍耳子鼻炎胶囊溶液在中、低两种浓度条件下对大肠杆菌，葡萄球菌和芽孢杆菌均产生一定大小的抑菌圈。在低浓度条件下只有大肠杆菌和葡萄球菌产生抑菌圈，并且随着溶液浓度的降低表面皿中抑菌圈呈现减小趋势，表明随着药品浓度的降低抑菌效果呈现下降趋势。结果表明该药品在高中低三种浓度均可以对大肠杆菌、葡萄球菌产生抑菌效果，但对芽孢杆菌在低浓度（≤10mg/ml）条件下抑菌效果不明显。

抑菌效果评价结果与MIC测定结果一致，均表明苍耳子鼻炎胶囊对大肠杆菌和葡萄球菌的抑菌作用活性高于芽孢杆菌。低浓度的药物溶液无法对芽孢杆菌产生有效的抑菌效果，这提示我们在对芽孢杆菌引起的鼻炎、鼻窦炎患者治疗时应适当提高用药剂量，以期实现满意的治疗效果。

4、结果讨论

苍耳子鼻炎胶囊主要含有苍耳子、辛夷、白芷及黄芩提取物，其中苍耳子、辛夷提取物主要用于鼻炎的除湿、通窍的对症治疗，有文献表明黄芩提取物对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌均有抑菌效果，因此认为苍耳子鼻炎胶囊中主要的抑菌成分应为黄芩提取物，其抑菌效果应与黄芩提取物浓度有关^[7]。

本实验提示在临床应用苍耳子鼻炎胶囊治疗感染性鼻炎、鼻窦炎时应充分考虑分析导致感染的菌群，对于芽孢杆菌引起的鼻炎及鼻窦炎应充分考虑药物的毒性和有效性，适当提高应用药物剂量，充分发挥药物疗效。

本文只是初步研究了苍耳子鼻炎胶囊在一定浓度条件下对不同微生物的抑菌性，探讨了在不同微生物条件下的最低抑菌浓度，通过实验对其抑菌效果进行评价。后续将继续通过实验验证其抑菌活性的影响因素，将更加全面、合理的分析该药品的抑菌机理，为在临床上应用苍耳子鼻炎胶囊治疗感染性的鼻炎、鼻窦炎提供更有力的理论依据。

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通讯作者：顾英琳，1974.8，女，山东沂水，本科，高级实验师，山东济宁市济宁医学院，邮编272067，药物制剂及分析

济宁医学院大学生创新训练计划项目，编号cx2019068，名称：苍耳子鼻炎胶囊中主要化学成分含量表征其体外抑菌活性的研究