艾滋病检验中HIV抗体ELISA法筛查研究

艾滋病检验中 HIV抗体 ELISA法筛查研究

张燕

四川省凉山州雷波县疾病预防控制中心检验科 四川凉山州 616550

【摘要】目的：研究艾滋病人检验中HIV抗体ELISA法筛查准确率与临床应用价值。方法：采用2021-1~2021-6雷波县人民医院采集的艾滋病人血样122例，常规组：实施常规胶体金法检测；实验组开展ELISA法筛查。因为这些都是已知病人所以不通过确诊，记录不同方法的检测时间与我中心检测成本费用。结果：实验组艾滋病阳性筛查率100%高于常规组的艾滋病阳性筛查率99.18%，互比，无差异性（P＞0.05）。实验组检测时间长于常规组，实验组检测成本低于常规组，互比，有差异性（P＜0.05）。结论：艾滋病具有传染性，尽早对疾病确诊，可控制传染源，还可尽早开展治疗，稳定病情，建议跟据当地检测的条件可选择ELISA法或胶体金法对艾滋病患者的HIV抗体进行筛查，从而保证阳性检出率，ELISA法阳性率高，用时长但成本稍低，胶体金法用时短，费用稍高，深获临床医师认可，两种方法均可作为HIV抗体初筛的一种重要筛查手段。

【关键词】HIV抗体；艾滋病；ELISA法；筛查；阳性率；检测时间；检测费用

ELISA screening study for HIV antibody in the AIDS test

[Abstract] Objective: To study the screening accuracy and clinical application value of HIV antibody ELISA method in AIDS human test.Methods: 122 AIDS blood samples collected from 2021-1 to 2021-6: conventional group: conventional colloidal gold test; experimental group carried out ELISA screening.Because these are known patients so do not pass the diagnosis, record the testing time of different methods and the testing cost of our center.Results: The AIDS-positive screening rate in the experimental group was 100% higher than 99.18%, with no difference (P> 0.05).The test time was longer than the experimental group in the conventional group, and the test cost was lower than the conventional group, and it was different (P <0.05).Conclusion: AIDS is infectious, the disease diagnosis as soon as possible, can control the source of infection, can also be treatment as soon as possible, stable condition, suggested according to the local testing conditions can choose ELISA method or colloid AIDS patients screening HIV antibody, to ensure the positive detection rate, ELISA method positive rate, long but low cost, colloidal gold method is short, higher cost, recognized by clinicians, both methods can serve as an important screening means of HIV antibody initial screening.

[Keywords] HIV antibody; AIDS; ELISA method; screening; positive rate; test time; test cost

艾滋病在临床中也可称作为获得性免疫缺陷综合征，是由于机体感染人类免疫缺陷病毒（HIV）而引发的全身性疾病，艾滋病患者机体免疫功能存在不同程度障碍，若不尽早开展治疗可感染各种疾病，甚至还可引发恶性肿瘤，最终死亡

^[1]。此外，艾滋病传染性较强，是一种危害性极大的传染性疾病，而且具有潜伏期长，危害范围广等特征，尽早对疾病进行确诊非常重要，不仅可快速抑制病情发展，还可控制传染源^[2]。临床中，针对艾滋病筛查方法较多，而HIV抗体筛查是判定HIV感染的主要诊断依据，而不同筛查方法所得结果存在一定差异性。ELISA（酶联免疫吸附试验）对HIV抗体筛查阳性率较高，可发挥良好重复性、高敏感性及特异性强的定量实验诊断方法^[3-41]。因此，本文就针对艾滋病检验中应用不同方法筛查HIV抗体，分析ELISA及胶体金法筛查方式的临床应用价值。

1资料与方法

1.1 一般资料

采用2021-1~2021-6雷波县人民医院采集送检至我中心的艾滋病人血样122例，男性：63例，女性：59例；最小年龄13岁，最大年龄65岁，平均年龄（45.01±1.89）岁常规组：实施常规胶体金法检测；实验组开展ELISA法筛查。各组艾滋病患者均为同一样本在资料数据上无差异性。

1.2筛查标准

纳入标准：①通过HIV-1/2抗体检测、免疫印迹法、HIV核酸检查等，患者机体出现发热、记忆力下降、淋巴结肿大、CD₄⁺淋巴细胞降低等症状，确诊为艾滋病；②患者本人或家属对本次调研知情，并自愿签订相关同意书。

剔除标准：①存在精神障碍疾病；②中途退出者；③并发其他恶性疾病；④听力障碍；⑤出血性疾病；⑥语言沟通障碍者。

1.3样本要求

均为EDTA-Na₂真空采血管采集的24小时内未溶血的抗凝全血。

1.4方法

常规组：实施常规胶体金法检测；选择人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体检测试剂（胶体金法）诊断试剂盒（珠海丽珠试剂股份有限公司），根据试剂盒说明进行操作：先将待测血浆样本平衡到室温，将50uL样本加在加样区后立即加一滴样本稀释液（0.9%氯化钠溶液），按照试剂盒说明15至30分钟读取结果，15-30分钟内肉眼观察质控线及检测线均出现即为阳性，马上记录检测时间，若30分钟时间已到，也只出现质控线即此样本为阴性。

实验组：开展ELISA法筛查：选择人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（珠海丽珠试剂股份有限公司）、全自动洗板机（科华）、酶标仪（科华360）、数码恒温水箱等设备与仪器，实施抗HIV检测时，将试剂在常温下静置30min。对血液标本实施离心处理，分离血浆，根据试剂盒说明书进行操作，先取出酶标板，设定：4孔阳性对照（HIV1抗体阳性对照2孔，HIV2抗体阳性对照2空），阴性对照3孔，外部对照1孔后分别在相应的孔内加入对照、质控品及样品加入50μL，37℃孵育60min，再洗板5次，拍干，再加入酶标记抗原100μL，37℃孵育30min，再洗板5次，拍干，加底物缓冲液50μL，底物液50μL,37℃避光反应30min后，加入终止液50μL，酶标仪按照试剂盒说明设定双波长（450nm/620nm）读取不同孔的吸光度。吸光度>=阴性对照均值（阴性对照均值小于0.080按照0.080计算）+0.150的孔结果判定为阳性。

1.5 观察指标

分析不同种检测方法艾滋病阳性检测结果，并记录不同方法的检测时间与检测费用。

1.6统计学处理

研究数据用软件SPSS25.0进行处理，计量资料行（ ±s）表示，t检验，计数资料行“n（%）”表示，²检验。P＜0.05，差异有统计学意义。

2结果

2.1 组间艾滋病阳性筛查率的比较

实验组艾滋病阳性筛查率100%高于常规组的艾滋病阳性筛查率99.18%，互比，无差异性（P＞0.05）。具体见表1。

表1组间艾滋病阳性筛查率的比较（n，%）

2.2 组间检测时间与检测成本的比较

实验组检测时间长于常规组，实验组检测成本低于常规组，互比，有差异性（P＜0.05）。具体见表2。

表2组间检测时间与检测成本的比较（±s）

3 讨论

HIV病毒是引发艾滋病主要因素，但机体受到HIV病毒感染后，机体免疫细胞受到损伤，进而降低免疫功能，自身抵抗能力下降极易导致其他细菌或病毒侵袭，导致患者出现各种感染性疾病^[5]。此外，艾滋病具有传染性质，男女均可发病，可通过血液、阴道分泌物、精液、胸腹水、乳汁等传播，而且疾病潜伏性较长，未发病前患者机体不易出现明显不适症状。通过临床相关数据得知：艾滋病发生率呈逐年症状模式，进而成为全球性问题，获得各国医学研究者的重视度，定期对HIV抗体进行筛查非常重要，也是预防、治疗艾滋病主要措施之一^[6-7]。

临床中，针对HIV抗体筛查方案较多，比如免疫印迹法、ELISA法筛查及胶体金法，其中免疫印迹法为HIV抗体筛查金标准，但操作过程较为繁琐，多在确诊试验中应用^[8-10]。

胶体金法是通过胶体金免疫层析技术，采用双抗原夹心法，在相应的区域包被金标记抗原、检测线抗原和质控线抗体实施筛查，因胶体金法产生的免疫复合物凝聚显色，在检查过程中安全性高，而且操作过程较为简单，免疫复合物显色稳定性较强，30min内为反应时间，此方法操作简单，所需仪器设备也无特殊要求，只要满足合适的温度，肉眼即可对此进行判读，对HIV抗体阳性筛查率也不低，可以满足临床需求，非常适合区乡卫生院快诊点进行大规模筛查时运用。

ELISA法检测原理为：使抗体或抗原与某种酶连接为酶标记抗原或抗体，进而确保其免疫活性与酶活性，将标本与酶标抗体或抗原通过不同步骤与固定载体表层等抗体或抗原发生反应，采用洗涤方式，让固相载体上形成抗原抗体复合物与其他物质分开，并结合在固相载体上，酶量与标本中受检物质量形成一定比例，增加酶反应底物，底物转变为有色产物，而产物的量同标本受检物质量呈正相关关系，可通过颜色深浅实施分析。酶催化频率较高，可将反应效果放大，进而提高检测敏感度。

本次研究中胶体金法检测阴性样本，其ELISA法S/CO值仅为1.12其CD₄⁺淋巴细胞，CD₈⁺淋巴细胞分别为65（个/uL），2155（个/uL）。通过对患者的了解此患者已经确诊6年，且依从性差。

通过本次研究所得结果为：应用ELISA法筛查艾滋病阳性筛查率100.0%高于胶体金筛查的艾滋病阳性筛查率99.18%；应用ELISA法检测时间长于胶体金筛查法，ELISA法检测成本低于胶体金筛查；但是ELISA法在进行实验时需要酶标仪，洗板机，水浴箱等仪器，所以不适合临床多点同时开展大规模的筛查。为进一步确保检查效率，建议加强对血液标本的管理，若有异常及时重新采样，以免影响筛查结果准确性，而且需选择合理试剂，并在检测前，对试剂实施预处理。此外，标本质量对ELISA法筛查结果也易产生影响，一定要彻底分离血浆，样本不能产生溶血，对未及时检测的样本进行冷冻保存，在检测时，必须将样本平衡至室温。

综上所述：胶体金法虽然价格稍高，但阳性样本准确率与ELISA法对比无差异性，其检测时间短，实验环境要求低，不需要特殊仪器即可判读结果，对大规模HIV抗体筛查临床应用价值较高。

参考文献

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