五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制

五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制

王磊

马鞍山职业技术学院 安徽 马鞍山 243000

【摘要】目的：探讨五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制。方法：应用临床医学观察对比法，对安徽省第二人民医院2019年11月—2021年7月资料库中的594例肿瘤患者患者资料库进行检索，从中遴选出62例作为实验患者，依照治疗环节用药差异，分为病患数相同的对照组和观察组两小组。结果：观察组临床疗效优良率96.77%（30/31）明显高于对照组的83.87%（26/31），有统计学意义（X²=8.000，P=0.004，P＜0.05）。结论：五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制考虑与其抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抗血管生成和抗侵袭相关，可作为有效治疗肿瘤患者的重要方法在临床实践中大力推广实施。

【关键词】五环三萜皂苷；抗肿瘤；作用；机制

0前言

五环三萜的抗肿瘤作用机制较广泛，在抗肿瘤药物的筛选中均获得了不少有抗肿瘤活性的化合物，且该类化合物以其多部位、多环节、多靶点的特点，可使药物长时间持续发挥效力，并达到延长患者带瘤生存时间，在抗肿瘤上凸显了其显著的临床优势^[1]。因抗肿瘤药物类目繁多，包括化疗药物、生物制剂等。以常见的烷化剂类药物为例，因其结构中含有化学毒性基因杂质，故针对癌细胞中的核酸、蛋白质或酶发挥了烷化作用，致使癌细胞死亡。而关于五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制的探究，在肿瘤患者的治疗中，成为该领域的热点议题。本文为探讨五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制，特选取某单位62例肿瘤患者患者为实验患者，信息整合报道如下。

1　常规资料和方法选定

1.1　常规资料

应用临床医学观察对比法，对安徽省第二人民医院2019年11月—2021年7月资料库中的594例肿瘤患者患者资料库进行检索，从中遴选出62例作为实验患者，依照治疗环节用药差异，分为病患数相同的对照组和观察组两小组。其中对照组男患者17例，女患者患者14例，年龄42～61岁，平均年龄（50.04±0.02）；观察组男患者患者18例，女患者患者13例，年龄41～62岁，平均年龄（50.06±0.01）。两组患者的临床资料差异在性别、年龄上差异较小，此次研究有可比性。

1.2　纳入和排除标准

纳入标准：早期肿瘤患者，未转移者，不适于手术、放疗、化疗及患者不愿应用西医治疗者，晚期癌痛西药无效者，已接受手术、放疗、化疗患者需中医减轻并发症及辅助治疗者。

排除标准：精神障碍疾病者；中途失访者。

1.3　方法

给予对照组行对症治疗，给予观察组应用五环三萜皂苷治疗，观察两组临床治疗效果，并就应用五环三萜皂苷治疗的抗肿瘤作用和机制进行总结。

(1)取皂角刺药材8kg，粉碎，95％乙醇加热回流提取三次，每次提取的固液比为1:3(此处的固液比为质量比)，每次2h，将提取液合并过滤，浓缩至无醇味，得皂角刺乙醇提取物2.45kg。

(2)将总粗提物加入适量水超声打散，依次用等体积石油醚、乙酸乙酯萃取3次，最终得到剩余水相部位，将水相减压浓缩得到水相部位360g。

(3)将所得的水相部位加水稀释，通过d101大孔吸附树脂色谱，依次用水、20％、40％及60％乙醇-水梯度洗脱，将各洗脱部分减压浓缩至干。

(4)将60％乙醇-水洗脱部分(25g)，加入200～300目硅胶50g拌样，挥干溶剂，采用硅胶柱色谱，以体积比ch2cl2-meoh(100:1→50:1→25:1→15:1→10:1→5:1→1:1→0:1)进行梯度洗脱，每1000ml作为一个单位接收，浓缩得各馏分，各馏分用tlc检测，成分相似部分合并。

(5)将ch2cl2-meoh(1:1)洗脱部分(5g)，采用rp-c18中压柱色谱，依次用10％、35％、50％、60％、80％、100％甲醇-水梯度洗脱，将rp-c18柱的80％meoh部位(120mg)用ch3cn/h2o(26:74。v/v)进行制备(流速：3mlmin-1；检测波长：210nm)，最终得到新化合物11mg。

结构鉴定：对分离得到的单体成分应用agilent5973n质谱仪和burker400mhz核磁共振波谱仪分别进行ms，nmr谱的测定(具体见附图1-6)，所得核磁数据见表1，鉴定该新五环三萜皂苷类化合物的结构。

1.4　疗效评定

临床疗效包括有效、显效、不良反应和并发症。有效：连续治疗后，患者体重基数减轻。显效：患者体重略有降低。不良反应和并发症：患者短期治疗后，于病况控制不佳。优良率=有效率+显效率。

1.5　统计处理

所有计数数据均用X²检验，以%表示，计量资料以（X±S）表示，用t检验，运用流行病学统计程序Epidata 2.0版及EPINFO2000版统计软件包处理，以P＜0.05为有统计学差异。

2. 结果

2.1两组临床疗效

观察组临床疗效优良率96.77%（30/31）明显高于对照组的83.87%（26/31），有统计学意义（X

²=8.000，P=0.004，P＜0.05），如下表1所示。

表1　两组临床疗效优良率比较表（）%

2.2五环三萜皂苷提物的制备

摘取新鲜皂角刺晒干，粉碎后取其粗粉10g，精密称定，置200ml锥形瓶中，按照1:14的料液比加入70%乙醇140ml，在40℃，200w条件下采用超声振动法提取40min后趁热抽滤，重复以上步骤3次得提取液。提取液经真空减压浓缩后进行真空冷冻干燥24h，得到皂角刺醇提物干燥粉末。取干燥粉末500mg溶于DMSO二甲基亚砜中，定容至10ml，配制成50mg/ml样液，加样时用细胞培养液进行稀释。

表2：本次实验配药方案

3　讨论

肿瘤患者是肿瘤组织在细胞形态和组织结构上的异变，它的主要特征为，区别于正常组织的、异型性的表现。抗肿瘤药物的为治疗肿瘤疾病的一类药物，其不同于其他药物的特点之一是其用途是逐渐增加的，关于中药制剂的疗效研究中，被证实为改善患者预后的可行性策略。五环三萜皂苷的抗肿瘤作用机制研究非常广泛，在抗肿瘤药物的筛选中也获得了不少有活性的化合物，而且这些化合物抗肿瘤作用呈现多部位、多环节、多靶点的特点，既能使药物长时间持续发挥效力，又能使患者带瘤生存时间延长，使其有望成为新一代的抗肿瘤药。肿瘤严重危害人类的健康。而五环三萜类化合物对癌细胞具有选择性的杀伤作用。对正常细胞无碍。典型五环三萜类化合物包括齐墩果烷型和乌苏烷型化合物。

既往研究在本论题的研究成果进一步表明，该药物应用后，具有多种药理活患者，包括抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗血吸虫、增强免疫等药理作用^[1]。以α-常春藤皂苷为例，药理活性研究表明，常春藤皂苷元具有抗肿瘤、抗抑郁、抗菌抗炎、抗糖尿病等多种药理作用，但是其相关作用机制尚缺乏深入研究^[2]。以珠子参为例，其为五加科人参属药用植物，属于珍稀物种.珠子参具有保护心脑血管系统、中枢神经系统、肝脏以及抗炎、抗肿瘤等药理活患者.与同属的人参、西洋参和三七等植物相类似，珠子参中的主要活患者成分为三萜皂苷，根据苷元结构的不同可将珠子参皂苷分为2大类，分别为:齐墩果烷型五环三萜皂苷和达玛烷型四环三萜皂苷^[3]。从酸枣仁及酸枣其他部位中获得51个皂苷类成分，根据苷元结构不同主要分为四环三萜和五环三萜类皂苷.随着对酸枣仁皂苷类成分研究的不断深入，主要发现其具有镇静安神、抗焦虑、抗抑郁、抗肿瘤及心肌保护等广泛药理作用^[4]。细胞色素P450单加氧酶(CYP450)是参与植物代谢的最大酶家族，在三萜及甾醇骨架结构多样化及功能化修饰中具有关键作用；亚家族CYP51G，CYP85A，CYP90B-D，CYP710A，CYP724B和CYP734A与甾醇和类固醇激素的生物合成有关。针对CYP450基因在三萜及甾醇化合物形成过程中不同位点的修饰功能进行概述，重点探讨了陆地植物CYP450基因11个家族的进化及在双子叶、单子叶植物中五环三萜物质合成过程中的功能^[5]。化合物1-4显示微弱的抗肿瘤活患者（23.78?39.62μM）；而对化合物36?47测试结果表明，苷元为protoprimulagenin A的13β，28-环氧-齐墩果烷型三萜皂苷42?44对四种肝癌细胞株具有较好的抑制活患者（4.76?15.12μM）

^[6]。山茶属植物中的化学成分主要为黄酮类、皂苷类、多酚类、植物甾醇类、脂肪酸类和生物碱类等，以黄酮类及皂苷类成分研究较多，其中黄酮类成分主要是黄酮醇类，以槲皮素、山柰酚以及芹茶素最为常见；皂苷类成分主要为齐墩果烷型的五环三萜皂苷，其药理作用表现在抗肿瘤、抗过敏、降糖、降脂、抗炎、抗氧化、保护胃黏膜等方面^[7]。

综合来讲，通过对皂角刺中的化学成分进行研究，发现了一种新的五环三萜皂苷类化合物，该化合物的皂角皂苷c-28位连有糖链且糖链上连接有单萜基团，该化合物具有显著的抗乳腺癌活性。化合物1～3对Hela、MDA-MB-231、T47D细胞的生长抑制率随化合物浓度增高而增加；均能有效诱导Hela细胞发生凋亡；显著抑制了溶酶体的生成。且诱导线粒体破碎.结论 化合物3为首次从该植物中分离得到。化合物1～3有较强的抗肿瘤活性。五环三萜类化合物(Pentacyclic Triterpenoids)是一类分布广泛的天然活性物质。分为齐墩果烷(Oleanane)型、鸟苏烷(Ursane)型、羽扇豆烷(Lupane)型和木栓烷(Friede-lane)型四大类型。在牛奶菜属植物中发现的β-香树脂醇(β-amyrin)、白桦酯醇(betulin)、白桦酯酸(betulinic acid)和羽扇豆醇(lupeol)等。因其具有广泛而显著的生物活性(如抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、护肝、免疫调节、降糖降压等)作用，并在桦木酸、桦木醇、羽扇豆醇、桦木酮酸4种化合物中提取。

综上所述，五环三萜皂苷抗肿瘤作用和机制考虑与其抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、抗血管生成和抗侵袭相关，可作为有效治疗肿瘤患者的重要方法在临床实践中大力推广实施。

【参考文献】

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[7] 宋昱，史丽颖，卢轩，等. 山茶属植物的化学成分及药理活患者研究[J]. 中国药房，2018，29(15):2143-2148.

作者简介：王磊（1978.06-）女（汉族）安徽马鞍山 学历：本科 职称：助教 研究方向：医学检验 单位：马鞍山职业技术学院 邮编：243000

课题名称：具有抑制肿瘤血管形成的VEGF/VEGRF靶点抑制剂——新型三萜类似物 校级重点自然类科学研项目 项目编号：2021YLM020 安徽省自然科学研究项目 项目编号：KJ2021A1340