临床免疫学检验方法常见影响因素有哪些

临床免疫学检验方法常见影响因素有哪些

朱夫俊

安徽阜南县人民医院 236300

临床免疫学检验是当前重要的检验手段之一，检验的准确性，对于患者的诊断和治疗有着重要的意义，随着医学技术的不断发展，检验方法也在不断完善，但还是有很多因素影响着检验的结果，而要提高检验工作的临床价值，就必须明确这些影响因素，找到有效的处理方法。

1、临床免疫学检验中有哪些概念？

在临床免疫学检验过程中包含一些主要的概念，比如抗原、抗体、标志物等，很多人一时间容易把抗原和抗体弄混，抗原是人体中能够对免疫系统产生刺激，使其产生特异性的免疫应答，并在应答出现产物后能够与之进行特异性结合的物质。而抗体一种多免疫功能的球蛋白，是在抗原的刺激下形成的，B细胞在受到刺激后会分化和繁殖，出现的浆细胞合成分泌形成抗体，抗体出现后会和抗原出现特异性结合。这样我们就可以发现，抗原和抗体间在高度的特异性，且会相结合，而将这种原理利用起来对微量物质进行分析的方法就是免疫学检验，那么在检验学中还有一个特殊的概念，就是标志物。标志物是在我们进行检验时的基础，检验学中三大标记免疫测定技术包括酶、同位素及荧光素，在这三种标记技术的基础上，发展出了多种不同的检验方法,如免疫化学发光测定、放射免疫分析测定、荧光免疫测定等，在临床中应用广泛。最近几年，非同位素标记技术的发展速度较快，其较高的敏感性和安全性使之成为了当前免疫测定发展的方向。

2、免疫学检测中标本自身造成的干扰因素有哪些？

在进行免疫学检验过程中，我们一直对于标本的质量有一定的要求，同时，在检验开展前也会对标本做出一定的处理，而标本自身的因素对于检验结果的影响也是比较大的。分析标本自身对会对检验造成影响的因素，主要包括以下方面。

（1）影响因素——类风湿因子

当患者体内存在类风湿因子时，会对多种免疫学检验方法的结果产生影响，IgG和IgM型类风湿免疫因子会和免疫检测系统中的捕获抗体，以及标记二抗的Fc段受体相结合，此时检验指标可能会出现升高的情况，结果呈现假阳性。在采取不同检验方法进行检测时，类风湿因子所造成的影响程度存在一定的差异性，且并不是类风湿因子浓度越高影响就越大。在当前阶段，临床使用的免疫检测试剂盒尚不能对类风湿因子产生的影响有良好的预防效果，但国际上有部分公司在这方面已经取得了一定的进展。

（2）影响因素——嗜异性抗体

嗜异性抗体是人类抗体中和其他动物免疫球蛋白发生反应的部分，其特异性较为广泛，单克隆抗体在免疫检测系统中大量存在，而啮齿类动物的IgGFc段受体会和嗜异性抗体结合。也就是说，嗜异性抗体和标记抗体、检测系统的捕获抗体均能产生结合，导致在检测中出现假性升高或假阳性的情况。根据临床数据分析，在检测过程中患者的病情、性别及年龄等因素不会使嗜异性抗体的影响频率和程度产生变化。

（3）影响因素——自身抗体

嗜靶抗原自身的抗体是检测过程中的又一重要影响因素，常见的如抗胰岛素嗜靶抗原、抗甲状腺球蛋白等，其自身抗体都会和靶抗原出现结合，而其结合后出现的复合物会对免疫检测的系统工作产生影响，造成测定结果出现负性干扰。在进行嗜靶抗原自身抗体产生的负性干扰对检测的影响时，要根据患者的其他检测结果，以及其病史、诊断、病情等进行总结分析。

（4）影响因素——补体

在进行免疫检测的过程中，系统会对抗体进行捕获，而在对于抗体进行标记或向固相包被中，抗体会出现分子变构的情况，Fc段受体的补体分子会暴露出结合点位，二者能够由C1q进行连接，导致假阳性的发生。另外，部分公司过于注重对敏感性的提升用链霉亲和素包被固相，在捕获抗体的标记过程中使用亲和素，而在这种操作过程中也会导致捕获抗体出现构想改变，导致假性升高或假阳性的情况。

（5）影响因素——纤维蛋白

在正常情况下，如果不使用抗凝剂和促凝剂影响，血液采集之后会逐渐凝固，2小时即凝固完全。而在进行检验工作时，部分情况下需要对血液样本进行快速检验，为了争取更多的时间，常对未凝固或未凝固完全的血液进行离心处理，对所得血清进行检验，而此时所得血清中仍有纤维蛋白原存在，这种蛋白呈可见的蛋白块，会导致假阳性的出现，而这种影响在酶联免疫吸附测定过程中尤为明显。

（6）影响因素——溶血或黄疸

标本溶血的情况在临床检验中较为常见，导致其出现的原因较为复杂，是红细胞受到破坏的表现，在破坏发生后，细胞的碎片、血红蛋白及蛋白质等会被释放出来。在免疫检测过程中，溶血能够起到游离血红蛋白、蛋白质及细胞碎片等，血红蛋白有过氧化物酶的活性，在酶联免疫吸附测定的过程中，辣根过氧化物酶的标记会出现非特异性的显色。在进行检测的过程中，选择不同的检测方法会在不同程度上受到溶血的影响，同时，影响分为正向和负向，而影响的效果也存在较大的差异性。

（7）影响因素——交叉反应物质

当类甲胎蛋白、类地高辛等物质存在在检测标本中时，靶抗原会和待检测的样本出现交叉反应，这种物质和反应的出现，不会对多克隆抗体测定抗原的结果产生明显的影响，但会对单克隆抗体的检测造成较大影响，而当单克隆抗体的把决定簇和交叉抗原的把决定簇，会导致假阳性的出现。

（8）影响因素——外源性物质

在检测过程中，还有一些由于检测过程导致的细菌等因素导致的外源性感染和污染等对结果造成的影响。

3、检测前对检验结果造成影响的因素有哪些？

除了标本自身造成的影响之外，在检测前一些操作和人为因素也会影响检验结果。首先，当前部分医院检验科室的管理并不严格，没有建立完善的质量管理体系，相关的资料和文件也存在不同程度的缺失，检测人员在上岗前通常没有接受正规的、专业的、统一的培训，没有针对性的学习检验质量的要求、标准、规定和控制措施等，对于检验质量控制缺少足够的重视度，常见的情况包括：抽血前没有指导患者做好相应准备、抽血过程中操作不规范、样本采集时间、采集量、采集位置不合理等，导致样本受到污染、损坏、溶血等，影响样本的质量；检测人员人才队伍建设不足，对应的人才资源较少，工作量较大，需要处理的项目和操作较多，工作耗时较长，对工作准确性产生了不用程度的影响；检验科所用的器械、设备、试剂等长时间没有清洁、检查、消毒、更换，过期试剂、存在误差的仪器、不规范的使用方式等，导致样本的获取和放置等受到影响，或存在不合格样本，影响检测结果。

4、检验过程中对检验结果造成影响的因素有哪些？

在进行免疫检验的过程中，检测过程是最关节的一个环节，而在这一阶段中，会对检验结果造成影响的因素较多。首先，在检验过程中需要根据患者实际情况对检验方法进行合理的选择，保证能够对患者做出有针对性的检查，排除其存在的高危因素，而检测方法选择不合理，就会导致结果准确性降低，同样的，检测过程中需要按照规定对样本进行取样检测，取样不足等情况也会导致结果受到较大的影响；第二点，检验过程中部分操作有着一定的特殊要求，如在什么样的环境下放置多长时间，而部分检测人员面对大量的检测任务，会存在侥幸心理，一味的追求工作效率，操作没有按照规定进行，导致结果出现偏差；试剂盒的敏感度在很大程度上决定着其化学性质的稳定性，而当试剂盒选择不当的情况下，检验可重复性被降低，容易在检测过程中和其他物质出现反应，而被分解的物质极易变质，这就导致检验的精准性受到干扰；另外，检验所处环境也是一个重要的因素，温湿度也会影响检验结果。

5、检测后对检验结果造成影响的因素有哪些？

在检测结束后没有正确记录工作过程及结果、没有做好室内的清洁、没有妥善处理剩余样本等，都是导致检验结果受到影响的重要原因。