布美他尼对多次七氟烷麻醉新生大鼠海马NKCC1与KCC2基因表达变化及成年后焦虑状态的影响

(整期优先)网络出版时间:2020-10-17
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摘要目的探讨布美他尼对多次七氟烷麻醉后新生大鼠NKCC1、KCC2 mRNA表达变化及成年后焦虑状态的影响。方法81只新生5 d雄性SD大鼠,随机分为3组(每组n=27)。对照组(C组):正常笼内喂养,不接受麻醉;多次七氟烷麻醉组(MS组):出生后第5天,第7天,第9天分别接受每天七氟烷麻醉2 h;布美他尼+七氟烷组(B组):每次麻醉前30 min接受腹腔注射1.82 mg/kg布美他尼。其中,C组和MS组动物在麻醉前30 min接受皮下注射同等剂量的二甲基亚砜皮下注射,以排除溶媒引起的影响。麻醉苏醒观察30 min后,继续笼内正常母乳喂养。第9天麻醉结束即刻每组取6只动物,动脉血气针左心室穿刺取血进行血气分析;麻醉苏醒后30 min,每组取6只动物断头处死后留取脑组织下丘脑部分,利用RT-PCR技术检测IL-6 mRNA、NKCC1 mRNA和KCC2 mRNA的表达。每组其余15只大鼠继续笼内饲养至60 d进行高架十字迷宫(elevated plus maze,EPM)检测。结果与C组比较,MS组下丘脑IL-6 mRNA和NKCC1 mRNA表达上调[IL-6:(1.000±0.207),(1.782±0.231);t=6.899,P<0.01;NKCC1:(1.000±0.255),(1.639±0.290);t=3.518,P<0.01]、KCC2 mRNA表达下调[(1.000±0.140),(0.733±0.115);t=3.017,P<0.001]、NKCC1/KCC2 mRNA比值增高[(1.000±0.276),(2.054±0.521);t=5.078,P<0.001],差异有统计学意义。与MS组比较,B组下丘脑IL-6 mRNA和NKCC1mRNA表达下调[IL-6:(1.147±0.140);t=5.635,P<0.01;NKCC1:(1.038±0.385);t=3.310,P=0.01]、KCC2 mRNA表达上调[(0.988±0.194);t=2.880,P<0.05]、NKCC1/KCC2 mRNA比值降低[(1.027±0.200); t=4.950,P<0.001],差异有统计学意义。EPM行为学实验显示,与C组比较,MS组大鼠开放臂停留时间明显缩短[(18.4±10.1)s,(4.3±3.1)s;P<0.01];与MS组比较,B组开放臂停留时间明显延长[(16.6±7.6)s,P<0.05]。结论布美他尼可以减轻多次七氟烷麻醉后新生大鼠NKCC1表达上调、KCC2表达下调及成年后的焦虑状态。