比较酶联免疫吸附法与胶体金法在乙肝病毒血清检验中的效果及价值

(整期优先)网络出版时间:2022-11-23
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比较酶联免疫吸附法与胶体金法在乙肝病毒血清检验中的效果及价值

杨慧

南京明基医院,江苏 南京210019

摘要目的:探讨ELISA和胶体金法在乙肝病毒血清检验的作用和价值。方法:选择从2020年6月到2021年5月,本院共确诊的120例疑似乙肝患者,对患者分别采用ELISA法(ELISA组)和胶体金法(胶体金组)检测,比较两组HBV相关指标的检出率和诊断率以及诊断效能。结果:在病理诊断中有60例病人确诊为乙肝,检测两组的 HBV相关指数未见明显差别(P>0.05);ELISA组测定乙肝表面抗原(HBsAg)的阳性率明显高于胶体金组(P<0.05);ELISA组的诊断灵敏度为95.00%,特异度为95.00%,阳性预测值95.00%;其中,胶体金组为73.33%,80.00%,78.57%,75.00%,76.67%,ELISA组高于胶体金组(P<0.05);结论:ELISA法比胶体金法在 HBV血清检测中的检测效率和准确度均更高,是一种值得推广的方法。

关键词胶体金法;酶联免疫吸附法;血清检验;乙肝病毒

引言:我国是乙肝的高发地区,HBV病毒携带人群约有10%,传播途径以血液、母婴和性接触为主,对人体的健康造成了很大的威胁。目前,国内对 HBV感染的诊断方法是通过检测 HBsAg ,最常用的是酶联免疫吸附法(ELISA),该方法操作简单,快速,灵敏度高,精确度高;胶体金标法是基于 ELISA技术发展起来的一项新技术,它的特点是操作简单,快速,可单份检测,便于保存,无需特殊的设备,在 HBsAg的初步筛选中也得到了广泛的应用。本文对比了两种检测方法,用酶联免疫吸附法和胶体金法进行了对比分析。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2020年6月至2021年5月我院收治的疑似乙肝120例患者,其中男68例、 女52例,年龄18~85岁,平均( 45.64± 5.39)岁。

1.2检测方法

所有病人都必须在一个小时内不吃东西,清晨,取5 mL的空腹静脉血,离心速度为3000 r/min,保持10分钟的离心时间,血清分离后进行检验。ELISA组由艾德康生物技术有限公司研制的 ELISA600组测试设备。由上海科华公司提供试剂盒;由万孚生物研制胶体金组试纸条。病理学检查全部由医院病理科统一进行。

1.3统计学处理

采用SPSS24.0软件统计分析数据,计数类数据、计量类数据分别采用χ2检验、t检验,以[n(%)]、(±s)描述,以α=0.05为标准,观察P值,若P<0.05代表差异显著,表明有统计学意义。

2.结果

2.1两组乙肝病毒相关指标检出率比较

ELISA组与胶体金组在乙肝病毒相关指标(HBcAb、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBsAg)检出率上比较无显著差异(P>0.05),见表1。

1  两组乙肝病毒相关指标检出率比较[n( %) ]

分组

例数

HBcAb

HBsAb

HBeAg

HBeAb

HBsAg

胶体金组

120

60(50.00)

28(23.33)

8(6.67)

55(45.83)

56(46.67)

ELISA组

120

56(46.67)

30(25.00)

12(10.00)

58(48.33)

58(48.33)

χ2

0.267

0.091

0.802

0.151

0.067

P

0.725

0.856

0.621

0.759

0.897

2.2两组检测HBsAg阳性率比较

经病理诊断共确诊60例乙肝患者,ELISA组检测HBsAg阳性率显著高于胶体金组(P<0.05),见表2。

2  两组检测HBsAg阳性率比较

分组

病理诊断

合计

阳性

阴性

胶体金组

阳性

44

12

56

阴性

16

48

64

ELISA组

阳性

57

3

60

阴性

3

57

60

3讨论

目前,我国常用的HBsAg测定方法有ELISA法和胶体金标法。ELISA的基本原理是:

①在特定的固相载体上粘附抗原或抗体,并能维持其免疫功能。

②将抗原或抗体与某种酶连结成酶标抗原或抗体,该酶标记的抗原或抗体可以保持其免疫活性,而且还能保留酶的活性。在进行测定时,将样品与酶标记的抗原或抗体按照不同的程序进行反应。用清洗法分离出在固相载体上所形成的抗原抗体复合物,最终在固定载体上加入的酶的数量与样品中所含的物质数量呈一定的比例。当添加到酶反应基质之后,底物通过酶的作用而变成有色的产物,产物的量直接关系到样品中被检测的物质的数量,因此,可以通过对颜色的反应程度进行定量和定性的研究。因为这些酶具有高的催化效率,可以将反应的影响扩大到最大。使该方法具有较高的灵敏度。胶体金法采用硝酸纤维素膜为载体利用微孔膜的毛细管作用,在膜的一端滴入的液体缓慢地从一端流到另一端,犹如层析一样[1]

③当液体在干燥的片材下端流动时,会在干片材上的免疫金复合物复溶,并将其拉入膜条中。如果样本中存在需要检测的特异性抗原,此时可与免疫金络合物的抗体相结合,将该抗原抗体复合流送到测试区,该固相抗体得到,在膜条上显示出红色的反应线。多余的免疫金络合物还在往前走,将至参照区与免疫小鼠的IgG结合,并呈现出一条红色的品质控制线。相反,阴性样品没有任何反应,只显示质控线条。

调查显示,ELISA技术不仅能用于抗原的检测,还可在抗体测试中使用,由于检验技术的进步,其诊断的准确性不断提高。有研究证明,ELISA方法可以用酶免疫分析仪进行大量的检测,重复性较好,并具有定量和半定量检测的优势,然而这种方法也有其不足之处,因为长时间的测试,易受各种原因的影响,例如清洗的彻底性,反应温度和反应的时间,在急诊检测时,不能使用[2]

本研究结果表明:ELISA检测在HBV相关指标检出率上比胶体金检测的HBV值稍高,但两组间的差异均不显著(P>0.05);而用ELISA方法测定HBsAg的阳性率明显高于胶体金法(P<0.05)。诊断灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值均显著高于胶体金法(P<0.05)。说明ELISA诊断效果良好。另外,ELISA的诊断准确率高于胶体金法(P<0.05),这表明ELISA法的准确性较高。

参考文献

[1]刘园园,杨玉琮.比较酶联免疫吸附法与胶体金法在乙肝病毒血清检验中的效果及价值[J].世界最新医学信息文摘,2021(14):2.

[2]向昱.用酶联免疫吸附试验,胶体金法对丙型肝炎病毒的检测效果对比[J].人人健康,2020,(08):12-12.