摘要目的探讨人胚胎干细胞(hESCs)定向分化为晶状体小体(LB)过程中非经典Wnt信号通路配体Wnt5a对晶状体发育的作用。方法选取人H9胚胎干细胞系，采用mTeSR培养基进行干细胞培养。"三阶段法"诱导hESCs分化为LB。培养至18 d，将细胞分为对照组和Wnt5a处理组，其中Wnt5a处理组培养基中添加500 ng/ml Wnt5a。培养至35 d，在倒置显微镜下观察细胞形态变化和LB的大小并提取对照组和Wnt5a处理组的总RNA进行转录组测序(RNA-Sequence)检测，表达差异大于1.5倍且P≤0.05被定义为差异表达基因(DEGs)，进行生物信息学分析。结果培养结束时发现，与对照组相比，Wnt5a处理组细胞形成的LB面积明显变大。转录组测序结果显示，与对照组相比，Wnt5a处理组中478个基因表达下调，201个基因表达上调，其中Wnt5a可使晶状体细胞分化及晶状体特异基因的表达上调。生物信息学分析结果显示，Wnt5a主要参与了细胞外基质(ECM)改变的过程，提示在晶状体细胞分化中，Wnt5a可改变ECM；同时，富集结果还显示经Wnt5a处理，上皮-间充质转化过程相关过程受抑制，提示Wnt5a还可抑制晶状体细胞，特别是晶状体上皮细胞的异常分化；此外，Wnt5a还可影响晶状体细胞骨架重塑。结论Wnt5a可能通过上调MAPK/ERK级联信号调整ECM的结构成分，影响晶状体细胞骨架重塑，从而促进晶状体细胞的分化。
