不同陈皮药材中橙皮苷的含量测定及薄层色谱鉴定

不同陈皮药材中橙皮苷的含量测定及薄层色谱鉴定

刘晗, ,陈小华 , ,赵揆

双峰县市场监管局食品药品检验检测所  湖南双峰  417700

娄底市中心医院                                        湖南娄底  417000

湖南福泰中药饮片有限公司                      湖南双峰   417700

摘要：目的：对不同来源的陈皮药材进行橙皮苷含量测定并建立薄层色谱快速鉴别。方法：采用高效液相法测定橙皮苷的含量，采用薄层色谱法进行鉴别。结果：橙皮苷含量除酸橙外，均符合药典标准，供试品色谱存在较大的差异。结论：薄层色谱能作为含量测定的补充，能全面反映陈皮药材的信息，作为一种简单快速鉴别不同来源陈皮药材的方法。

关键词：陈皮，广陈皮，橙皮苷，2-甲氨基-苯甲酸甲酯，高效液相，薄层色谱

一、前言：陈皮为芸香科植物橘Citrus  reticu1ata  B1anco及其栽培变种的干燥成熟果皮。具有理气健脾、和胃止呕、燥湿化痰的功效，用于脘腹胀满、食少吐泻、咳嗽痰多等症状。陈皮中含有黄酮，多糖，挥发油等成分。黄酮类成分具有良好的抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗菌、心血管保护和延缓皮肤衰老等药理活性，多糖类具有抗病毒、抗衰老、降血糖、免疫调节及抗肿瘤的作用。本实验收集不同来源的陈皮，用高效液相色谱法进行橙皮苷含量测定，并采用薄层色谱法对不同来源的陈皮药材进行鉴别,找出陈皮药材的简单可行的鉴别方法。

二、实验部分：

1，薄层色谱

1.1：实验仪器：薄层色谱展开缸（卧式，上海信友谊仪器厂有限公司）；硅胶G薄层板（10*20cm，青岛海洋化工有限公司）

1.2：实验材料：

药材：以沃柑、瓯柑、酸橙、黄金柚、冰糖柑、丑橘、枇杷柑、砂糖柑为来源的8种陈皮药材，橙皮苷对照品，

溶剂：

对照品：

1.3：方法与结果：

取本品粉末0.3g，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，取滤液5ml，浓缩至1ml，作为供试品溶液。

取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液1。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液项下的供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水（100:17:13）为展开剂，展至3cm,取出，晾干，再以甲苯－乙酸乙酯－甲醇－水（20:10:1:1）的上层溶液为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，喷三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

取2－甲氨基-苯甲酸甲酯对照品，加甲醇制成每1ml含0.lmg的溶液，作为对照品溶液作为对照提取物溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液项下的供试品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－乙酸乙酯－甲醇－水（10:4:2:0.5）10℃以下放置的上层溶液为展开剂，展至约5cm，取出，晾干，再以环己烷为展开剂，展至约8cm，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照提取物色谱和对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的荧光斑点

a供试品与橙皮苷对照品色谱相应位置上有相同颜色的斑点，但供试品色谱图相近，不能相互明显区分

b此条件下, 供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的荧光斑点,各个品种色谱特点有明显的区别，可以做为鉴别要点

2、高效液相含量测定

2.1实验仪器：高效液相色谱仪（岛津检测器spd-M20A，配有二元双泵、自动进样器、柱温箱、）；色谱柱（Agilent Eclipse XDB-C18 4.6*250mm 粒径5微米）；电子天平（梅特勒XS205DR））

2.2 实验材料：药材：同1.2

溶剂：甲醇（美国purite色谱纯）、乙腈（美国purite色谱纯）；

对照品：橙皮苷（成都普思生物，批号：PS011595）；

2.3实验条件

色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－水（22:78）为流动相；检测波长为283nm。理论板数按橙皮昔峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备  取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。
  供试品溶液的制备  取本品粗粉（过二号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W；频率40kHz）45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
  测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
  2.4 实验结果

本品按干燥品计算，含橙皮苷（C28H34O15）不得少于3.5%。结果：除酸橙外，均符合药典规定

橙皮苷对照品

三、分析与讨论

市场上陈皮的来源广泛，性状相似度非常高，目前尚无简单有效的方法进行区分，尤其当药材加工为饮片或粉末时鉴别难度大大增加，本实验用高效液相准确测定多种来源陈皮药材的橙皮苷含量，并提取薄层色谱图特征进行鉴别，方法简单，准确。有利于推动大规模陈皮产业的健康发展。

【参考文献】

【1】中国药典 ，一部 2020

【2】周欣，孙素琴，黄庆华等，陈皮储存年限的分析与鉴定  光谱学与光谱分析 2008,28（1）72-74

【3】李欣然，王静，余晓燕等，陈皮的研究进展  中国医药指南 2016,8（14）,31-32

【4】仇雪， 陈皮中陈皮素和橙皮苷含量测定，亚太传统医学 2015，11（7）,19-20

【5】张怀，陈明权，农根林等，新会陈皮质量控制研究，中国医药导报 2019,7（16）120-124

【6】黄少宏，梁惠明，彭敏等新会陈皮含量测定研究 食品与药品 2016,18（3）195-198

【7】李旻，陈美君，潘欢欢，中国实验方剂学杂志 2016，22（18）31-34

【8】肖珊美，杨晓东，刁银军等，基于紫外烘晒的陈皮化柑橘总黄酮含量测定 2020,61（5）1009-1010

【9】梁志云，昌水平，张明等 复方新会陈皮含片中橙皮苷、川陈皮素、橘皮素的含量测定，2012,30（16）36-38

【10】李文东，魏莹，赵玉玺等，高效液相色谱法测定不同品种来源陈皮中多甲氧基黄酮含量，2019,28（13）30-32