揭秘！核酸检测大法是如何进行的

揭秘！核酸检测大法是如何进行的

何燕

天全县中医医院 四川雅安 625500

众所周知，自2019年年底，疫情一直持续至今。从新冠肺炎爆发一直到今天，相信大家都重新定义了生命的意义，也能够更加深刻的理解到生命的脆弱以及未知的可怕，但是人类生存在这个世界上终将就会面对各种各样的挫折。新冠肺炎固然可怕，但是举国上下都拼尽全力的抗击疫情，最终疫情也得到了控制，医护人员无疑是这场战役中最值得敬佩的战士。通过这次的疫情相信有关部门也会进行更加深刻的反思。在疫情爆发之后，相信大家也都知道，很长一段时间参加一些人群密集的集体活动以及出城的时候，都需要进行核算检查，只有检测结果呈现阴性才表示本人身体无碍，并没有患上新冠肺炎，可以去参加活动和出城等。于是本文主要带领大家来了解一下核酸检测的主要方式，希望可以带领大家学习到更多相关医学知识。

一、新冠疫情检查的基本方式

在2019年的年底，我国湖北省武汉市被新冠疫情影响而封锁，而且疫情在不断蔓延。新型冠状病毒属于一种急性呼吸道的传染性疾病，已经被纳入到《中华人民共和国传染病防治法》所规定的一种乙类传染性疾病。在新型冠状病毒这一肺炎的诊断以及治疗之中，针对之这种疾病的病原学确诊等方面，都需要具有病原学的科学依据。针对病原学进行基本确认，主要包括以下两种方式：第一点，是利用实时荧光RT-PCR检测的新型冠状病毒的核酸是否呈现出阳性。第二点，是针对病毒基因进行序列的监测，和已经知道的新型冠状病毒进行高度的同源。在国家主要所使用的是第一种检测方式，可以利用实时荧光RT-PCR展开新冠病毒的科学性检测，这种方式检测的效率比较高，而且准确率也很高。

二、核酸检测的基本流程

（一）核酸提取

医护人员需要利用硅胶柱离心以及磁性硅胶颗粒进行分离的基本方式，还需要使用自动化仪器等一些商品化的试剂或者是医疗设备，而且需要依据使用说明书进行操作。而且在提取RNA的时候需要意防止RNA进行降解。需要将被检查者的DNA放置在零下20℃的环境之内进行保存，RNA以及需要进行长期保存的被检查者DNA需要放置在零下80℃的环境之中保存。

（二）逆转录合成cDNA

逆转录cDNA的合成这一反应需要利用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液以及适量无RNA/DNA酶的超纯水和RNA的模板。另外，在一些专用的扩增仪器之中以及水浴箱之中，在相应规定的温度之下以及时间之下展开逆转录的相关反应。这里笔者建议使用商品化的RT-PCR一步法试剂展开第一轮的扩增性反应。逆转录cDNA合成反应需使用逆转录引物、dNTPs、逆转录酶、RNA酶抑制剂、DTT、缓冲液和适量无RNA/DNA酶的超纯水以及RNA模板。

（三）PCR扩增反应

PRC扩增反应之中所运用到引物、dNTPs、DNA聚合酶比如Taq等等、缓冲液以及适量的无RNA/DNA酶超纯水等等。在扩增仪器之中，需要根据提前设定的基本程序展开扩增，并且使用二次扩增的基本套式PCR基本扩增的方式。

（四）针对扩增产物展开定性分析

扩增产物一般会使用的分析方式就是琼脂糖凝胶电泳法，这种方式和分子量标准之间进行比较，可以判断出扩增片段有无在所预期的分子量基范围之内。其它一些扩增的产物主要分析方式就是，限制性的内切酶酶切分析法、一些特异化的探针的杂交具体分析和DNA顺序的具体分析等等。而且，自动化的核酸扩增仪可以使用酶联比色进行分析或者是荧光探针杂交的方式等基本原理展开测定。

（五）结果判定以及完成相关报告单

1、实验可以成立的主要条件：在每一次对大家进行检测的时候需要同时准备两个阳性的对照以及两个阴性的对照，这样做是因为只有阳性对照出现扩增出预期的片段，而且阴性对照并没有初选扩增出任何的片段、两种检测样品的最后结构都属于一致才表示这一检查结果成立，需要根据核算阳性以及隐性的相应反应结果进行具体的判定。

2、HIV核酸检测呈现出阳性：如果发现检测之后的核酸呈现阳性反应，那么自己一定要再一次进行采集样本进行测试，第二次的测试结果假如还呈现出阳性，那么则判定自己的核算检查结果为阳性；假如第二次检测的结果呈现出阴性，那么自身的核酸检测结果并不能够被真正确定，所以需要进行再一次的检查。

3、HIV核酸检测呈现出阴性：在进行第一次的核酸检测之后，报告呈现出阴性结果。那么表示被检查者并没有患上新冠肺炎，但是也需要做好相应的防护，避免被传染。

结语：

总而言之，这次的新冠疫情为大家的生活带来十分严重的影响，特别是在出行这一方面，需要进行核算检测，还有被隔离的可能。在进行核算检测的时候可以通过咽拭子、鼻拭子以及肛拭子等一些基本形式展开检测，大家的检测结果呈现阴性也表示没有感染新冠肺炎，如果呈现出阴性，那么需要作出进一步的监测，需要多次检测才可以确认最终的结果。对于新冠肺炎的核酸检测有一定的检测流程，而且在检查之前、检查过程中以及检查之后都需要注意很多事项，有需要被检查者自身注意的问题，也有需要医护人员注意的问题，需要大家一起完成才可以保证核酸检测结果的准确性。