黑血藤质量标准的研究

黑血藤质量标准的研究

王倩,邱姗姗

茂名市食品药品检验所 广东省茂名市，525000

【别名】褐毛黎豆、肉麻绳、黑肉风、牛豆藤、老鸦花藤[1]，大果油麻藤[2]。

【概述】本品为豆科植物大果油麻藤Mucana macrco carpa wall.的老藤茎[2]。《中华本草》收载。历届《中国药典》均未收载，《广东省中药材标准》第一、二册也未收载。

【原植物】大型木质藤本。茎具纵棱脊和褐色皮孔，被伏贴灰白色或红褐色细毛，尤以节上为密，老茎常光秃无毛。羽状复叶具3小叶，叶长25-33厘米；托叶脱落；叶柄长8-13（-15）厘米；叶轴长2-4.5厘米，小叶纸质或革质，顶生小叶椭圆形、卵状椭圆形、卵形或稍倒卵形，长10-19厘米，宽5-10厘米，先端急尖或圆，具短尖头，很少微缺，基部圆或稍微楔形；侧生小叶极偏斜，长10.5-17厘米；上面无毛或被灰白色或带红色伏贴短毛，在脉上和嫩叶上常较密；侧脉每边5-6；小托叶长5毫米。花序通常生在老茎上，长5-23厘米，有5-12节；花多聚生于顶部，每节有2-3花，常有恶臭；花梗长8-10毫米，密被伏贴的淡褐色或深褐色短毛和稀疏深褐色或红褐色细刚毛；苞片和小苞片脱落；花萼密被伏贴的深褐色或淡褐色短毛和灰白或红褐色脱落的刚毛，花萼宽杯形，长8-12毫米，宽12-20毫米，2侧齿长3-4毫米，最下齿长5-6毫米；花冠暗紫色，但旗瓣带绿白色，旗瓣长3-3.5厘米，先端圆，基部的耳很小，长约1毫米，翼瓣长4-5.2厘米，宽1.5-1.7厘米，瓣柄长5-7毫米，耳长3-5毫米，龙骨瓣长5-6.3厘米，瓣柄长8-10毫米，耳长1-3毫米；雄蕊管长4.5-5.5厘米。果木质，带形，长26-45厘米，宽3-5厘米，厚7-10毫米，近念珠状，直或稍微弯曲，密被直立红褐色细短毛，部分近于无毛，具不规则的脊和皱纹，具6-12颗种子，内部隔膜木质，厚1-5毫米，边缘加厚，无沟槽，与边缘相平行处常具不规则木质脊，但沿背腹缝线边缘无圆形的坚硬凸起；种子黑色，盘状，但稍不对称，两面平，长2.2-3厘米，宽1.8-2.8厘米，厚5-10毫米，种脐围绕种子周围的3/4或更多，暗褐色或黑色。花期4-5月，果期6-7月[2]。产云南、贵州、广东、海南、广西、台湾。生于海拔800-2500米的山地或河边常绿或落叶林中，或开阔灌丛和干沙地上。印度、尼泊尔、锡金、缅甸、泰国、越南和日本也有分布[2]。

图1、黑血藤原植物图                 图2、黑血藤原植物图

化学成分】含有羽扇烯酮、无羁萜、β—谷甾醇、△5，22—豆甾烯酸、二十四烷酸α—单甘油酯、二十五烷酸α—单甘油酯、二十六烷酸α—单甘油酯[3]。

【鉴别】本品的粉末显微鉴别和薄层色谱鉴别。

1、粉末显微特征：本品粉末黑褐色。

      棕红色色素块众多，散在，形状、大小不一。草酸钙方晶较多，散在或成片存在于厚壁细胞，呈类双锥形、菱形或不规则形。石细胞呈长方形、类圆形或类方形，直径20～75μm，散在或成群，有的具孔沟、层纹,壁较厚；有的壁较薄，充满棕色物。纤维束周围细胞常含草酸钙方晶，形成晶纤维。木全细胞红棕色，表面观呈类长方形或多角形。多细胞非腺毛少，多断碎，有的含棕色物。以具缘纹孔导管为主，直径50～400μm。

      图3、色素块（×400）                      图4、草酸钙方晶（×400）

  图10、石细胞（×400）                       图11、石细胞（×400）

  图12、石细胞（×400）                        图13、晶纤维（×400）

图14、木栓细胞（×400）

图15、多细胞非腺毛（×400）                  图16、具缘纹孔导管（×400）

2、薄层色谱鉴别

黑血藤含β—谷甾醇等成分，故建立了相应的薄层色谱鉴别方法。

（1）仪器与材料

仪器：Sony  Cyber—shot数码照相机。

试剂： 高效硅胶G预制板；环己烷，乙醚，乙酸乙酯，硫酸，乙酸钠，乙醇均为分析纯。β—谷甾醇对照品（中国食品药品检定研究院，批号110851-201407）

供试品：黑血藤（批号20141105、20141112、20141120、20141128、20141210），

见表1。

黑血藤对照药材：广东药学院刘基柱副教授鉴定，鉴定编号2015007。

（2）方法与结果

供试品溶液制备：取黑血藤粉末（过2号筛）2.5g，加无水乙醇20ml，超声处理20分钟，离心，取上清液，水浴蒸干，立即取出，放冷，残渣加丙酮1ml使溶解，离心，取上清液作为供试品溶液。

对照药材溶液制备：取黑血藤对照药材2.5g，同法制成对照药材溶液。

对照品溶液制备：称取β—谷甾醇对照品2.2mg，置2ml量瓶中，加丙酮至刻度使溶解，摇匀。

薄层板： 3%醋酸钠高效硅胶G预制板

点样：供试品溶液与对照药材溶液各4μl，对照品溶液3μl。

 展开剂：环已烷—乙醚—乙酸乙酯（20：5.5:2.5）

 展开方式：上行展开

 显色剂：10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点清晰（约5分钟）。

检视：日光下

结果：供试品色谱中，在与黑血藤对照药材、β—谷甾醇对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。见图   。

1  2  3  4  5  6  7

                          图17、  黑血藤薄层色谱图

      点样顺序：1、样品1（批号20141105）

                2、样品2（批号20141210）

                3、样品3（批号20141112）

                4、样品4（批号20141120）

                5、样品5（批号20141128）

        6、黑血藤对照药材（广东药学院刘基柱副教授鉴定，鉴定编号2015007）

                7、β—谷甾醇对照品

（3）方法学考察

不同薄层板的比较：选取不同品牌的3%醋酸钠硅胶G预制薄层板和自制的3%醋酸钠硅胶G薄层板（以0.3%羧甲基纤维素钠为黏合剂），分别按拟定的试验方法试验。结果表明，四种薄层板均能达到鉴别要求，其中自制薄层板斑点分离度较好，色谱效果更佳。

不同温度的比较：取点样后的薄层板分别在6℃和常温25℃的温度环境下进行展开。结果表明该方法对不同温度的适应性较好，

不同湿度的比较：取点样后的薄层板，分别在20%和75%的湿度中展开。结果表明该方法对不同湿度环境适应性较好。，

【检查】

1、水分

照水分测定法（中国药典2020年版四部0832第二法）测定。实测样品5批，结果为9.5%～10.0%，平均值9.66%。以平均值的120%为限，规定本品水分不得过12.0%。

2、总灰分

照灰分测定法（中国药典2020年版四部 2302）测定。实测样品5批，结果为2.7%～3.0%，平均值2.9%。以平均值的120%，规定本品总灰分不得超过3.4%。

3、酸不溶性灰分：

照灰分测定法（中国药典2020年版四部 2302）测定。实测样品5批，结果为0.3%～0.4%，平均值0.38%。以平均值的120%，规定本品酸不溶性灰分不得超过0.5%。。

【浸出物】

分别以乙醇、稀乙醇和水为溶剂，分别照醇溶性浸出物和水溶性浸出物项下的热浸法（中国药典2020年版四部 2201）测定1批样品的浸出物含量，结果三种溶剂测得的浸出物分别为14.3%、19.9%和20.9%，采用水为溶剂的浸出物最高。故选用水为测定本品浸出物的溶剂，实测样品5批，结果为19.2%～20.9%,平均值19.7%。以测定结果平均值的80%为限，规定本品浸出物不得少于15.0%。

【炮制】割取藤茎，切片，晒干或鲜用。

【性味与归经】苦、涩，凉。归肝肾经。

【功能与主治】补血凉血，清肺润燥，通经活络。适用于贫血、月经不调、肺热燥咳、咳血、腰膝酸痛、风湿痹痛、手足麻木、瘫痪。

【用法与用量】15～30g；或泡酒。外用：适量，煎水熏洗；或炒热包敷。

【贮藏】置干燥处。

参巧文献

[1]王国强主编，《全国中草药汇编》（卷三），第3版，北京：人民卫生出版社，591

[2]中国科学院《中国植物志》编委会，《中国植物志》第41卷，北京：科学出版社

[3]胡旺云、罗士德、蔡建勋，《中草药》，1994-2-15

                                         —16—