正常生理和尿毒症状态下剪切力对静脉内皮细胞中KLF2及eNOS表达的影响

(整期优先)网络出版时间:2021-04-09
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摘要目的研究生理及尿毒症状态下剪切力对静脉内皮细胞中,KLF2和eNOS表达的影响,探讨导致静脉内皮细胞功能紊乱的机制。方法分别在生理状态和尿毒症状态下,在平行板流动腔内模拟不同剪切力,用剪切力作用各组静脉内皮细胞4、12、24 h。采用免疫组化荧光染色技术和实时荧光定量PCR技术检测KLF2及eNOS的表达情况。结果在生理状态下,KLF2明显受剪切力作用调节,高强度剪切力和生理强度剪切力会上调KLF2的表达,而低强度剪切力和振荡剪切力会下调KLF2的表达,但随作用时间的延长,KLF2的表达也会有所上调。在尿毒症状态下,KLF2表达明显被抑制,即使再给予高剪切力作用,KLF2水平也不及正常生理状态;在低剪切力及振荡剪切力作用下,KLF2表达更明显地被抑制。KLF2主要在细胞核内表达,随着剪切力的作用,KLF2也在细胞质中表达,而eNOS主要在细胞质和细胞核内呈颗粒样表达。结论动静脉内瘘术后在尿毒症环境及振荡剪切力的多重因素作用下,KLF2和eNOS的表达受到抑制,可能是导致静脉内皮细胞功能紊乱、内膜增生、自体动静脉内瘘失功发生和发展的主要机制。