P CR检测技术在诺如病毒检测中的应用

(整期优先)网络出版时间:2020-07-22
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P CR检测技术在诺如病毒检测中的应用

谢毅明

简阳市疾病预防控制中心,四川省成都市 641400

现代的医疗技术正在不断发展,对于疾病也产生了越来越多的诊疗手段,在现代医学领域,利用PCR扫描进行诺如病毒的检测正在为越来越多的患者与医务人员所接受,那么利用PCR检测技术检查诺如病毒的优点是什么?在相关的诊断环节,又有哪些注意事项呢?

  1. 了解PCR检测技术

    1. PCR检测技术的定义:

对于我们的日常生活来说,PCR检测技术是陌生的,闻所未闻的名词,但在生物学相关领域,它是能够发现多种疾病的火眼金睛,PCR的英文全称是Polymerase Chain Reaction,翻译成中文为“聚合酶链式反应”。利用DNA在不同温度下的变性反应与碱基互补配对原则实现对于某些特殊疾病的诊断。

    1. PCR检测技术的相关应用范围:

随着科学技术的不断发展,PCR在各大科学与医学领域均有不错的表现,结合当下的医疗与科研工作,PCR检测技术被应用于以下七个方面:

(1)基因表达:

利用特殊的科学手段,可以使人类发现遗传因子中存在的密码,遗传学家利用PCR进行细胞类型与组织表达差异的测定,由此推出了“逆转录PCR”,实现了人类在基因学方面的巨大突破。

  1. 基因分型:

PCR可用于检测待定细胞或生物体的中等为基因的序列差异。

  1. 克隆:

与其它医疗检测手段不同的是,PCR是“多才多艺”的,它将与细胞及DNA的相关配合工作发挥到了极致。将DNA的目标区域扩增到事先特殊设计的兼容载体中,有利于进行PCR克隆。

  1. 突变:

在以往的相关研究环节,生物的突变只能依靠对外界环境的不断适应以及自身做出的改变,少有认为干预遗传序列导致突变的例子。采用PCR克隆手段,则可以在最短的时间内以最高的效率将所需的突变引入到目的基因中。

  1. 甲基化:

PCR可应用于研究位点的特异性甲基化。

  1. 测序:

在众多的富集模板DNA测序方法中,PCR是一种相对简单的检测手段,在我国的遗传学范围应用较为广泛,利用PCR手段进行相关DNA测序工作,可大量节约时间与资源。

  1. 应用于医学,法医学和应用科学

PCR的检测能力不仅能在DNA的测定环节发光发热,对于临床的病状诊断也有不可忽视的作用,在借助高精度仪器与专业知识的辅助下,相关医护人员能够清楚发现病变部位产生的异常。

  1. 了解诺如病毒:

2.1诺如病毒的医学定义:

诺如病毒又被称为诺瓦克病毒,是造成诺如病毒感染性腹泻的主要元凶,该病发病迅速,病情强烈,在全球范围内都有病理反应存在,由诺如病毒引起的腹泻流感等病状常在寒冷季节呈现出较高的发病率。

2.2诺如病毒对于健康的危害:

近年来我国多个省市爆发感染事件,其罪魁祸首就是诺如病毒,它是一组形态类似,抗原略有不同的病毒颗粒,在接触人体或动物之后,会迅速“生根发芽”,如同寄生虫一般对人类群体或动物群体造成病理伤害,在出现感染症状之后,患者会表现出急性肠胃炎,胃肠性流感等疾病,在冬天,还会导致冬季呕吐性疾病,临床患者常表现出头疼、发热、腹泻腹痛等症状,严重危害群众的身体健康。

  1. PCR检测技术在诺如病毒检测中的应用

既然诺如病毒是一种发作症状迅猛,“来势汹汹”的恶性病毒,那么对于时下较为先进的PCR检测技术,又能在哪些方面实现对于诺如病毒的检测呢?

3.1诺如病毒检测技术发展史

早期的诺如病毒检测技术以电镜检测为主,但这种方法对于外界条件的要求较高——不仅需要通过电镜观察病毒粒子的存在来确认诺如病毒的产生,对于病毒浓度较低的患者还无法及时有效的得出诊断结论,极大的耽误了治疗时间,而且利用电镜技术进行诺如病毒的检测只能在专业的检测机构展开,普及难度非常大。

3.2如何利用PCR检测技术进行诺如病毒的检测:

PCR检测技术诞生于生物学的温暖摇篮之中,随着灵敏度高,特异性强的核酸检测方法的出现,等温核酸扩增,逆转录聚合酶链式反应,RE-PCR等检测手段也应运而生,对于难以察觉的诺如病毒,RE-PCR是当前医学环境下应用最广泛,作用最快的检测方法,是检验诺如病毒的“黄金标准”。RT-PCR采用逆转录RNA模板的方式扩增特异性产物,根据琼脂糖凝胶电泳来观测诊断结果,对比于早期的电镜检测技术,RE-PCR对于诺如病毒检测的灵敏度提升可以达到惊人的数百倍。

在PCR检测技术中,荧光染料RE-PCR也是一种常用的诺如病毒检测手段,通过向RE-PCR反应体系中添加非特异性荧光染料,根据对扩增产物生成量的检测来了解诺如病毒在患者体内的分布信息,但这种方法需要测绘熔解曲线,专业性要求较高。

  1. PCR检测技术的优点:

对于诺如病毒的检测工作,如果采用PCR检测技术,其优点是显而易见的——不需要调动大量的人力资源,节约了设备的损耗情况,相较于传统的“开刀手术吃药”疗法,通过对体内特定细胞反应的测定,就能实现对诺如病毒的观测活动,极大的减轻了医疗压力。

对于诺如病毒的相关检测工作,PCR是一种合理有效的监测手段,但生病总是痛苦的,对于诺如病毒这种危害身体健康的“顽固分子”,大家还是应该敬而远之,在树立干净卫生的生活习惯的同时,做好流行性疾病的防护工作,健康快乐的迎接新生活。