头花龙胆正丁醇部位裂环烯醚萜类化学成分研究

 头花龙胆正丁醇部位裂环烯醚萜类化学成分研究

杨惠云1 ,王甜2

（1.云南经济管理学院，云南昆明  650000；2.信阳市中心医院,河南信阳  464000）

摘要：本文通过研究药用植物头花龙胆(Gentiana cephalantha Franch.)正丁醇部位裂环烯醚萜类化学成分，得出结论：从微籽龙胆氯仿部位中分离鉴定了4个裂环烯醚萜类化合物且均为首次从该植物中分离得到。

关键词：头花龙胆；正丁醇部位；裂环烯醚萜

本研究重点对头花龙胆正丁醇部位的裂环烯醚萜类化学成分进行系统分离纯化，为后续开发利用该药用植物资源提供科学依据。本实验分离鉴定了4 个裂环烯醚萜类化合物，且4个化合物均为首次从该植物中分离得到。

1实验仪器与材料

1.1实验仪器

Bruker Advance-400 MHz 型核磁共振仪（NMR），四甲基硅烷（TMS）为内标；上海亚荣生化仪器厂生产的旋转蒸发仪 RE-2000A；TU-1901双光束紫外可见分光光度计（UV2550北京谱析通用仪器有限责任公司）；Nicolet 380 FT-IR（Nicolet 380科学仪器部）KBr压片；SGW-3自动旋光仪（上海仪电物理光学仪器有限公司）；VG Autospec-3000 型高分辨质谱仪；HP5989A 质谱仪；干燥箱（上海博讯实业有限公司）；SHD-Ⅲ型循环真空泵；电子天平、分析天平；Sephadex LH-20（Amersham Biosciences, Sweden）；ODS；MCI；柱层析硅胶（300~400目）和薄层色谱硅胶板GF254（青岛海洋化工厂）。

1.2实验试剂和材料

正丁醇、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、石油醚均为工业纯重蒸后使用，甲醇（分析纯），NaOH（分析纯），浓硫酸，氘代甲醇、氯仿、吡啶、水（百灵威）；本研究使用的药用植物：头花龙胆(Gentiana cephalantha Franch.)全草；采集时间：2020年8月；采集地点：云南大理；标本编号：YHY-20200823。

2实验方法

提取与分离：

干燥头花龙胆全草3.0 kg，粉碎，依次使用 95%乙醇10 L冷浸提取3次，每次24h，收集3次提取液，并进行减压蒸馏浓缩成浸膏(0.8 kg)，将浸膏水溶，依次使用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行双相萃取，得到四个不同极性部位：石油醚(65 g)、乙酸乙酯(98 g)、正丁醇(105 g)和纯水(130 g)。将正丁醇部位以硅胶(80-100目)为固定相进行柱层析分离，以乙酸乙酯-甲醇(体积比50:1-1:1)为洗脱剂，进行梯度洗脱，结合TLC薄层检测，得到5个组分(A～E)。

将B组分以氯仿-甲醇(体积比20:1-1:1)为洗脱剂，进行梯度洗脱，结合TLC薄层检测，得5个组分(B1-4)，4个组分反复经硅胶(200～300目)柱层析(氯仿-甲醇15:1-8:1)、Sephadex LH-20(氯仿-甲醇1:1)和Sephadex LH-20(甲醇)分离纯化得化合物 1(5 mg)、2(11 mg)、3(8 mg)、4(9 mg)。

3结果

结构与鉴定：

化合物1：秦艽苷A，白色粉末；1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.40 (1H, d, J = 4.4 Hz, H-1), 5.50 (1H, d, J = 1.4 Hz, H-3), 4.23 (1H, d, J = 2.2 Hz, H-6), 4.40 (2H, m, H-7a, H-7b), 5.77 (1H, m H-8), 3.23 (1H, m, H-9), 5.31 (1H, m, H-10a), 5.36 (1H, m, H-10b), 3.49 (3H, s, 3-OCH3), 4.76 (1H, d, J= 7.9 Hz, H-1′), 3.12-3.43 (3H, m, H-2′-5′), 3.84 (1H, m, H-6a′), 3.62 (1H, m, H-6b′); 13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 121.23 (C-4), 123.21 (C-10), 94.89 (C-3), 62.48 (C-6′), 95.21 (C-1), 163.20 (C-11), 134.41 (C-8), 46.74 (C-9),  152.89 (C-5), 99.03 (C-1′), 78.35 (C-5′), 61.88 (C-6), 77.83 (C-3′), 74.70 (C-2′), 73.56 (C-7), 71.53 (C-4′), 56.63 (3-OCH3)。与参考文献[1]一致。

化合物2：獐芽菜苷，黄色油状；1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.47 (1H, d, H-1), 4.66 (1H, d,

J = 7.8 Hz, H-1′), 7.39 (1H, d, J = 2.7 Hz, H-3), 5.56 (1H, m, H-8), 3.29 (1H, m, H-9), 5.28 (2H, m, H-10), 1.28 (1H, m, H-5), 1.68 (2H, m, H-6a, H-6b), 4.43 (1H, m, H-7a), 3.79 (1H, m, H-7b), 3.12 (1H, dd, J = 9.2, 7.8, H-2′), 3.31 (1H, m, H-3′), 3.25 (1H, m, H-4′), 3.27 (1H, m, H-5′), 3.87 (1H, dd, J = 12.0, 2.1 Hz, H-6′a), 3.64 (1H, dd, J = 12.0, 5.8 Hz, H-6′b)。与参考文献[2]一致。

化合物3：獐芽菜苦苷，白色油状；1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.83 (1H, m, H-1), 7.41 (1H, d, J = 2.3 Hz, H-3), 5.22 (2H, m, H-10), 2.68 (1H, m, H-9), 5.70 (1H, m, H-8),1.83 (1H, m, H-6a),, 4.18 (1H, m, H-7a), 1.58 (1H, m, H-6b)4.08 (1H, m, H-7b), 4.77 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-1′), 3.21 (1H, m, H-2′), 3.23 (1H, m, H-3′), 3.38 (1H, m, H-4′), 3.28 (1H, m, H-5′), 3.82 (1H, dd, J = 13.0, 2.1 Hz, H-6′a), 3.63 (1H, dd, J = 13.0, 6.0 Hz, H-6′b)；13C-NMR (100 MHz, CD3OD) δ: 98.12 (C-1), 153.01 (C-3), 33.45 (C-6), 65.76 (C-5), 109.38 (C-4), 133.21 (C-8), 66.10 (C-7), 52.01 (C-9),  167.89 (C-11), 99.98 (C-1′), 121.41 (C-10), 79.08 (C-5'), 76.85 (C-3′), 74.14 (C-2′), 71.43 (C-4′), 64.32 (C-6′)。与参考文献一致。

化合物4：龙胆苦苷，白色粉末；1H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ: 5.55 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-1), 7.28 (1H, d, J = 2.1 Hz, H-3), 5.56 (1H, qd, J = 2.8, 1.7, 1.2 Hz, H-6), 4.79 (2H, m, H-7), 5.78 (1H, ddd, J = 17.2, 10.3, 6.9 Hz, H-8), 3.21 (1H, d, J = 9.2 Hz, H-9), 5.22 (2H, m, H-10), 4.48 (1H, d, J = 7.9 Hz, H-1′), 3.11 (1H, dd, J = 9.1, 8.0, H-2′), 3.21 – 3.24 (3H, m, H-3′, H-4′, H-5′), 3.79 (1H, dd, J = 11.9, 2.0 Hz, H-6′a), 3.62 (1H, dd, J = 11.9, 6.2 Hz, H-6′b)。与参考文献一致。

4 讨论

本研究对龙胆科龙胆属植头花龙胆（Gentiana delavayi)的正丁醇部位的化学成分进行了研究，分离并鉴定4个裂环烯醚萜类化合物。近年来文献报道，此类化合物在保肝、抗炎、神经系统保护、抗癌等方面具都有较好的药理作用。综上所述，此研究丰富了微籽龙胆的化学成分，对后续的研究工作奠定了一定的参考价值。

参考文献

[1] 柳庆龙, 陈阿虹, 唐进英,等. 胆木枝叶的化学成分研究[J]. 中草药, 2017, 48(1):6.

[2] 王晓燕, 孙磊, 乔善义. 六味地黄苷糖中糖苷部位的化学成分研究[J]. 中国中药杂志, 2012(17):5.