摘要目的探讨miR-143-3p靶向调控Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号通路对胃癌细胞增殖和侵袭的作用机制。方法双荧光素酶报告基因实验验证miR-143-3p与KRAS基因的靶向关系。将购自上海中国科学院的胃癌细胞株转染分组，将筛选人胃癌细胞株按照不同转染构建分为6组，miR-143-3p mimic阴性对照(negative control，NC)组、miR-143-3p Inhibitor NC组、miR-143-3p mimic组、miR-143-3p Inhibitor组、si-KRAS NC组、si-KRAS组、miR-143-3p Inhibitor＋si-KRAS组。实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测转染后各组细胞相关因子的mRNA和蛋白的表达情况。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法及Transwell小室法检测胃癌细胞增殖及侵袭能力的变化。组间比较采用t检验。结果双荧光素酶报告基因实验证明KRAS是miR-143-3p靶基因。miR-143-3p mimic组的miR-143-3p表达量高于NC组(t＝17.630，P<0.05)，在miR-143-3p inhibitor组中表达量低于NC组(t＝20.780，P<0.05)，差异有统计学意义。在miR-143-3p mimic组(mRNA：KRAS为1.00±0.05比0.33±0.03，t＝19.900；ERK为1.00±0.05比0.27±0.01，t＝24.800；JNK为1.00±0.06比0.60±0.04，t＝9.608；E-cadherin为1.00±0.04比1.69±0.06，t＝16.570；N-cadherin为1.00±0.03比0.54±0.04，t＝15.930；Snail为1.00±0.05比0.39±0.03，t＝18.120；蛋白：KRAS为0.54±0.04比0.23±0.01，t＝13.020；ERK为0.63±0.04比0.30±0.01，t＝13.860；JNK为0.71±0.05比0.33±0.02，t＝12.220；E-cadherin为0.85±0.05比1.20±0.06，t＝7.762；N-cadherin为0.44±0.03比0.36±0.02，t＝3.843；Snail为0.50±0.03比0.25±0.01，t＝13.690)中KRAS、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK、N-cadherin和Snail的mRNA和蛋白表达量低于NC组，而E-cadherin的mRNA和蛋白表达量高于NC组，细胞增殖(miR-143-3p mimic组：48 h为1.124±0.060比0.978±0.050，t＝3.238；72 h为2.545±0.120比2.122±0.110，t＝4.501；si-KRAS组：48 h为1.140±0.060比1.020±0.060，t＝2.449；72 h为2.500±0.120比2.070±0.100，t＝4.768)及侵袭能力(miR-143-3p mimic组：210.00±10.00比110.00±7.00，t＝14.190；si-KRAS组：215.00±12.00比100.00±6.00，t＝14.850)低于NC组，差异均有统计学意义(P值均<0.05)；而miR-143-3p Inhibitor组前述趋势逆转(P值均<0.05)，差异有统计学意义。结论miR-143-3p抑制靶向KRAS基因表达，阻断MAPK/ERK信号通路的激活，从而抑制人胃癌增殖侵袭，并调控上皮间质转化进程。
