大连海洋大学 辽宁大连 116023
[摘要] 目的 评价海参油的毒理学安全性。方法 采用小鼠急性经口毒性试验、遗传毒性试验和大鼠30天喂养试验对海参油的毒理学安全性进行评价。结果 以最大给药量(18g/kg∙BW)进行小鼠急性经口毒性试验,未见动物有中毒症状和死亡。Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验以及小鼠精子畸形3项遗传毒性试验结果均为阴性。大鼠 30 天喂养试验结果表明该样品对大鼠的体重增长、进食量、血常规和血清生化指标无显著影响(P > 0.05),对大鼠脏器组织均未产生可观察到的损害作用。结论 海参油在当前试验条件下未见可观察到的毒副作用。
[关键词]海参油;毒理;安全性;
在中国,几百年来人们认为海参不仅是一种佳肴,而且还是一种滋补保健品。随着人们对海参的不断研究,发现海参具有抗衰老、降血脂、抗肿瘤活性和增强免疫力功效[1-2]。海参含有丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸、钙、磷等。海参的不饱和脂肪酸含量高达54.74%,大部分海参中含量为20%多[3]。笔者查询发现对海参的研究较多,但对海参提取物、海参油的研究较少,本实验旨在研究海参油的安全性,为有关海参产品的进一步开发提供一定的基础依据。
1 材料和方法
1.1受试物样品 干晒海参经粉碎、CO2超临界萃取,流量25L/h,萃取温度55℃,压力25MPa,分离得到海参油。成人推荐日摄入量为1.0g。
1.2 试验动物 清洁级健康昆明种小鼠和SD种大鼠,均由广东省医学实验动物中心提供。
1.3 菌株 鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TAl02 4 种菌株,由北京市疾病预防控制中心提供。
1.4 试验仪器 电子天平、日立KY2000半自动生化仪、照相显微镜等
1.5实验方法 急性毒性试验、遗传毒性试验及大鼠30天喂养试验主要参照GB15193-2003的相关试验方法进行[4]。
1.6数据统计 应用统计软件SPSS 16.0对试验数据进行单因素方差分析和组间比较。
2 结果
2.1急性毒性试验 将受试样品以18.0g/kg.bw的剂量给小鼠灌胃后,观察14天,小鼠均未见明显的中毒症状,也无死亡。将受试动物处死后进行解剖检查,肝脏、脾脏、肾脏、心脏、肺、胃、肠等主要器官,均未见明显异常改变。
2.2 遗传毒性 各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数2倍,亦无剂量-效应关系,海参油对鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株,在加与不加S-9时,均未呈现遗传毒性。受试物各剂量组微核率与对照组比较差异无显著性(P>0.05);环磷酰胺组微核率与溶剂对照组比较有显著差异(P<0.01)。样品剂量组与对照组的小鼠精子畸形率范围 1.41%~1.53%,阳性对照组的小鼠精子畸形率为4.54%,各剂量组精子畸形率与对照组相比均无显著差异(P>0.05),而与环磷酰胺阳性对照组比较具有极显著差异(P<0.01)。
2.3 30天喂养实验 各组动物生长发育、活动均正常,无中毒表现和死亡。以1.67g/kg.bw、0.83g/kg.bw、0.42g/kg.bw剂量的海参油经灌胃给予大鼠,连续30天,与对照组相比,受试样品各剂量组动物始重、实验中期、末期重、总增加量、总进食量和食物利用率差异无显著性(P>0.05),见表1。连续灌胃30天,各剂量组大鼠的血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数及其分类与对照组相比无显著性差异(P>0.05),见表2;各剂量组大鼠的血生化指标与对照组相比无显著性差异(P>0.05),见表3。
病理检查 以1.67g/kg.bw、0.83g/kg.bw、0.42g/kg.bw剂量的海参油经灌胃给予大鼠,连续30天,各组大鼠大体观察未发现异常,脏器绝对重量及脏/体比值与对照组相比无显著性差异(P>0.05)。高剂量组和对照组动物的主要脏器进行组织病理学检查,组织病理切片检查结果,肝脏:对照组(雌1/10只)肝细胞轻度脂肪变性,表现为肝小叶局灶细胞胞浆内边界清楚的小脂滴。实验组与对照组比较,送检脏器肝脏、肾脏、脾脏、胃、十二指肠、睾丸或卵巢组织未见有意义的病理改变。
表1 海参油对大鼠体重(g)的影响( ,n=10)
性别 | 剂量 (g/kg.bw) | 始重 (g) | 中期重 | 终期重 | 总增重 | 总进食量 | 食物利用率,% |
雄 | 对照组 | 75.3±5.0 | 169.7±9.4 | 244.7±14.4 | 169.4±10.6 | 554.5±29.4 | 30.5±0.7 |
0.42 | 76.0±6.7 | 171.2±7.3 | 247.3±11.2 | 171.3±10.9 | 560.5±25.5 | 30.6±1.4 | |
0.83 | 76.4±4.7 | 172.3±7.7 | 251.7±13.1 | 174.4±10.7 | 567.2±30.2 | 30.8±1.2 | |
1.67 | 77.3±6.3 | 170.1±7.4 | 243.9±13.8 | 166.6±12.6 | 546.4±26.1 | 30.5±1.3 | |
雌 | 对照组 | 73.2±4.8 | 149.8±6.3 | 207.2±10.9 | 134.0±10.8 | 516.1±25.6 | 25.9±1.4 |
0.42 | 73.2±5.1 | 148.9±5.6 | 204.7±9.8 | 131.5±9.2 | 510.5±30.1 | 25.8±1.2 | |
0.83 | 72.2±5.4 | 145.0±7.3 | 200.4±13.2 | 128.2±8.8 | 504.4±28.4 | 25.4±0.6 | |
1.67 | 74.5±4.3 | 151.8±6.3 | 210.3±11.9 | 135.8±11.7 | 522.6±29.3 | 26.0±1.1 |
与对照组相比无显著性差异(P>0.05)
表2 海参油 30天喂养试验血液学检查结果( ,n=10)
性别 | 剂量 (g/kg.bw) | 白细胞计数 (×109/L) | 淋巴 (%) | 单核 (%) | 粒细胞 (%) | 红细胞计数 (×1012/L) | 血红蛋白 (g/L) |
雄 | 对照组 | 9.12±4.25 | 67.3±5.83 | 14.27±2.59 | 18.33±6.69 | 6.52±0.43 | 150.63±9.04 |
0.42 | 9.86±4.37 | 67.8±7.86 | 12.35±2.52 | 19.71±7.31 | 7.02±0.52 | 156.80±12.37 | |
0.83 | 8.07±4.45 | 64.3±8.91 | 12.22±3.36 | 23.16±8.21 | 6.50±0.59 | 147.31±11.46 | |
1.67 | 8.72±2.51 | 64.7±8.85 | 13.19±2.56 | 22.80±7.60 | 6.71±0.28 | 153.40±6.43 | |
雌 | 对照组 | 7.37±1.28 | 67.8±5.76 | 13.25±3.17 | 24.1±20.40 | 6.73±0.49 | 155.3±14.75 |
0.42 | 7.52±1.64 | 64.6±5.84 | 11.89±1.14 | 23.56±6.14 | 7.25±0.78 | 162.6±20.88 | |
0.83 | 7.20±2.37 | 67.3±5.88 | 12.91±1.60 | 19.56±4.55 | 7.06±0.67 | 155.0±17.63 | |
1.67 | 9.47±5.82 | 61.7±9.15 | 13.12±2.86 | 25.5±10.00 | 6.53±0.49 | 147.8±16.41 |
与对照组相比无显著性差异(P>0.05)
表3 海参油30天喂养试验生化检验结果( ,n=10)
性别 | 剂量组(g/kg.bw) | 血糖 (mmol/L) | 尿素氮 (mmol/L) | 肌酐 (µmol/L) | 谷丙转氨酶 (U/L) | 谷草转氨酶 (U/L) | 总蛋白 (g/L) | 白蛋白 (g/L) | 甘油三酯 (mmol/L) | 胆固醇 (mmol/L) |
雄 | 对照组 | 5.32±0.58 | 8.46±0.82 | 46.57±5.56 | 41.74±5.51 | 136.22±7.53 | 69.68±3.10 | 37.66±2.91 | 1.06±0.08 | 1.42±0.17 |
0.42 | 5.40±0.72 | 8.35±0.81 | 44.69±3.91 | 43.39±6.32 | 137.21±11.72 | 70.10±4.56 | 38.23±3.20 | 1.05±0.06 | 1.47±0.18 | |
0.83 | 5.34±0.55 | 8.56±0.83 | 46.49±5.72 | 42.36±6.45 | 135.50±4.95 | 69.29±5.74 | 39.55±4.31 | 1.05±0.10 | 1.43±0.15 | |
1.67 | 5.38±0.56 | 8.45±0.63 | 45.54±5.62 | 41.53±4.97 | 137.60±9.89 | 68.92±5.89 | 37.95±2.54 | 1.06±0.13 | 1.39±0.11 | |
雌 | 对照组 | 5.34±0.57 | 8.58±0.92 | 45.47±3.85 | 41.46±3.19 | 135.65±12.29 | 68.78±5.68 | 39.21±3.09 | 1.07±0.11 | 1.44±0.13 |
0.42 | 5.43±0.64 | 8.63±0.96 | 45.75±4.69 | 40.94±5.24 | 135.74±12.94 | 69.37±4.82 | 39.33±3.35 | 1.03±0.12 | 1.40±0.15 | |
0.83 | 5.29±0.55 | 8.49±0.87 | 46.53±4.35 | 41.33±5.43 | 138.18±12.59 | 68.54±5.69 | 38.66±3.83 | 1.07±0.14 | 1.37±0.15 | |
1.67 | 5.25±0.55 | 8.54±0.93 | 46.20±5.17 | 40.11±4.79 | 136.65±14.52 | 68.46±5.84 | 39.57±6.02 | 1.04±0.07 | 1.42±0.12 |
各剂量组与对照组相比无显著性差异(P>0.05)
3讨论
海参油是干晒海参经粉碎、CO2超临界萃取、分离所得,成人推荐日摄入量为1.0g。海参油主要成分为脂肪酸、不饱和脂肪酸。本实验结果,急性毒性实验以18.0g/kg∙BW灌胃小鼠,14天后对小鼠无影响。遗传实验Ames实验、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性。 30天喂养实验,1.67g/kg.bw、0.83g/kg.bw、0.42g/kg.bw各剂量组动物体重、体重增加、进食量及食物利用率与对照组相比均无显著性差异(P>0.05),血液学指标、血生化指标、脏器绝对重量及脏/体比值与对照组相比无显著差异(P>0.05),病理组织学检查,海参油对受检脏器无明显损害。表明海参油基本无毒。
引用文献
1.苏秀榕,楼永江,张静,等.海参的营养成分及海参多糖的抗肿瘤活性的研究[J].营养学报,2003,25(2):181-82.
2.沈明.海参的化学成分和药理研究进展[J].中成药,2001,23(10):758-761.
3.王远红,王聪,郭丽萍.海参科(Holothuriidae)中4种海参的营养成分分析[J].中国海洋大学学报.2010年7月,40(7):111-114