甲状腺结节良恶性诊断中应用BRAF V600E 基因检测和细针穿刺活检联合诊断的临床意义

甲状腺结节良恶性诊断中应用 BRAF V600E 基因检测和细针穿刺活检联合诊断的临床意义

葛思彤 臧青野 索妮 姚婧怡 刘思源 才艳雪（通讯作者） 张志强

( 齐齐哈尔医学院 ；黑龙江齐齐哈尔； 163000)

摘要：目的：探究在展开甲状腺结节良恶性诊断时将RAF V600E 基因检测方法与细针穿刺活检方法进行联合应用的临床意义。方法：本次研究工作在我院展开，时间为2020年11月——2021年11月，共选取100例甲状腺结节患者，将其分为两组，一组给予单纯的细针穿刺活检诊断，另一组给予穿刺活检联合BRAF V600E 基因检测，对比分析不同检测方法的下的诊断效果。结果：对比两组患者的诊断准确率，其分别为96.00%和82.00%，其中实验组患者的诊断准确率更高，与对照组数据差异显著，表示为P<0.05，实验组方法更好。结论：将BRAF V600E 基因检测方法与细针穿刺活检方法联合应用在甲状腺结节的良恶性在诊断中，其效果显著，可将临床诊断有效率提高，帮助医生明确治疗方案，意义显著。

关键词：甲状腺结节；良恶性肿瘤；BRAF V600E 基因检测；细针穿刺活检诊断

就甲状腺结节来说，其是临床中最常见的内分泌系统恶性肿瘤，在近些年发展中，受到多方面因素的影响，甲状腺结节的发病率呈现出上升趋势。对甲状腺癌进行积极诊断，保证治疗有效率，是促进患者恢复的重要基础。就细针穿刺活检方法来说，其是当前临床发展中对甲状腺结节良恶性敏感度和特异性进行评估的最常用方法，但是诊断中依然存在10%-30%的结节是无法诊断的。从基因水平入手，对肿瘤标志物进行诊断是为有重要的。据相关研究数据结果显示，BBAF基因是甲状腺癌中的常见遗传学突变，在临床中较为常见。FNA与BRAF V600E基因检测方法的联合应用，可将临床诊断准确率提高。本研究则基于此，以我院患者为例，将两种方法进行联合应用，探究其临床应用效果，展开相关分析如下。
1资料分析和研究方法

1.1一般资料

本次研究工作以我院患者为例展开，时间为2020年11月至2021年11月，共选取100例患者作为研究对象，均为甲状腺结节，其中男性患者有23例，女性患者有77例，患者中，年龄最大的为67岁，年龄最小的为34岁，患者对应的年龄均值为（53.22±4.34）岁。本研究以对照形式开展，将选取的患者平均分为两组，将不同的诊断方法进行应用。命名为实验组和对照组，每组人数为50例，对比两组患者的一般资料结果，结果均显示P>0.05，无显著差异，符合比较标准。

纳入标准：患者手术前具有完整的高分辨率，在彩超下可被记录并且均为可疑恶性肿瘤；患者均在病理诊断下确诊为恶性肿瘤；患者对本次研究知情，并同意参与；本研究在通过医院伦理委员会批准后开展。

排除标准：患者资料不全；患者合并其他重大疾病；患者精神异常；患者配合依从性较差。

1.2研究方法

实验组患者采用单纯的细针下穿刺活检，在具体实施过程中，对患者的信息进行核对，并帮助患者选择仰卧位，将患者的颈部垫高，并尽量使其处于拉伸位置，随后对颈部进行常规消毒和铺巾，将超声进行应用，保证无菌操作，随后在患者颈部进行扫描，将结节位置进行确定，根据实际情况，对穿刺路径进行设计，选择合适的穿刺点进针。在超声引导下将23G穿刺针应用，将其刺入到患者的甲状腺结节中，随后在结节内进行重复提插穿刺针，以便于完成取材，每个结节需要进行2针穿刺，个别需要穿刺三针。完成采集后，对标本进行处理，给予涂片固定，随后对其进行观察， 确定与细胞学诊断的标准要求相符度。穿刺针主要将1ml生理盐水进行应用，对其展开冲洗，随后将脱洗液进行保存，用PE管实现，随后送检。

FNA结果诊断需要以Bethesda诊断为系统为基础，其中主要包括6类，一次为肿瘤的病变严重程度判断。

实验组患者则采用穿刺方法联合BRAF V600E 基因检测，其中穿刺方法与对照组相同，BRAF V600E 基因检测操作过程中，需要将FNA洗脱液标本进行应用，并将标准酚-氯仿抽提法将DNA溶液进行提取。促进PCR扩增BRAF第15号外显子，引物的序列设计需要以正向引物为主，其中5’-ACTCTTCATAATGCTTGCTC-3’，反向物为5’TAGTTAGACCTTCAATGAC-3’，扩增后其片段长度为275bp。岁有扩增片段均需要进行电泳证实，并进行测序。

1.3观察指标

对。

1.4统计学方法

数据统计应用相关软，主要选择SPSS20.0软件，数据处理包括计量资料和技术资料，分别用（ ±s）和（n，%）表示结果，并采用t值和X²值进行验证，结果一P<0.05，为准，大于则无意义，小于则为有统计学意义。

2结果

对比两组患者的诊断准确率，其分别为96.00%和82.00%，其中实验组患者的诊断准确率更高，与对照组数据差异显著，表示为P<0.05。

表1 两组患者临床诊断符合情况比较[n(%)]

3讨论

FNA是目前临床对甲状腺结节进行诊断的主要方法之一，具有可靠性，方法应用较为安全，方面，经济，可对甲状腺结节的良恶性进行有效诊断，而且属于微创方法，通常与高分辨率彩超进行联合应用，但是此方法依然存在10%-30%的结节无法诊断。而实际发展中，穿刺结节直径对细胞学的诊断结果具有一定影响^[1]。洗脱液BRAF V600E 基因突变检测方法将穿刺针中所残留的细胞作为标本，将不同直径的结节进行BRAF V600E 基因突变检测，可将临床诊断准确率进行提高。BRAF V600E 基因突变是一种PTC中常见的遗传学突变，通过突变导致BRAF蛋白被激活，很容易导致患者下游MEK蛋白发生磷酸化，最终发生MAPK信号途径被持续激活，从而导致细胞过度增殖，分化和出现肿瘤，因此，此方法是对PIC进行诊断和预后判断的重要指标，在临床中意义显著^[2]。

综上所述，在甲状腺结节的良恶性在诊断中将BRAF V600E 基因检测方法与细针穿刺活检方法联合应用，其效果显著，可将临床诊断有效率提高，帮助医生明确治疗方案，意义显著，可推广。

参考文献：

[1] 王超君, 秦勇, 程颢,等. 超声造影联合 BRA F V600E 基因在甲状腺细针穿刺意义不明确类型结节中的应用[J]. 中华超声影像学杂志 2019年28卷1期, 49-54页, ISTIC PKU CSCD, 2019.

[2] 赵清泉, 程思贤, 许建华,等. LBC联合BRAF V600E基因检测在甲状腺乳头状癌诊断中的应用价值[J]. 癌症进展, 2019, 17(21):4.

作者简介：葛思彤（1999-），女，汉族，黑龙江大庆人，学历：本科，单位：齐齐哈尔医学院，163000，研究方向：头颈肿瘤的诊断与治疗